пособиеПр

51

ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ 1-е практическое занятие. Физико-химические свойства крови.

Внутренняя среда организма. Понятие о гомеостазе и гомеокинезе. Значение поддержания постоянства внутренней среды организма. Система крови, её свойства и функции. Состав крови, основные физиологические константы, саморегуляторный принцип их поддержания. Кислотнощелочное состояние в организме, системы, обеспечивающие поддержание рН крови. Понятие об ацидозе и алкалозе (компенсированные, декомпенсированные, дыхательные и метаболические). Осмотическое давление крови, его значение для деятельности клеток. Механизмы, обеспечивающие постоянство осмотического давления крови. Осмотическая устойчивость эритроцитов. Белки плазмы крови, их функциональное значение. Скорость оседания эритроцитов, факторы на неё влияющие. Онкотическое давление, его роль в обмене жидкости между кровью и тканями (модель Старлинга). Отношения объёмов плазмы и форменных элементов к общему объёму крови. Гематокритный показатель. Плотность крови. Клиническое значение этих показателей.

Вопросы программированного контроля по теме занятия.

1.Что характерно для внутренней среды организма?

2.Как называется совокупность скоординированных реакций, поддерживающих постоянство внутренней среды организма?

3.Каким термином обозначается комплекс процессов, направленных на поддержание постоянства внутренней среды организма?

4.Что характерно для межклеточной (тканевой, интерстициальной) жидкости?

5.Что характерно для лимфы? Каковы функции и количество?

6.Количество крови в организме взрослого человека (в л, в % от веса тела, в мл/кг)?

7.Функции крови. Какая основная?

8.Величины гематокритного показателя в нормальных условиях у мужчин, у женщин?

9.Удельный вес (плотность) крови. Его изменение при обильном выделении воды из организма?

10.Какие величины (г/л) соответствуют общему количеству белков плазмы крови? Каковы функции белков плазмы крови?

11.Что такое онкотическое давление, его величины?

12.При каких величинах онкотического давления (в мм.рт.ст.) будет обезвоживание организма, при каких отёки?

13.От каких факторов зависит транскапиллярный обмен воды?

14.Чему равно осмотическое давление плазмы крови? Какими ионами оно в основном создаётся? Какими механизмами регулируется?

15.Чему равна вязкость крови? От чего она зависит? Как зависит гидродинамическое сопротивление от вязкости крови?

16.Какие показатели характеризуют кислотно-щелочное состояние (КЩС)?

17.Какие системы и органы обеспечивают относительное постоянство рН крови?

18.Что такое ацидоз, алкалоз? Какие признаки характерны для компенсированных, декомпенсированных, респираторных, метаболических ацидозов и алкалозов?

19.Какие причины могут вызвать увеличение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)?

20.Какие величины (мм/час) СОЭ у мужчин и женщин в нормальных условиях?

21.Что такое гемолиз? Виды гемолиза?

22.О чём свидетельствует увеличение и уменьшение осмотической устойчивости эритроцитов?

Практические работы. 1. Взятие капиллярной крови для исследования.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с техникой взятия крови.

ОСНАЩЕНИЕ: одноразовый (стерильный) скарификатор; капилляр Панченкова; часовое или предметное стекло с лункой; 70% спирт; спиртовая настойка йода; ватные тампоны; одноразовые резиновые перчатки.

52

ХОД РАБОТЫ: Человек, осуществляющий забор крови, надевает одноразовые стерильные перчатки. Кровь целесообразно брать из 4-го пальца левой ("нерабочей") руки. Кожа подушечки пальца протирается ватным тампоном, смоченным 70% спиртом. После высыхания, мякоть пальца в области предполагаемого укола слегка сдавливается левой рукой. В правую руку берётся скарификатор, который ориентируется строго перпендикулярно поверхности кожи в месте укола (слева от срединной линии на некотором расстоянии от ногтя). Укол проводят быстро, на всю глубину копья, поперёк дактилоскопических линий. Первая капля удаляется сухой ватой, так как она содержит лимфу и повреждённые форменные элементы. Последующие капли обычно выступают сами, без надавливания. Если кровь свернулась и больше не идёт, необходимо слегка помассировать палец с боков в направлении от основания к верхушке, после чего вновь выступит капля крови. К выступающей капле крови под углом 45º подносят промытый цитратом натрия капилляр Панченкова. По мере того, как кровь поднимается в капилляр, изменяют его положение до горизонтального, а затем опускают несколько ниже. Следят, чтобы в капилляр не попали капли воздуха. Если это произошло, выпускают кровь с пузырьком на сухую ватку и набирают снова. Взятую кровь распределяют следующим образом: 1) по небольшой капле наносится на предметные стёкла для мазков; 2) до метки «0» («К») выпускается на часовое или предметное стекло с лункой для определения количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина; 3) на часовое стекло с 5% раствором цитрата натрия для определения СОЭ. По завершении взятия крови, к месту укола прикладывается ватный тампон с йодом.

