Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Методы и технологии получения фармсубстанций растительного и минерального происхождения. Монография
.pdf
Продолжение таблицы 8
Карвон С10Н14О
β-ситостерол С29Н50О
Стигмастерол С29Н48О
Бутилфталат C16H22O4
Терпеноид
Фитостерол, терпен
Фитостерол, терпен
Бутиловый эфир
фталевой кислоты
Стеариновая
кислота
C18H36O2
Карбоновая кислота
алифатического ряда
Из 19 соединений, обнаруженных в экстракте соцветий тысячелистника мелкоцветкового, 17 компонентов относится к терпенам и их производным.
Среди 19 соединений наибольшее процентное содержание от общего объёма
экстракта приходится на пиперитон (34,15 %) и карвон (24,93 %).
Обнаруженные химические соединения обычно входят в состав эфирных масел. В промышленности обнаруженные вещества используются в качестве пищевых ароматизаторов (пиперитон, карвон, лимонен, борнилацетат), компонентов
парфюмерных композиций (пиперитон, 1,8-цинеол, борнеол), компонентов ароматических масел (линалоол), компонентов косметических средств (линалоол, стеариновая кислота), используются для синтеза других ценных веществ (например,
пиперитон для синтеза ментола; пинены – для синтеза камфоры; линалоол – для
синтеза линалилацетата), для получения инсектицидов (камфен); в ароматерапии
(карвон, камфора), в медицине (1,8-цинеол, камфора, β-ситостерол, стигмастерол)
(Муравьева и др., 2002; Kotan et al, 2007; Lahora et al, 2011; Khani et al., 2012).
41
Согласно проанализированным информационным данным было выявлено,
Наименование
Время
Содержание
β-пинен
979 1,8 1,8-цинеол
1035 5,9 Линалоол
1095 0,8 Нонаналь
1104 1,7 Терпинеол
1164 1,5
Деканаль
1203 1,6 Карвакрол
1298 1,4 Нерилацетат
1362 54,3 α-копаен
1377 2,7 Тетрадекан
1402 1,6 Транс
-
кариофиллен
1418 8,3 α-гумулен
1455 1,9 β-фарнезен
1459
2,4 δ-муролен
1481
1,7 β-ионен
1490
0,8 δ-кадинен
1515
3,7 Октилфталат
7,9
Наименование
Химическая
что пиперитон, карвон и терпинеол (1,4 %) обладают противомикробными свойствами (Gallucci et al., 2010; Lahora et al., 2011).
Методом газовой хроматографии-масс-спектрофотометрии (ГХ/МС) в этанольном (50%-ном) экстракте соцветий цмина песчаного было определено 17 соединений (табл. 9, 10).
Таблица 9
Состав 50%-ного этанольного экстракта соцветий цмина песчаного
компонента
удержания
от общего объема экстракта, %
Основные компоненты 50 % этанольного экстракта
соцветий цмина песчаного (метод ГХ/МС)
Таблица 10
компонента
β-пинен С10Н16
1,8-цинеол С10Н18О
формула
Структурная формула Тип
Бициклический
монотерпен
Моноциклический
терпен
42
Продолжение таблицы 10
Линалоол С10Н18О
Нонаналь С9Н18О
Деканаль С10Н20О
Карвакрол С10Н13ОН
Терпеновый спирт
Альдегид, душистые
вещества
Альдегид
Монотерпеноид
фенола
Терпинеол С10Н18О
Нерилацетат C12H20O2
α-копаен С15Н24
Терпеновый спирт
Эфир монотерпенового
спирта
Трициклический
сесквитерпен
43
Тетрадекан
С14Н
30
Алкан
Продолжение таблицы 10
Транс-
кариофиллен
С15Н24
α-гумулен С15Н24
β-фарнезен C15H24
δ-муролен C15H24
Бициклический
сесквитерпен
Моноциклический
сесквитерпен
Бутиловый эфир
фталевой кислоты
Карбоновая кислота
алифатического ряда
β-ионон С13Н20О
δ-кадинен C15H24
Октилфталат С16Н22О2
Нортерпеноид
Бициклический
сесквитерпен
Эфир
44
Из 17 соединений, обнаруженных в экстракте соцветий цмина песчаного,
13 компонентов относятся к терпенам и их производным.
