Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Микробиология. Часть 1. Учебное пособие.pdf
61
соединяются по две, иногда образуют короткие нити. Clostridium
botulinum слабо подвижны, образуют крупные овальные споры,
расположенные у конца палочки; вегетативная часть клетки со спорой
имеет вид теннисной ракетки (рис. 24). Капсул не образуют.
Окрашиваются анилиновыми красками, грамположительны.
Рис. 24. Клостридии ботулизма под микроскопом
Физиология. Рост происходит в строго анаэробных условиях.
Температурный оптимум 37 °С. На поверхности питательного агара
колонии сначала мелкие и прозрачные, а через 48 ч они становятся
крупными, сероватыми. На сахарном кровяном агаре колонии
неправильной формы с гладкой или шероховатой поверхностью, с
различной степенью гемолиза. В агаровом столбике колонии
развиваются в виде комочков ваты, или более компактных мелких
образований в виде чечевицы. На бульоне, содержащем глюкозу
(среда Китта—Тароцци), получается обильный рост с помутнением
среды и выделением газа. Бациллы ботулизма обладают большой
ферментативностью в отношении углеводов. Большинство штаммов
сбраживает глюкозу, мальтозу, маннит, мальтозу и другие углеводы с
образованием кислоты и газа. Молоко пептонизируют с образованием
газа. Споры палочки ботулизма отличаются исключительной
устойчивостью к различным физическим и химическим факторам
(некоторые из них выдерживают кипячение в течение 5 ч).
62
Палочка ботулизма в анаэробных условиях вырабатывает
сильнодействующий экзотоксин, который в дозе 0,0001 мл убивает
белую мышь при подкожном введении. Токсин не разрушается
желудочным соком и вызывает отравление при приеме его через рот.
Вызываемые заболевания. Яд ботулизма всасывается через
слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, довольно быстро
поступает в кровь и поражает центры продолговатого мозга и отчасти
ганглиозные клетки спинного мозга. Клинически это выражается в
расширении зрачков, появлении косоглазия, двойного видения,
опущения век, сухости во рту, потере голоса, затруднении глотания.
Температура обычно понижена. Сознание ясное. Смерть наступает от
паралича сердца и дыхания.
Диагностика заболеваний. Объектом исследования при
ботулизме являются рвотные массы, промывные воды желудка,
испражнения, кровь и подозрительные пищевые продукты.
Анализ ведется в двух направлениях: получение культуры микроба и
обнаружение токсина. Выделение культуры производится по общей
методике выделения культур анаэробов. Для обнаружения токсина
проводят заражение белых мышей или морских свинок.
3. МИКРОФЛОРА ЧЕЛОВЕКА
Под «нормальной микрофлорой человека» понимают
совокупность микроорганизмов, выделяемых из организма здорового
человека. Однако часть этих микроорганизмов при определенных
условиях могут вызывать заболевания, например, при снижении
иммунитета организма, т.е. являются условно патогенными.
Основные функции микрофлоры человека (рис. 25):
– морфокинетическое действие;
– регуляция газового состава полостей;
– участие в водно-солевом обмене и поддержании рН;
– участие в метаболизме углеводов, белков, липидов и других
соединений;
– участие в рециркуляции желчных кислот, стероидов и других
макромолекул;
– продукция биологически активных соединений, витаминов;
– иммуногенная и антимикробная роль.
Морфокинетическое действие микрофлоры заключается в
стимуляции роста пролиферативных клеток эпителия. Микрофлора
63
способствует развитию слизистой оболочки и клеток,
продуцирующих муцин, ворсинок желудочно-кишечного тракта.
Наличие в желудочно – кишечном тракте микроорганизмов
способствует усилению перистальтики и опорожнения кишечника.
Рис. 25. Функции микрофлоры человека
Регуляция микроорганизмами газового состава полостей
заключается в том, что в результате жизнедеятельности
микроорганизмов в кишечнике человека образуются газообразные
продукты (водород, метан, аммиак, углекислый газ, сероводород и
др.), которые усиливают перистальтику кишечника.
Участие в водно–солевом обмене и поддержании рН.
Микрофлора желудочно–кишечного тракта человека оказывает
влияние на водно-солевой обмен, участвуя в процессах всасывания
воды, электролитов и других неорганических соединений из
кишечного содержимог
о, а также в секреции тех же компонентов в
просвет кишечника.
Микрофлора кишечника поддерживает рН толстого кишечника
на уровне 7,2–7,4, что обеспечивается в результате образования
анаэробными микробами летучих жирных кислот и регуляции
содержания в просвете кишки бикарбоната.