2. Определение гематокритного показателя с помощью центрифуги Шкляра.

ЦЕЛЬ: освоить методику определения гематокритного показателя (гематокрита). ОСНАЩЕНИЕ: кровь донорская, спирт, вата, раствор гепарина, центрифуга Шкляра.

Гематокрит - отношение объёма форменных элементов крови к общему объёму крови (или доля объёма, которую занимают форменные элементы). В норме гематокрит составляет: у женщин 0,36

- 0,42 (36 - 42%); у мужчин 0,40 - 0,48 (40 - 48%); в среднем 0,45 (45%).

3.Определение плотности (удельного веса) крови.

ЦЕЛЬ: освоить методику определения плотности крови.

ОСНАЩЕНИЕ: кровь донорская, пробирки, раствор сульфата меди (медного купороса) нормальной плотности (1, 050-1,064).

ХОД РАБОТЫ: в пробирку с раствором сульфата меди (медного купороса) нормальной плотности (1, 050-1,064) добавляют каплю крови. Если капля крови плавает посередине столба жидкости - плотность крови равна плотности жидкости; если тонет - плотность крови больше плотности жидкости (уменьшена доля плазмы); если плавает сверху - плотность крови меньше плотности жидкости.

Полученный результат и вывод:

4.Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) методом Т.В.Панченкова.

Оседание эритроцитов - свойство осаждаться на дне сосуда (капилляра) при сохранении крови в несвертывающемся состоянии в виде так называемых "монетных столбиков", над которыми образуется слой прозрачной жидкости - плазмы. Эритроциты оседают в результате того, что их относительная плотность больше, чем относительная плотность плазмы. На величину СОЭ влияют белки (особенно крупнодисперсные) плазмы, которые, при адсорбции на отрицательно

54

надосадочной жидкости. При его отсутствии наблюдается бесцветный раствор и большое количество осадка. При частичном гемолизе - появление окраски надосадочной жидкости (розовение) и уменьшение осадка. При полном гемолизе эритроцитов - интенсивная краснолаковая окраска надосадочной жидкости и отсутствие осадка.

Частичный гемолиз характеризуется окрашиванием раствора и появлением осадка неразрушенных эритроцитов. Начало гемолиза (минимальная его степень) определяется по легкому порозовению (при визуальном определении гемолиза количество рабочего раствора в пробирке должно быть меньше 1,0 мл). Бесцветный раствор и большое количество осадка свидетельствуют об отсутствии гемолиза.

Определить, при какой концентрации раствора хлорида натрия наступает гемолиз и сделать вывод об осмотической устойчивости исследованных эритроцитов.

2-е практическое занятие. Форменные элементы крови.

Физиологическая характеристика эритроцитов. Понятие об эритроцитозе и эритропении, анизоцитоз, пойкилоцитоз.

Гемоглобин, его виды и соединения, возрастные изменения, физиологическое значение. Цветовой показатель.

Физиологическая характеристика лейкоцитов. Лейкоцитарная формула и её клиническое значение. Понятие о лейкоцитозе и лейкопении. Изменение картины периферической крови при физических нагрузках.

Кроветворение, регуляция.

Методы подсчёта форменных элементов в камере Горяева.

Вопросы программированного контроля по теме занятия.

1.Сколько эритроцитов в одном литре крови: у мужчин, у женщин?

2.Какие функции выполняют эритроциты, что для них характерно?

