- •Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации
- •Функции почек
- •Механизм образования мочи
- •Почки цнс гормоны
- •Пассивная Первичная
- •II. Физико-химические свойства мочи
- •Нарушения выделения мочи у взрослых
- •Цвет мочи в норме и при патологии
- •III. Химический состав мочи.
- •Средний состав суточной мочи здорового человека
- •Органические составные части мочи
- •Патологические компоненты мочи
- •Методы исследования химического состава мочи
- •Физико-химические свойства мочи
- •5. Определение рН мочи
- •6. Определение относительной плотности мочи (удельный вес)
- •Обнаружение патологических компонентов мочи
- •1. Качественные реакции на обнаружение белка в моче – а) проба Геллера с концентрированной азотной кислотой
- •2. Количественное определение белка в моче с помощью
- •3. Качественные реакции на глюкозу в моче
- •4.Количественное определение глюкозы в моче с помощью тест-полосок «Глюкотест», «Глюкофан».
- •5. Качественная реакция на кровь - бензидиновая проба
- •6. Качественные реакции на кетоновые тела в моче:
- •7. Количественное определение кетоновых тел в моче с помощью тест- полосок «Кетофан»
- •8. Качественная реакция на желчные пигменты - проба Гмелина с концентрированной азотной кислотой
- •9. Количественное определение уробилиногена в моче с помощью тест- полосок «убГфан»
- •Оформление протокола анализа мочи
- •Выучить константы:
3. Качественные реакции на глюкозу в моче
а) проба Фелинга
б) проба Ниландера
Принцип метода:
Реакции основаны на восстановительных свойствах глюкозы, которая в щелочной среде при нагревании, окисляясь, восстанавливает металл (в пробе Фелинга до Сu2О - красный цвет, в пробе Ниландера до свободного Bi - черный цвет).
Химизм реакции Фелинга:
С6Н12О6 + 2CuSO4 + 5 КОН t С5Н11СООК +2 К2SO4 + Н2О +CuOH ↓
Глюкоза (желтый осадок)
Н2О+Cu2O ↓
(красный осадок)
Химизм реакции Ниландера:
3 С6Н12О6 +2 Bi(OH)2NО3 + 5 КОН t 3 С5Н11СООК +2 Bi + 2 КNО3 + 6 Н2О
Глюкоза (черный цвет)
ХОД РАБОТЫ
Проба Фелинга:
К I мл исследуемой мочи приливают 0,5 мл реактива Фелинга, нагревают пробирку до кипения. В случае положительной реакции на глюкозу наблюдается красное окрашивание вследствие образования оксида меди (Сu2O).
Проба Ниландера
К I мл исследуемого раствора (мочи) приливают 0,5 мл реактива Ниландера, нагревают пробирку до кипения и кипятят 2 минуты, в случае положительной реакции на глюкозу наблюдается выпадение черного осадка, вследствие образования свободного Bi.
4.Количественное определение глюкозы в моче с помощью тест-полосок «Глюкотест», «Глюкофан».
Принцип метода:
Определение основано на специфической энзиматической реакции с использованием ферментов глюкозоксидазы и пероксидазы. Окисление глюкозы атмосферным кислородом катализируется ферментом глюкозооксидазой. При этом образуется глюконолактон и Н2О2. Пероксид водорода в последующей реакции, катализируемой ферментом пероксидазой, окисляет хромогенную систему с образованием интенсивно окрашенных продуктов реакции.
Тест реагирует появлением интенсивного красно-коричневого окрашивания на концентрацию глюкозы 2 ммоль/л и выше. Концентрация 1,7 ммоль/л в первой утренней порции мочи принята за верхний предел физиологической глюкозурии. Тест специфичен для глюкозы.
Оценка теста: тест считается положительным при изменении цвета реактивной зоны. В зависимости от концентрации глюкозы в пробе исходная желтая окраска реактивной зоны меняется на красновато-коричневую или коричнево-красную. Отдельные зоны окраски соответствуют следующим концентрациям: менее 2, 6, 17, 56, более 170 ммоль/л.
ХОД РАБОТЫ
Полоску бумаги «Глюкофан» погружают в исследуемую мочу, затем высушивают на воздухе и через минуту сравнивают окраску индикаторной зоны с цветной шкалой.
5. Качественная реакция на кровь - бензидиновая проба
Принцип метода:
Основан на слабой пероксидазной активности гемоглобина, который в кислой среде разлагает перекись водорода до воды и атомарного кислорода, который окисляет органическое вещество бензидин с образованием продуктов окисления желто-зеленого цвета.
ХОД РАБОТЫ
В пробирку наливают 0,5 мл мочи и приливают к ней последовательно 0,2 мл 30% уксусной кислоты, 0,5 мл 5% спиртового раствора амидопирина и 0,2 мл 3% раствора перекиси водорода. Перемешивают, и при наличии крови в течение 5 минут появляется сине-фиолетовое окрашивание, которое затем исчезает.