Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Солд1.doc
Скачиваний:
15
Добавлен:
19.03.2015
Размер:
1.52 Mб
Скачать

Любой вариант ифа содержит 3 обязательные стадии:

1. Стадия узнавания тестируемого соединения специфическим к нему антителом, что ведет к образованию иммунного комплекса;

2. Стадия формирования связи конъюгата с иммунным комплексом или со свободными местами связывания;

3. Стадия превращения ферментной метки в регистрируемый сигнал.

  1. Переваги біосенсорів у порівнянні з класичними методами аналізу;

Основные преимущества биосенсоров:

1) биосенсоры специфичны — можно анализировать сложные смеси на присутствие определенного химического вещества без предварительной очистки; 2) они очень чувствительны, поэтому можно обнаружить очень низкие концентрации вещества в очень малых образцах; 3) они дают быстрый ответ; 4) они безопасны для использования; 5) они точны; 6) они могут быть очень маленькими; 7) они доступны для массового производства.

Б6

  1. Спектроскопічне визначення концентрації нуклеїнових кислот та білків.

  • Спектроскопія в видимій області світла;

  • Ультрафіолетова спектроскопія;

  • Радіоізотопний метод;

  • Нуклеиновые кислоты определенным образом поглощают ультрафиолет. В спектрофотометрах образец подвергается действию ультрафиолета с длиной волны 260 нм, а фотодетектор измеряет количество света, прошедшего через образец. Чем больше света поглощено, тем выше концентрация нуклеиновой кислоты в образце.

  • При помощи закона Бугера — Ламберта — Бера возможно соотнести концентрация молекул, поглощающих излучение с количеством поглощенного света. На длине волны 260 нм средний коэффициент экстинкции для двуцепочечной ДНК составляет 0,020 (мкг/мл)−1 см−1, для одноцепочечной ДНК 0,027 (мкг/мл)−1 cm−1, для одноцепочечной РНК 0,025 (мкг/мл)−1 cm−1 и для коротких одноцепочечных олигонуклеотидов коэффициент экстинкции зависит от длины и соотношения азотистых оснований (около 0,030 (мкг/мл)−1 cm−1). Отсюда, оптическая плотность (англ. OD, optical density) равная 1 соответствует концентрации двуцепочечной ДНК около 50 мкг/мл. Спектрофотометрический способ определения концентрации нуклеиновых кислот применяет при концентрациях до 2 OD.[1] Более точные коэффициенты экстинкции требуются для определения концентрации олигонуклеотидов, и могут быть предсказаны при помощи модели ближайшего сосдества.[2]

2. Принцип роботи іонообмінної хроматографії.

На різниці константіонообмінноїрівноваги між нерухомою фазою та компонентами суміші, що розділяється

Ионообменная хроматография позволяет разделить молекулы, основываясь на ионных взаимодействиях.Неподвижная фазаимеет заряженныефункциональные группы, которые взаимодействуют с анализируемыми ионизированными молекулами противоположного заряда. Этот вариант хроматографии классифицируется на два типа — катионную и анионную ионообменную хроматографию:

  • Катионная ионообменная хроматография задерживает положительно заряженные катионы, так как неподвижная фаза имеет отрицательно заряженные функциональные группы, например, фосфат (PO43−).

  • Анионная ионообменная хроматография задерживает отрицательно заряженные анионы, так как неподвижная фаза имеет положительно заряженные функциональные группы, например,+N(R)4.

Б7

  1. Принцип роботи гель-фільтрації.

На колонку, упакованную сорбентом, наносят раствор образца. Важно:лимитирующим является объем раствора образца; для аналитических разделений он не должен превышать 0,1% от CV (общего объема колонки), а для препаративной очистки он должен быть не выше 8-10% от CV; в противном случае разделения сложно будет достичь! Раствор образца, допустим, содержит три типа веществ: высокомолекулярные, среднего размера и низкомолекулярные.

Высокомолекулярные не могут поместиться в поры сорбента, поэтому их объем удержания равен свободному объему колонки (см. раздел "Вступление"). Они элюируются первыми.

Средние частицы помещаются в поры сорбента, но не полностью. Поэтому их объем удержания немного выше свободного объема. Они элюируется вторыми.

Маленькие вещества долго путешествуют внутри пор сорбента, могут там заблудиться и найтись не скоро. Их объем удержания намного выше свободного (чаще всего их объем удержания приближается к общему объему колонны, т.е. 100% CV). Они элюируются последними.

Б8

  1. Визначення біосенсора. Як можна класифікувати біосенсори? Класифікація біосенсорів за типом біоселективного елементу.

Биосенсор - это аналитический прибор, в котором для определения химических соединений используются реакции этих соединений, катализируемые ферментами, иммунохимические реакцииили реакции, проходящие ворганеллах,клеткахилитканях[1]. В биосенсорах биологический компонент сочетается с физико-химическим преобразователем.

Класифікувати можна за за типом фізичного перетворювача та за типом біоселективного елементу. За типом біоселективного елементу поділяються на каталітичні та некаталітичні