Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Биохимия-часть3.docx
Скачиваний:
48
Добавлен:
12.04.2015
Размер:
127.46 Кб
Скачать

Тетратионат натрия

Таким образом, количество красной кровяной соли, пошедшей на окисление углевода, определяют по разнице между добавленной с избытком K3[Fe(CN)6] и остатком этой соли, определенной титрованием.

Оборудование и реактивы. Колбы конические на 100мл, пипетки, бюретки, 0,1N раствор K3[Fe(CN)6], ZnSO4+NaCl, 25% водный р-р КJ, 9% СН3СООН, 1% раствор крахмала, гипосульфит натрия 0,1N р-р.

Ход работы

1 или 2 мл (в зависимости от индивидуального задания) пробы, содержащей сахар, помещается в коническую колбу на 100 мл, добавляется 19 или 18 мл дистиллированной воды и 5 мл 0,1N раствора красной кровяной соли K3[Fe(CN)6]. Параллельно ставится контрольный опыт (холостая проба), для этого во вторую коническую колбу на 100 мл помещают 20 мл дистиллированной воды, в нее добавляют все реактивы в тех же количествах и в той же последовательности, что и в рабочую пробу. Рабочая и контрольная пробы помещаются в кипящую водяную баню на 20 минут для проведения окисления. По окончании нагревания обе колбы охлаждаются на воздухе. Затем в каждую колбу добавляют по 4 мл раствора соли цинка (ZnSO4+NaCl), 1 мл 25% раствора йодистого калия КJ, 5 мл 9% уксусной кислоты СН3СООН и 1 мл 1% раствора крахмала. Через 1-2 минуты производится титрование выде­лившегося йода в обеих колбах гипосульфитом до исчезновения фиолетовой окраски.

Пример расчета.

Если на контрольный опыт пошло А мл гипосульфита, а на исследуемый (рабочая проба) - В мл, то остаток (избыток) красной кровяной соли, не вошедший в реакцию с сахаром, определяется из соотношения:

=, где

5 – количество мл красной кровяной соли, взятой с избытком на реакцию с сахаром;

А - количество мл гипосульфита, пошедшее на титрование контрольной (холостой) пробы;

В - количество мл гипосульфита, пошедшего на титрование рабочей (исследуемой) пробы;

К - поправочный коэффициент точности приготовления 0,1N раствора гипосульфита;

X - избыток красной кровяной соли, не вошедшей в реакцию с сахаром.

На реакцию с сахаром расходуется (5-X)=Y мл красной кровяной соли. По таблице определяют, какое количество сахара в мг соответствует Y - мл красной кровяной соли, затем производим пересчет в %.

Пример расчета:

А=4,8мл

В=3,2мл

По таблице 1 находим: по вертикали единицу (целое число), а по горизонтали семь (десятые). Количество сахара 4,50 мг или 0,00459 грамм.

Составляем пропорцию:

0,00459 Г сахара – 2 г раствора,

Z г (или %) – 100 г раствора

сахара в исследуемом объекте

Определение содержания сахара при помощи красной кровяной соли (число мл 0,1N раствора красной кровяной соли и соответствующее им количество инвертного сахара).

ТАБЛИЦА № 1

число мл

0,1N K3[Fe(CN)6]

десятые доли мл и соответствующие им мг сахара

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

0

-

-

-

-

-

1,35

1,62

1,89

2,16

2,43

1

2,70

2,97

3,24

3,51

3,78

4,05

4,32

4,59

4,86

5,13

2

5,40

5,67

5,94

6,21

6,48

6,75

7,02

7,29

7,56

7,83

3

8,10

8,37

8,64

8,91

9,18

9,45

9,72

9,99

10,26

10,53

4

10,80

11,07

11,34

11,61

11,88

12,16

12,44

12,72

13,00

13,28

5

13,56

13,84

14,12

14,40

14,68

14,96

15,24

15,52

15,80

16,08

6

16,36

16,64

16,92

17,20

17,48

17,76

18,04

18,32

18,60

18,88

7

19,16

19,44

19,72

20,00

20,28

20,56

20,84

21,12

21,40

21,68

8

21,95

22,24

22,52

22,18

23,08

23,36

23,64

23,92

24,20

24,48

9

24,76

25,04

25,32

25,60

25,88

26,16

26,44

26,72

27,00

27,28

10

27,56

27,84

28,12

28,40

28,68

28,95

29,24

29,52

29,80

30,08

11

30,36

30,64

30,92

31,20

31,48

31,76

32,04

32,32

32,60

32,88

12

33,16

33,44

33,72

34,00

34,28

34,56

34,84

35,12

35,40

35,60

13

35,95

36,24

36,52

36,80

37,08

37,36

37,54

37,82

38,20

38,48

14

38,76

39,04

39,32

39,60

39,88

40,16

40,44

40,72

41,20

41,28

15

41,57

41,86

42,15

42,44

42,73

43,02

43,31

43,60

43,89

44,18

16

44,47

44,76

45,05

45,34

45,63

45,92

46,21

46,50

46,79

47,08

17

47,37

47,66

47,95

48,24

48,53

48,82

49,11

49,40

49,69

49,98

18

50,27

50,56

50,85

51,14

51,43

51,72

52,01

52,30

52,59

52,88

19

53,17

53,46

53,75

54,04

54,33

54,62

54,91

55,20

55,49

55,78

20

56,06

56,36

56,65

56,94

56,23

57,52

57,81

58,10

58,39

58,68

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]