3.Что такое эритроцитоз, эритропения?

4.Что характеризует кривая Прайс-Джонса? Что такое микроцитоз, макроцитоз, анизоцитоз, пойкилоцитоз?

5.Какие методы используются для определения количества эритроцитов?

6.Какие из указанных величин соответствуют содержанию гемоглобина в крови женщин, мужчин?

7.Что характерно для гемоглобина плода, новорожденного, взрослого?

8.Соединения гемоглобина.

9.Чему равен цветной показатель и о чём он говорит? Как определяется?

10.Какие функции выполняют лейкоциты? Сколько их в одном литре крови?

11.Что такое лейкоцитоз и лейкопения? Причины их вызывающие?

12.Какие лейкоциты относятся к гранулоцитам и к агранулоцитам?

13.Каковы функции базофилов, эозинофилов, нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов? Каково их % содержание?

14.Как определяется лейкоцитарная формула? Причины её сдвига вправо, влево?

15.В каких случаях будет меняться соотношение зрелых и молодых нейтрофилов?

16.Что характерно для процесса кроветворения (гемопоэза), в каких органах он протекает? Что характерно для костного мозга, его функции?

17.Какие факторы поддерживают эритроцитарное равновесие в организме?

18.Каковы свойства стволовой полипотентной клетки, частично детерминированной клетки, унипотентной клетки?

19.Какие функции выполняет микрососудистый компонент короткоранговой регуляции кроветворения?

20.Какие факторы могут принимать участие в специфической дальноранговой регуляции гемопоэза?

21.Какие факторы участвуют в неспецифической регуляции гемопоэза?

55

Практические работы.

Счётная камера Горяева представляет собой толстую стеклянную пластину (предметное стекло) с углублением в центре, равным 1/10 мм. На дне камеры нанесены две сетки Горяева, разграниченные глубокой поперечной канавкой. Сбоку от сеток находятся стеклянные прямоугольные пластинки, к которым притирают специальные шлифовальные покровные стекла. Сетка Горяева представляет собой квадрат 3 х 3 мм, который разделен сверху и слева на 15 равных частей и состоит из 225 больших квадратов. Каждый третий ряд как сверху, так и слева разделен еще на 4 части и таким образом на пересечении образуются квадраты, разделенные на 16 малых. Большие квадраты, рассеченные вертикально и горизонтально на 16 малых квадратов чередуются с квадратами, разделенными только вертикальными или горизонтальными линиями; и квадратами чистыми, без линий.

Сторона большого квадрата 1/5 мм; площадь большого квадрата 1/25 мм2; глубина камеры равна 1/10 мм; объем большого квадрата 1/250 мм3.

Сторона малого квадрата 1/20 мм; площадь малого квадрата 1/400 мм2; глубина камеры равна 1/10 мм; объем малого квадрата 1/4000 мм3.

Для исключения ошибок подсчёта форменных элементов, связанных с их нахождением на границах квадратов, применяют правило Егорова: клетки считают внутри квадрата и на его верхней и левой границах.

1. Подсчёт эритроцитов в камере Горяева.

Камера Горяева должна быть сухой и чистой. К ней притирают покровное стекло до появления радужных полос (только при этих условиях соблюдается правильный объем камеры). Смеситель (меланжер) также должен быть чистым и обязательно сухим, на его короткий капилляр надевают резиновую трубку с грушей. В меланжер для эритроцитов (красная палочка в шарообразном расширении) до нижней метки "0,5" набирают кровь, погрузив в нее кончик смесителя; затем до метки "101" за шарообразным расширением 3% гипертонический раствор, в котором эритроциты сморщиваются - кровь разводится в 200 раз. Кровь набирают строго до метки, но если получилось больше, необходимо выпустить на ватку или фильтровальную бумагу. Закончив набор жидкости, переведите смеситель (меланжер) в горизонтальное положение, снимите резиновую трубку, закройте капилляр с обеих сторон большим и указательным пальцами и тщательно перемешайте кровь с жидкостью в расширении смесителя, встряхивая его. Кровь готова для подсчета эритроцитов. Полученной смесью заполняют счетную камеру Горяева. После заполнения камеры оставьте на 1-2 минуты в покое для оседания форменных элементов, приступайте к подсчету при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения (диафрагма прикрыта и несколько опущен конденсор). Эритроциты считают в 5 больших (5 * 16 = 80 малых) квадратах. Подсчёт производят по формуле: Э = А*4000*200*10^6/80 где Э - количество эритроцитов в 1 л крови; А - сумма эритроцитов в 5-ти больших квадратах (80-

