Рекомендації для оформлення протоколу. Правила роботи в учбовій мікробіологічній лабораторії
У мікробіологічних лабораторіях працюють з матеріалом, що містить мікроорганізми. У зв’язку з цим необхідно дотримуватись правил роботи, які забезпечують її стерильність і запобігання можливості виникнення внутрішньо лабораторних заражень:
В лабораторію можна входити в халаті і шапочці.
Забороняється вносити в лабораторію сторонні речі.
Кожний студент повинен працювати на своєму робочому місці.
Робоче місце необхідно утримувати в чистоті.
Матеріал для практичної роботи одержує черговий у лаборантській кімнаті і роздає студентам групи в присутності викладача.
Використані в роботі інфіковані матеріали, пробірки з культурами бактерій необхідно знезаразити, для чого черговий здає відпрацьований матеріал у лаборантську.
Якщо випадково розіб’ється посуд з заразним матеріалом, чи розіллється рідкий заразний матеріал, студент повинен негайно сповістити викладача і разом з ним знезаразити інфіковане місце.
Після закінчення роботи студент повинен:
Здати черговому матеріал, одержаний на початку заняття;
Здати весь відпрацьований матеріал, який підлягає знезараженню, а також свої посіви у термостат;
Привести в порядок робоче місце, продезінфікувати його;
Вимити руки дезінфікуючим розчином і милом.
Черговий студент контролює порядок на робочих місцях студентів в групі і здає у лаборантську все, що одержав для роботи на початку заняття.
Структура бактеріологічної лабораторії
Приймальна матеріалу.
Кабінет лікаря-бактеріолога.
Бактеріологічна.
Мікроскопічна.
Термостатна.
Серологічна.
Стерилізаційна.
Лабораторія поживних середовищ.
Мийна.
Віварій.
Організація робочого місця лікаря-бактеріолога
Бактеріологічна петля.
Мікроскоп з освітлювачем.
Штатив для пробірок.
Пробірка з стерильним фізіологічним розчином.
Пастерівська піпетка.
Анілінові барвники.
Імерсійне масло.
Лоточок з мостиком для фарбування мазків.
Покривні, предметні скельця.
Стерильні мірні піпетки.
Фільтрувальний папір.
Склограф.
Спиртовка.
Стакан з дезинфікуючим розчином.
Газовий пальник.
Стерильні пробірки, чашки Петрі.
Дозатори і набори стерильних наконечників.
Методика виготовлення бактеріального препарату-мазку
Приготування суспензії бактерій на предметному склі.
Висушування суспензії бактерій та одержання мазку.
Фіксація мазку. Мета фіксації: вбити мікроби, закріпити їх на склі і забезпечити краще їх фарбування.
Фарбування мазку.
Промивання.
Висушування препарату-мазку.
Анілінові барвники
Для фарбування мікроорганізмів використовують анілінові барвники. Це, в основному, похідні органічних сполук (аніліну та інших). Це порошки, які не розчиняються у воді, але добре розчиняються в органічних розчинниках (спирт, ацетон). Для фарбування мікроорганізмів використовують спиртово-водні розчини.
Анілінові барвники бувають: основні, кислі та нейтральні. Для фарбування бактерій використовують основні барвники. Методи фарбування мікроорганізмів є прості і складні. Прості – коли використовують 1 барвник. Складні – використовують 2 та більше барвників, або 1 барвник та речовини, які не фарбують мікроби, але приймають участь у процесі фарбування.
Анілінові барвники
|
Колір |
Основні |
Кислі |
|
Червоний |
Нейтральний червоний Фуксин Сафранін Піронін |
Кислий фуксин Еозин |
|
Фіолетовий |
Генціанвіолет Кристалвіолет |
|
|
Синій |
Метиленовий синій |
|
|
Зелений |
Малахітовий зелений Бриліантовий зелений |
|
|
Чорний |
Інулін |
Нігрозин |
|
Жовтий |
|
Конго Аурантія |
|
Коричневий |
Хризоїдин |
|
Схема промінів при сухій (А) і масляній (Б) системах;
1-фронтальна лінза об’єктиву; 2-імерсійне масло; 3-предметне скло.
Завдання №1. Приготувати бактеріальні препарати із коків та паличок, пофарбувати простими методами, дослідити в мікроскопі.
Фарбування
метиленовим синім
Чиста культура
Staphylococcus saprophyticus
Фарбування фуксином
Чиста культура
Escherichiacoli
Висновок:
Питання для самоконтролю:
Що вивчає медична мікробіологія?
Яка структура бактеріологічної лабораторії та яке призначення її підрозділів?
Для чого фарбують мікроорганізми?
Які властивості мікроорганізмів можна дослідити при мікроскопії пофарбованих препаратів?
Як готують фарбуючи розчини із анілінових барвників?
З якою метою роблять фіксацію мазків на предметному склі?
Яким об’єктивом користуються при мікроскопії бактеріальних препаратів? Які ознаки такого об’єктиву?
Як розрахувати загальне збільшення мікроскопа?
Що таке роздільна здатність мікроскопа і чому вона дорівнює?