III. Цель работы
Выяснить роль аквапоринов, их полиморфизма и системы регуляции в патогенезе открытоугольной глаукомы.
IV. 3адачи исследования
Определить экспрессию аквапоринов и рецепторов к вазопрессину на эндотелии Шлемова канала.
Изучить встречаемость полиморфных вариантов гена рецептора к вазопрессину среди здоровых лиц и больных глаукомой.
Исследовать встречаемость полиморфных вариантов гена аквапорина среди здоровых лиц и больных глаукомой.
Определить наличие в структурах угла передней камеры барорецепторов, при положительном результате изучить встречаемость полиморфизмов, связанных с нарушением функции рецепторов, среди здоровых лиц и больных глаукомой.
Определить степень экспрессии аквапоринов в структурах угла передней камеры у больных глаукомой, получающих оперативное лечение (в ходе которого может быть получен материал для исследования), и соотнести полученные результаты с генотипом данного пациента.
V. Объект исследования
В исследовании будут принимать участие здоровые люди и больные глаукомой.
В качестве объекта исследования будут использованы препараты глаза трупов, препараты из структур угла передней камеры, полученные после оперативного лечения глаукомы (синустрабекулэктомия), соскобы слизистой рта.
VI. Дизайн исследования
На первом этапе исследования в препаратах угла передней камеры глаза, полученных от пациентов, оперированных по поводу глаукомы (синустрабекулотомия) методом иммуногистохимии будет определена экспрессия аквапоринов, рецепторов к вазопрессину и барорецепторов. Затем планируется провести исследование встречаемости полиморфизмов генов найденных молекул, отвечающих за изменение их функциональной способности, у здоровых лиц и больных глаукомой.
При получении достоверных отличий запланировано набрать препараты структур угла передней камеры глаза после проведения оперативного лечения глаукомы(синустрабекулэктомии) и определить степень экспрессии в них исследуемых молекул. Далее возможно сопоставить с полученные результаты с исследованиями генотипа пациента. Описанные исследования могут указать на степень участия полиморфизма изученных молекул в патогенезе глаукомы.
VII. Методы исследования
Определение экспрессия аквапоринов, рецепторов к вазопрессину и барорецепторов в структурах угла передней камеры:
иммуногистохимический анализ.
Определение генотипа лиц, больных глаукомой и здоровых по исследуемым полиморфизмам:
-ПЦР.
3. Методы статистической обработки.
По результатам исследования в пакете электронных таблиц MS Excel будет сформирована база данных, на основе которой с помощью пакета прикладных программ Statistica версия 7,0 (Stat Soft Inc., 2004) будет осуществляться статистический анализ. Описание выборки будет проводиться с помощью подсчета медианы (Me) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и C75). Достоверность различий между показателями независимых выборок будет оцениваться по непараметрическому критерию Манна-Уитни. Достоверность различий между показателями зависимых выборок будет определяться по U-критерию Вилкоксона. Для исследования силы взаимосвязей показателей будет вычисляться коэффициент ранговой корреляции по Спирмену.