ти малых); 4000 - множитель, приводящий к объёму крови 1 мкл (объём малого квадрата 1/4000 мкл); 200 - разведение крови (кровь в меланжере разводится в 200 раз); 80 - число малых

56

квадратов; 10^6 - количество мкл в одном литре. Количество эритроцитов в норме: у женщин

3,9-4,7 10^12 /л; у мужчин 4-5 10^12 /л.

Произведите подсчёт количества эритроцитов в 1 л крови, сделайте заключение о соответствии полученных результатов нормативным.

2. Определение содержания гемоглобина методом Сали.

Содержание гемоглобина крови в норме у взрослых: у мужчин 130-160 г/л; у женщин 120-140 г/л. Суточные вариации содержания гемоглобина в периферической крови достигают 15% с максимумом по утрам. У жителей северных регионов и высокогорных районов уровень гемоглобина нередко оказывается выше приведенных значений на 10 г/л. У пожилых людей (старше 65 лет) нижняя граница нормы показателя достигает 122 г/л у мужчин и 110 г/л у женщин.Гемометр Сали представляет собой штатив и состоит из 3 пробирок одинакового диаметра. Одна (средняя) пробирка - пустая, две другие запаяны и содержат стандартный раствор солянокислого гематина определенной окраски. Интенсивность окраски стандарта соответствует идеальной норме - содержанию гемоглобина 166,7 г/л (16,67 г%).

ЦЕЛЬ: освоить определение содержания гемоглобина по методу Сали.

ОСНАЩЕНИЕ: гемометр Сали; 0,1Н раствор хлористоводородной кислоты; дистиллированная вода, капилляр (0,02 мл) стеклянная палочка.

Определите концентрацию гемоглобина в образце крови, предлагаемой для исследования; сделайте заключение о соответствии полученных вами данных нормативам.

3. Расчёт цветового показателя.

Цветовым показателем (ЦП) называют условную величину, характеризующую степень насыщения гемоглобином каждого эритроцита. Этот показатель можно вычислить, зная содержание гемоглобина в исследуемой крови и количество эритроцитов в 1 мкл этой же крови.

ЦП = Нв (г/л) * 3 / (три первых цифры от числа эритроцитов) В норме цветовой показатель равен 0,85 - 1,15 - нормохромазия.

Превышение ЦП верхнего предела нормы называют гиперхромазией, уменьшение за предел нижнего уровня нормы - гипохромазией.

ХОД РАБОТЫ: определив в исследуемой крови содержание гемоглобина и эритроцитов в 1 л крови, рассчитайте цветовой показатель, сопоставьте с показателями нормы.

57

4. Подсчёт лейкоцитов в камере Горяева.

Камера Горяева должна быть сухой и чистой. К ней притирают покровное стекло до появления радужных полос. В смеситель (меланжер) для лейкоцитов (белая палочка в шарообразном расширении) до нижней метки "0,5" набирают кровь, а затем до метки "11" за шарообразным расширением 5% раствор уксусной кислоты, которая разрушает оболочки лейкоцитов (в камере подсчитывают их ядра), а кровь в меланжере разводится в 20 раз. Лейкоциты считают в 100 больших квадратах согласно правилу Егорова. Подсчёт производят по формуле:

Л=В*250*20*10^6/100

где Л - количество лейкоцитов в 1 л крови; В - сумма лейкоцитов в 100 больших квадратов; 250 - множитель, приводящий к объёму крови 1 мкл (объём большого квадрата 1/250 мкл); 20 - разведение крови (кровь в меланжере разводится в 20 раз); 100 - число больших квадратов; 10^6 - количество мкл в одном литре.

В норме количество лейкоцитов 4-5 109 /л. Факторы, влияющие на количество лейкоцитов: возраст; время суток (нормальные биоритмы); приём пищи.