64
Участие в метаболизме углеводов, белков, липидов и других
соединений. Анаэробные бактерии кишечника способны
осуществлять гидролиз гликозидов, амидов, нитратов и различных
эфиров, дегидроксилировать С– и Н–гидроксигруппы,
декарбоксилировать и дезаминировать различные аминокислоты,
вызывать диметилирование, дегидрогенирование и дегалогенирование
различных соединений, восстанавливать двойные связи,
нитроазогруппы, спирты, альдегиды, вызывать ароматизацию,
этерификацию, ацелирование многих соединений.
Участие в рециркуляции желчных кислот, стероидов и
других макромолекул. Микрофлора кишечника человека и животных
способна осуществлять биотрансформацию желчных кислот,
холестерина, стероидных гормонов. Холестерин подвергается
метаболизации кишечными бактериями с образованием копростанона,
копростанола и небольших количеств холестенона. Эстрогены,
кортикостероиды, прогестероны, андростаны в толстом кишечнике
подвергаются гидролизу с высвобождением свободных гормонов. В
дальнейшем в условиях анаэробиоза кишечные бактерии могут
подвергать свободные эстрогены различным трансформациям.
В процессе биотрансформации липидов могут участвовать
клостридии, энтерококки, бактероиды различных видов, а также
другие кишечные микроорганизмы.
Продукция биологически активных соединений. Микрофлора
человека продуцирует большое количество различных биологически
активных веществ: гормоноподобных соединений, медиаторов,
регулирующих функцию желудочно-кишечного тракта и эндокринные
функции. Одними из продуктов микробной ферментации углеводов,
жиров и белков являются летучие жирные кислоты, которые
принимают участие в регуляции абсорбции ионов натрия, калия, хлора
и воды, контролируют содержание просветного бикарбоната и уровень
рН.
Микрофлора человека способна синтезировать различные
витамины. Например, микрофлора кишечника синтезирует витамин В1
(тиамин), витамин В12 (цианокобаламин), витамин К. Витамин В12
синтезируется следующими микроорганизмами: Propionibacterium,
Eubakterium, Butiribakterium, Bifidobakterium, Laktobakterium,
Salmonella и др. Наиболее активно синтез витамина В12 происходит в
анаэробных условиях.
65
Иммуногенная и антимикробная роль. Липополисахариды
(ЛПС) клеточной стенки Гр(-) бактерий при гибели бактериальных
клеток вызывают токсические реакции в организме человека. В низких
концентрациях они стимулируют фагоцитоз, вызывают агрегацию
тромбоцитов, повышают температуру тела, вызывают
неспецифическую пролиферацию иммунных Т- и В-клеток,
активируют макрофаги, усиливают иммунный ответ, повышают
противоопухолевую резистентность, естественную устойчивость к
инфекциям и аутоиммунные реакции. Пептидогликаны Гр(+) бактерий
активируют иммунную систему, вызывают выработку антител.
Многие представители микрофлоры человека образуют в
процессе своей жизнедеятельности разнообразные химические
соединения, проявляющие антимикробную активность.
Энтеробактерии и лактобактерии вырабатывают бактериоцины,
способствующие прекращению роста и размножения клеток,
подавляют синтез РНК, ДНК, белка и различных адаптивных
ферментов клеток. Лактобактерии выделяют различные
бактериоцины и лактоцины, которые оказывают антимикробное
действие, ингибируя рост и размножение бацилл, клостридий,
стрептококков, стафилококков, энтеробактерий, псевдомонад,
листерий и грибов рода кандида. Ацидофильные лактобактерии
ингибируют рост кампилобактерий и холерных вибрионов.
Бифидобактерии выделяют бифидин, бифилонг, которые
оказывают антимикробное действие в отношении энтеробактерий,
вибрионов, стрептококков и стафилококков. Бациллы, обитающие в
кишечнике, выделяют полимиксины, колистин, бацитрацин,
грамицидин, субтилин, бутирозин, которые активны преимущественно
против грамположительных бактерий. Однако полимиксин и колистин
эффективны только против грамотрицательных бактерий.
Пептострептококки выделяют антимикробные субстанции,
подавляющие рост многих грамположительных бактерий, включая
клостридии.
Антимикробный эффект многих микроорганизмов связан c их
способностью синтезировать различные органические кислоты:
муравьиную, уксусную, молочную и пропионовую, что приводит к
снижению рН среды и подавляет рост грамположительных и
грамотрицательных бактерий.
Некоторые молочнокислые бактерии выделяют в процессе
своей жизнедеятельности перекись водорода, которая может
66
приводить к гибели вирусов в организме человека. Представители
нормальной микрофлоры: лактобациллы, энтерококки и другие
микроорганизмы – выделяют лизоцим, который расщепляет
пептидогликан грамположительных бактерий.
