17. Капсульные бактерии: метод окраски, патогенные представители.

Метод Бури-Гинса

Этим методом окрашиваются капсульные бактерии. Капсульными называют бактерии, которые всегда образуют капсулу и в организме человека и при росте на питательных средах. Эти бактерии относятся к роду клебсиелл.

Klebsiella pneumoniae – возбудитель пневмонии

Klebsiella rhinoscleromatis – возбудитель риносклеромы

Klebsiella ozaenae – возбудитель озены или зловонного насморка

Капсула бактерий состоит из полисахарида, содержит большое количество воды. При окраске свободно пропускает краситель, но сама не прокрашивается, поэтому при окраске выросшей культуры капсула не видна.

М етодика:

1.Бульонную культуру бактерий смешивают с равным количеством туши. Каплю смеси наносят на предметное стекло, готовят микропрепарат по типу тонкого мазка крови и слегка фиксируют (негативный метод Бури «звездное небо»)

2.Гинс предложил окрашенный таким методом микропрепарат докрашивать фуксином.

Результат: на чёрном фоне видны красные палочки, окружённые бесцветной капсулой.

18. Кислото-спирто-щелочеустойчивые бактерии: примеры, методы окарски.

Окраска по Циль - Нильсену (для кислото-спирто-щелоче устойчивых бактерий).

Применяют для выявления бактерий туберкулеза и проказы - Mycobacterium tuberculosis, Myc. leprae, имеющих в клеточной оболочке большое количество жировоска, липидов, и жирных кислот. Для увеличения проницаемости клеточной стенки 1-й этап окрашивания проводят при подогревании в парах карболового фуксина, который размягчает жировоск под действием высоких температур и облегчает проникновение красителей, их взаимодействие с клеточной стенкой.

Этапы окраски:

1. на фиксированный мазок положить полоску фильтровальной бумаги, нанести карболовый фуксин и подогревать до появления пара 3 минуты.

2. Снять бумагу, промыть водой.

3. Нанести на мазок 0, 5% раствором серной кислоты на 30 секунд

4. Промыть водой.

5. Обесцветить 95⁰ спиртом на 15-20 секунд

6. Промыть водой

7. Дополнительно окраска метиленовой синькой 1 минута.

8. Промыть водой

Результат: Туберкулезные палочки – красные, не кислотоустойчивые – синие.

19. Морфология и структура спирохет. Патогенные представители.

Спирохеты

-Грам (-), тонкие, извитые, подвижные микроорганизмы, имеющие размеры от 20 до 30 мкм и более. Спор, жгутиков нет. Клетка состоит из протоплазматического цилиндра, вокруг которого закручена аксиальная нить, состоящая из нитей фибрилл, которые прикреплены к концам клетки. Передвигаются с помощью фибриллярного аппарата - сокращение фибрилл.

Характер движения различен: поступательное, вращательное, сгибательное.

Разделяются на роды по количеству, форме и размерам завитков.

Спирохеты плохо воспринимают красители, обычно их окрашивают по Романовскому–Гимзе или серебрением. В живом виде исследуют с помощью фазово-контрастной или темнопольной микроскопии, а также методом раздавленной или висячей капли.

Примеры патогенных спирохет:

1. Treponema pallidum – возбудитель сифилиса, имеет вид тонких нитей с 8-12 мелкими равномерными

завитками. Окрашены в бледно-розовый цвет по Романовскому – Гимзе

2. Borrelia recurrentis – возбудитель эпидемического возвратного тифа, длина 15-16 мкм, завитки крупные

неравномерные, обычно их 3 – 8. Окрашены в сине-фиолетовый цвет по Романовскому – Гимзе

Borrelia burgdorferi - вызывает лаймоборрелиоз

3. Leptospira interrogans – возбудитель лептоспироза, имеют многочисленные мелкие первичные завитки,

не поддающиеся подсчету, образуют вторичные завитки в виде буквы S, С. Окрашены в розово-сиреневый цвет по Романовскому – Гимзе.

Среди спирохет могут встречаться непатогенные виды, например, в ротовой полости Treponema microdentiсum, Treponemа buccalis, на слизистой оболочке мочеполовых органов Treponema refringens.