3-е практическое занятие. Антигенные системы крови. Группы крови. Гемостаз.

Группы крови. Резус-фактор. Значение при переливании крови, в акушерстве и в практике судебно-медицинской экспертизы. Правила переливания крови. Кровезамещающие растворы.

Физиологическая характеристика тромбоцитов. Сосудисто-тромбоцитарный и плазменный (коагуляционный) гемостаз, их фазы. Факторы свёртывающей и противосвёртывающей систем крови. Возможные последствия при нарушении систем про- и антикоагулянтов. Влияние факторов внешней и внутренней среды на процессы гомеостаза. Сосудистая стенка как регулятор свёртывания крови и фибринолиза.

Вопросы программированного контроля по теме занятия.

1.Какие агглютиногены и агглютинины характеризуют групповую принадлежность крови по системе АВО, по системе резус и по другим системам?

2.Какие агглютиногены и агглютинины (антигены и антитела) содержатся в крови I(O), II(A), III(B), IV(AB) групп?

3.Какие антигены не имеют естественных антител? Какие антитела являются естественными, какие иммунными?

4.Какой из антигенов группы А имеет наиболее выраженные антигенные свойства?

5.Какой агглютинин может способствовать склеиванию эритроцитов, содержащих О-антиген?

6.Какими правилами пользуются при переливании крови? Какие пробы используются для определения совместимости крови донора и реципиента?

7.Что характерно для сосудисто-тромбоцитарного гемостаза?

8.Какое вещество вызывает вторичный спазм сосудов при сосудисто-тромбоцитарном гемостазе?

9.Что характерно для плазменного (коагуляционного) гемостаза?

10.Какие вещества образуются в конце первой, второй и третьей фазы плазменного гемостаза?

11.Как запускаются внутренний, внешний механизмы образования протромбиназы?

12.Какова роль тромбопластина (III фактор)?

13.Какие вещества активируют фактор контакта (XII или Хагемана)?

14.Какие вещества активируют Х фактор при внешнем и внутреннем механизмах?

15.Какие вещества активируют XI фактор (плазменный предшественник тромбопластина)?

16.Какие вещества активируют IX фактор (антигемофильный глобулин А)?

17.Какие вещества активируют VIII фактор (антигемофильный глобулин В)?

18.Какие вещества активируют VII фактор?

19.Какие факторы активируют переход протромбина в тромбин?

20.Какие функции выполняет фибрин? Где может находиться фибриноген?

21.Какие факторы активируются при участии ионов Са++?

22.Как изменится время свёртывания крови при возбуждении симпатического отдела ВНС?

23.Какие факторы обеспечивают жидкое состояние крови?

24.Какие вещества относятся к образующимся антикоагулянтам, а какие к постоянным?

25.Какие факторы относятся к фибринолитической системе? Какой основной?

26.Какие вещества активируют переход плазминогена в фибринолизин?

58

27.Какова роль калликреина (XIV фактора), высокомолекулярного кининогена (XVфактора)?

28.Какие методы используются для регистрации свёртывания крови?

29.Что такое тромбоэластография? Какие показатели позволяет определить?

Практические работы.

1. Определение групповой принадлежности крови по системе АВ0 перекрёстным методом - стандартных сывороток и стандартных эритроцитов.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой определения групп крови по системе АВ0 методами стандартных сывороток и стандартных эритроцитов.

ОСНАЩЕНИЕ: стерильные перчатки, тарелка с нанесенными на ней обозначениями агглютининов сывороток, стандартные сыворотки I, II, III групп двух серий с разным титром антител, стеклянные палочки, физиологический раствор, стандартные эритроциты групп А(II) и В

(III).

а) Метод стандартных сывороток.

ХОД РАБОТЫ: наносят на тарелку в соответствующие квадраты (лунки) пипеткой крупные капли сывороток двух серий I(0), II(A), III(B) групп (нельзя допускать смешивания сывороток!).