3.1. Микрофлора кожи человека
Поскольку кожа постоянно контактирует с внешней средой,
она чаще всего становится местом обитания транзиторных
микроорганизмов. Особенно много различных микроорганизмов на
тех участках кожных покровов, в которых более высокая влажность и
которые защищены от солнечного света: подмышечные впадины,
межпальцевые промежутки, паховые складки, промежность. Следует
учитывать также тот факт, что на микроорганизмы кожи действуют
бактерицидные факторы потовых и сальных желез.
Впервые микроорганизмы попадают на кожу ребенка при
прохождении родовых путей матери, а затем из воздуха родильного
дома, с рук персонала и с кожи молочной железы матери. В этот
период в микрофлоре кожи ребенка обнаруживаются стафилококки и
грибы рода Candida, которые позднее замещаются нормальной
микрофлорой.
В составе резидентной микрофлоры кожи и слизистых
оболочек присутствуют S. epidermidis; Micrococcus spp.; Sarcina spp.;
коринеформные бактерии; Propionibacterium spp. В составе
транзиторной микрофлоры: S. аureus, Streptococcus spp., Peptococcus
spp., Bacillus subtilis, Escherichia coli, Enterobacterspp., Acinetobacter
spp., Lactobacillus spp., Candida albicans и многие другие. В зонах, где
имеются скопления сальных желез (гениталии, наружное ухо),
встречаются кислотоустойчивые непатогенные микобактерии.
Большинство микроорганизмов, в том числе патогенных, не
проникает через неповрежденные кожные покровы и погибает под
воздействием бактерицидных свойств кожи. Это обусловлено кислой
реакцией среды, наличием жирных кислот в секретах сальных желез и
присутствием лизоцима. Увеличение обсемененности того или иного
участка кожи в результате уменьшения бактерицидных свойств кожи
может служить показателем снижения иммунологической
реактивности макроорганизма.
Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний могут
быть представители условно патогенной микрофлоры (аэробной,
67
микроаэрофильной, факультативно анаэробной и анаэробной). Среди
них чаще встречаются виды родов: Staphylococcus, Streptococcus,
Pseudomonas, Escherichia,Proteus, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter,
Hafnia, Serratia, Aeromonas, Alcaligenes, Acinetobacter, Haemophilus,
Peptococcus,Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Propionibacterium,
Bacteroides, Nocardia, Listeria, Fusobacterium, Neisseria, Mycrococcus,
Mycoplasma. Реж е встречаются Yersinia,Ervinia, Salmonella,
Acinetobacter, Moraxella, Brucella, Candida, Actinomyces.
3.2. Микрофлора уха
В среднем ухе в норме микробов не содержится, так как ушная
сера обладает бактерицидными свойствами. Однако микроорганизмы
могут проникать в среднее ухо через евстахиеву трубу из глотки. В
наружном слуховом проходе могут находиться микроорганизмы кожи:
стафилококки, коринебактерии, реже встречаются бактерии рода
Pseudomonas, грибы рода Candida.
При воспалительных заболеваниях наружного, среднего и
внутренн его уха исследуют гнойное или серозное отделяемое. При
этом следует учитывать, что в норме в наружном ухе, слуховом
проходе присутствует нормальная микрофлора, представленная
сапрофитными и условно патогенными бактериями – обитателями
кожи. Это S. epidermidis, C. pseudodiphtheriticum. В средн ем и
внутреннем ухе микрофлора отсутствует. При остром воспалительном
процессе в них возбудителями инфекции могут быть S. aureus,
S. еpidermidis, S. pyogenes, S. viridans, S. pneumoniae, а также
H. influenzae, E. coli,C. diphtheriae, Bacteroides. При хронически
протекающей инфекции чаще обнаруживают ассоциации
грамотрицательных микроорганизмов рода Proteus, Klebsiella,
Enterobacter, Esherichia, Pseudomonas, а также Mycobacterium
tuberculosis, Actinоmyces и плесневые грибы Aspergillus, Penicillium,
Mucor.
3.3. Микрофлора глаз
В составе нормальной микрофлоры глаза (конъюнктивы) в
небольшом количестве выявляются
S. epidermidis,
C. pseudodiphteriticum, непатогенные микроорганизмы семейства
Neisseriaceae, Sarcina. У отдельных лиц временно могут выделяться
68
S. aureus, микроорганизмы семейства Streptococcaceae (S. pneumoniae,
S. feacalis, S. viridans), представители семейства Enterobacteriaceae,
рода Haemophilus,микоплазмы. На количество и состав
конъюнктивальной микрофлоры значительное влияние оказывает
моргание глаза и слёзная жидкость, в которой содержится лизоцим,
обладающий антибактериальной активностью, и секреторный
иммуноглобулин А.