Концом чистой стеклянной палочки (или углом предметного стекла) захватывают небольшое количество крови и помещают рядом с каплей сыворотки (капля вносимой крови должна быть в 10 раз меньше капли сыворотки), осторожно перемешивают. Вносят кровь и в две остальные капли сывороток, используя другие стеклянные палочки или углы предметного стекла. Слегка покачивая тарелку в течение 5 мин, наблюдают за каплями. Затем добавляют каплю физиологического раствора для исключения ложной агглютинации и оценивают результат. Агглютинация выглядит в виде мелких красных крупинок, постепенно увеличивающихся в размере на фоне светлеющей сыворотки. На основании наличия (+) или отсутствия (-) агглютинации делают вывод о принадлежности эритроцитов исследуемой крови к определённой группе по системе АВО.

б) Метод стандартных эритроцитов.

ХОД РАБОТЫ: на тарелку, разделенную на секторы наносят каплю сыворотки исследуемой крови, которая в 10 раз меньше капли стандартных эритроцитов; рядом поместите каплю стандартных эритроцитов А(II) и В (III) групп. Действия проводят разными стеклянными палочками. Перемешивают капли углом предметного стекла, тарелочку покачивают в течение 3 минут; затем добавляют по капле физиологический раствор для исключения ложной агглютинации, продолжают смешивать покачиванием и через 5 минут оценивают результат. На основании наличия (+) или отсутствия (-) агглютинации делают вывод о принадлежности сыворотки исследуемой крови к определённой группе по системе АВО.

Оценка результатов.

2. Определение групповой принадлежности крови по системе АВ0 методом цоликлонов.

Цоликлоны - продукты гибридных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридные клеточные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, полностью идентичных по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.

Цоликлоны анти-А (аналог агглютинина альфа) и анти-В (аналог агглютинина бета) предназначены для определения групп крови человека вместо стандартных сывороток. Реагенты не должны храниться открытыми, так как при высыхании активность антител снижается; температура воздуха в помещении должна быть от 15 до 25º С.

59

ЦЕЛЬ: освоить методику определения групп крови по системе АВ0 методом цоликлонов. ОСНАЩЕНИЕ: стерильные перчатки, цоликлоны анти-А (розовый цвет) и анти-В (голубой цвет), исследуемая кровь.

ХОД РАБОТЫ: наденьте перчатки. Нанесите на пластинку по одной капле (0,1 мл) реагентов анти-А и анти-В и рядом по одной капле крови (0,1 мл), которая в 10 раз меньше капли сыворотки. Реактив и кровь тщательно перемешайте стеклянными палочками. Наблюдение за ходом реакции проводите при легком покачивании пластинки в течение 2-5 минут. При положительном результате - агглютинация эритроцитов; при отрицательном результате капля - равномерно окрашена в красный цвет, агглютинаты не обнаруживаются.

Оценка результатов:

3.Определение резус-принадлежности крови методом стандартных цоликлонов.

ЦЕЛЬ: освоить методику определения резус-принадлежности крови.

ОСНАЩЕНИЕ: стерильные перчатки, вата, тарелка, стеклянная палочка, пипетки, физиологический раствор, спирт, стандартный цоликлон анти-D, кровь донорская.

ХОД РАБОТЫ: нанесите на сухое стекло каплю стандартного цоликлона анти-D, затем в 10 раз меньшую каплю исследуемой крови, смешайте. При комнатной температуре чётко выраженная агглютинация наступает через 30 – 60 секунд. При наличии агглютинации кровь считают резусположительной (Rh+), а при отсутствии - резус-отрицательной (Rh-).

Оценка результатов:

Цоликлон анти-D супер Вывод о резус-принадлежности исследуемой крови

4. Определение индивидуальной совместимости крови донора и реципиента по системе АВ0.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: сыворотка реципиента, кровь донора, физиологический раствор, тарелка, стеклянные палочки.

ХОД РАБОТЫ: на тарелку наносят каплю - сыворотки реципиента, рядом (в 10 раз меньшую каплю) - крови донора; перемешивают стеклянной палочкой 4-5 минут, добавляют 2-3 капли физиологического раствора для исключения ложной агглютинации. Наличие агглютинации указывает на несовместимость крови донора и реципиента.

5. Проведение биологической пробы.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой проведения биологической пробы.