Микробиологическое исследование проводится при
заболеваниях конъюктивы, век, слезных мешков, роговицы. Причиной
конъюнктивитов в преобладающем количестве случаев являются
стафилококки (79,2 %). S. aureus чаще обнаруживается при остром
(43,6 %), а S. epidermidis хроническом конъюнктивите (83,5 %)
Другими возбудителями острых гнойных и хронических
конъюнктивитов являются N . gonorrhoeae, M. lacunata, B. catarrhalis,
C. diphteriae, S. pyogenes, S. viridans , S. faecalis,H. influenzae,
P. aeruginosa, микроорганизмы семейств Enterobacteriaceae, родов
Proteus, Klebsiella, Eschericha. Реже встречаются L. monocytogenes,
грибы рода Candida, Aspergillus.
Помимо вышеперечисленных микроорганизмов, являющихся
возможными возбудителями воспалительных процессов не только
глаз, но и других систем и органов человека, известны
микроорганизмы, обусловливающие только конъюнктивиты. К ним
относятся H. aegyptius, M. lacunata, B. catarrhalis.
3.4. Микрофлора полости рта
В полости рта на микроорганизмы действует слюна, которая
содержит вещество с антимикробным эффектом – лизоцим. Несмотря
на то, что слюна механически смывает бактерии, в десневых карманах,
щелях между зубами, бактерии сохраняются и размножаются.
Микрофлора полости рта представлена транзиторными и
резидентными (облигатными) микроорганизмами. Транзиторная
микрофлора включает микроорганизмы кожи и желудочно-кишечного
тракта. Резидентная микрофлора полости рта в основном представлена
стрептококками, которые составляют от 30 до 60% всей микрофлоры
полости рта. К ним относятся S. mitis, S. salivarius — к сосочкам языка,
S. sanguis и S. mutans. Кроме стрептококков в полости рта выявляются
факультативные анаэробы — актиномицеты, анаэробы — бактероиды,
фузобактерии и вейлонеллы. В полости рта также обитают спирохеты
69
родов Leptospira, Borrelia и Treponema, микоплазмы (М. orale, М.
salivarium), грибы рода Candida и разнообразные простейшие
(Entamoeba buccalis и Е. dentlis, Trichomonas buccalis).
Первоначально бактерии в полость рта и глотки поступают при
прохождении плода по родовым путям. В полость рта и глотки при
этом проникают лактобациллы, энтеробактерии, коринебактерии,
стафилококки и микрококки. В дальнейшем из организма матери или
от обслуживающего персонала роддома в полость рта ребёнка могут
попасть зеленящие стрептококки. В раннем детском возрасте в
организм ребёнка поступают стафилококки, грамотрицательные
диплококки (нейссерии), коринебактерии (дифтероиды) иногда
молочнокислые бактерии (лактобациллы). Во время прорезывания
зубов на слизистых оболочках поселяются анаэробные спирохеты,
бактероиды, фузобактерии, лактобациллы.
Основные поражения полости рта (кариес зубов, пульпиты,
периодонтиты, заболевания периодонта, воспаления мягких тканей)
вызывают стрептококки, пептострептококки, актиномицеты,
лактобациллы, коринебактерии и другие микроорганизмы. Реже
встречаются анаэробные инфекции, которые вызывают бактероиды,
актиномицеты, вейлонеллы, лактобациллы, нокардии, спирохеты и
другие микробы.
3.5. Микрофлора желудка и кишечника
В желудочно–кишечном тракте встречается облигатная
факультативная и транзиторная микрофлора. В пищеводе и желудке
обычно имеется транзиторная микрофлора, попадающая в них с пищей
или из ротовой полости. Несмотря на попадание в желудок большого
количества микробов, у
здоровых людей в норме в желудке
определяется небольшое количество микроорганизмов, что
обусловлено кислым значением рН и бактерицидными свойствами
желудочного сока. Благодаря кислой среде в желудке, в кишечник не
попадают патогенные и условно патогенные микробы. В желудке
могут встречаться кислотоустойчивые бактерии – лактобактерии. У
некоторых людей также стрептококки, S. ventriculus, B. subtilis,
анаэробные грамположительные кокки. В толще слизистой оболочки
желудка обнаруживаются анаэробы: вейлонеллы, бактероиды,
пептококки. В табл.2 представлен состав микрофлоры кишечника в
норме, в табл. 3 – факультативная микрофлора кишечника.
70
Таблица 2
Состав микрофлоры кишечника в норме
Таблица 3
Факультативная микрофлора кишечника
Низкое содержание микробов в тонком кишечнике
обусловл ено действием желчи, ферментов поджелудочной железы,
кишечной перистальтики, обеспечивающей быстрое удаление
микробов в дистальный отдел кишечника. Микрофлора тонкого
кишечника представлена преимущественно грамположительными
факультативно–анаэробными и анаэробными бактериями
(энтерококками, лактобактериями, бифидобактериями),