ОСНАЩЕНИЕ: система, заполненная переливаемой жидкостью (кровь, плазма, компоненты крови -эритроцитарная масса и др.)

Проведение пробы: первые 45 мл крови (плазмы) переливают струйно по 15 мл через 3 минуты и наблюдают за состоянием больного при вливании каждой порции и в перерывах между вливаниями.

Явления несовместимости: беспокойное поведение больного, чувства жара во всем теле, стеснение в груди; боли в пояснице, животе и голове; снижение артериального давления, малый и

60

частый пульс, бледность кожных покровов; моча красно-коричневого цвета ("мясных помоев") в результате гемолиза эритроцитов. При явлениях несовместимости переливание данной гемотрансфузионной среды отменяется, проводятся клинические и лабораторные исследования.

6.Определение времени остановки кровотечения.

Внорме время остановки кровотечения не превышает 4 мин. Удлинение при тромбоцитопениях и тромбоцитопатиях (нарушениях функциональных свойств тромбоцитов). ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: принадлежности для взятия крови, секундомер, стерильная фильтровальная бумага.

ХОД РАБОТЫ: производится прокол кончика пальца скарификатором. Включается секундомер, каждые 30 секунд фильтровальной бумагой снимается капля крови, выступившая самостоятельно (без надавливания). После остановки кровотечения секундомер останавливается, палец обрабатывается настойкой йода.

7.Определение времени свертывания крови.

Свёртывание крови in vitro обусловлено внутренним механизмом, запускаемым за счёт контактной активации фактора XII (Хагемана). В норме свёртывание капиллярной крови начинается через 0,5 – 2 минуты, заканчивается через 3 – 5 минут. Свёртывание крови, взятой из вены, составляет 5 – 10 минут. Удлинение времени свёртывания отмечается при гипокоагуляции (гемофилии, лечение антикоагулянтами), укорочение – при гиперкоагуляции.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с определением времени свёртывания капиллярной крови визуальным методом.

ОСНАЩЕНИЕ: принадлежности для взятия крови, секундомер ХОД РАБОТЫ: после прокола пальца, первая капля удаляется, в капилляр Панченкова набирается

25 мм крови, включается секундомер. Путём наклона капилляра на 45º кровь переводится на его середину, затем, через каждые 30 секунд, капилляр наклоняется на 45º в одну сторону, возвращается в горизонтальное положение, через 30 секунд наклоняется в другую сторону. Отмечается момент замедления движения крови и появления на стенке капилляра микросгустков. Окончание процесса свёртывания – момент полного прекращения движения крови.

8. Определение протромбинового времени.

Протромбиновый тест Квика характеризует процесс свёртывания крови при его запуске по внешнему механизму и имеет исключительное значение для определения активности фактора VII. ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: раствор тромбопластина (стандартный); 3,8% раствор цитрата натрия; 0,5% раствор хлорида кальция; капилляр Панченкова; пробирка, водяная баня или водяной термостат, поддерживающий температуру 37º С; секундомер.

ХОД РАБОТЫ: В капилляр Панченкова набирается раствор цитрата натрия до отметки «80», производится прокол пальца и в тот же капилляр (не удаляя цитрат натрия) набирается кровь, пока уровень набранной смеси не достигнет метки «0» («К»). Содержимое капилляра переносится в пробирку, которая помещается в водяную баню на 1 минуту. В пробирку с цитратной кровью вносится раствор тромбопластина капилляром Панченкова, заполненным до метки «0» («К»), и такое же количество раствора хлорида кальция. Включается секундомер. Пробирка в водяной бане осторожно покачивается. Секундомер останавливается в тот момент, когда образуется сгусток крови. Полученное значение – «протромбиновое время» (ПВ).

Зная ПВ испытуемого (ПВИ) и нормальное протромбиновое время (ПВН), которое зависит от активности стандартного тромбопластина (оно бывает указано на флаконе, обычно 12 – 18 секунд; проверяется на нескольких образцах донорской крови), можно рассчитать протромбиновый индекс (ПИ): ПИ = ПВН / ПВИ * 100.

Внорме ПИ составляет 90-100%. Чем больше протромбиновое время, свидетельствующее

огипокоагуляции крови, тем меньше значения протромбинового индекса.