Наибольшее процентное количество приходится на эфир монотерпенового
спирта нерил ацетат (54,3 %).
По данным проанализированных информационных источников известно, что
карвакрол (1,4 %) замедляет рост E.coli и St. aureus (N. Gallucci et al, 2010).
Обнаруженные химические соединения обычно входят в состав эфирных масел.
В промышленности обнаруженные вещества используются для синтеза ценных веществ: β-пинен – для синтеза душистых веществ, мерцина; терпинеол – для синтеза
душистых веществ, кариофилен – для получения душистых веществ), как компонент
эфирных масел (1,8-цинеол), как компоненты пищевых эссенций (терпинеол, нональ,
деканаль); в парфюмерных композициях (нональ, деканаль, нерилацетат, кариофилен, гумулен, β-фарнезен, β-ионон); в медицине (1,8-цинеол, карвакрол); как ароматизаторы в косметических средствах (α-копаен, кариофилен, β-ионон) (Муравьева и др.,
2002; Kotan et al., 2007; Lahora et al., 2011; Khani et al., 2012).
Данные химические соединения, большая часть которых относится к группе
биологически активных веществ – терпенов и их производных, и выделенные экстракцией 50%-ным этанольным раствором из соцветий цмина песчаного и тысячелистника мелкоцветкового, чаще всего выделяют в виде эфирных масел. Предложенный способ получения этих веществ экстракцией выбранным экстрагентом является более простым и позволяет получать комплекс данных веществ, болееменее аналогичный по качественному и количественному составу с эфирными
маслами. Количество некоторых определённых веществ превышает известные
данные. Например, в эфирных маслах бессмертника H. angustifolium содержится до
40 % нерилацетата, H. italicum – от 36,6 до 47,5 %, в то время как в экстракте соцветий H. arenarium – 54,3 %.
2.7. Определение антиоксидантных компонентов соцветий бархатцев
методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии
Определение кверцетина проводили методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) на пластинах Sorbfil ПТСХ-П-В-УФ размером
10 х 15 см.
Приготовление стандартных образцов: 1 мг стандартного образца кверцетина
растворяли в 5 мл метанола в пикнометре вместимостью 10 мл. Объём пикнометра
доводили до метки метанолом и тщательно перемешивали. Полученный раствор
содержал 100 мг/л кверцетина. Из этого раствора готовили стандартные растворы
в метаноле с концентрациями 25, 50 и 75 мг/л.
Для нанесения образцов использовали автосамплер CAMAG ATS4. Наносимый
объём стандартных образцов и исследуемых экстрактов – 4 мкл. Пластинку помещали в предварительно насыщенную хроматографическую камеру и элюировали,
длина пробега составляла 4,5 см. Пластинку высушивали в течение 5–10 минут при
45
комнатной температуре в вытяжном шкафу, а затем в сушильном шкафу при тем-
Образец, № экстракта
Rf кверцетин
Средняя масса кверцетина, мг
Экстракт №
1, спиртовой
0,72 62,52
Экстракт №
2, спиртовой
0,72 60,04
Экстракт №
3, водный
0,74 40,40
Экстракт №
4, водный
0,73 43,57
пературе 85 °С в течение 5 минут. Далее оставляли для созревания пластинки на
6–12 часов при комнатной температуре в тёмном месте.
Для количественной обработки хроматограммы использовали сканирующий
денситометр CAMAG TLC Scanner 3 при длине волны 410 нм и размером щели
2,00 х 0,2 мм. Приём данных и количественную обработку полученных результатов
проводили на компьютере с использованием программы WinCATS.
В качестве элюента использовали систему – этилацетат : бутанол : муравьиная кислота : вода (25 : 15 : 5 : 5). В качестве стандарта использовали раствор
кверцетина. Во всех четырёх экстрактах было обнаружено данное вещество, но
в разной концентрации (табл. 11, рис. 10).
Таблица 11
Качественное и количественное определение кверцетина
в экстрактах соцветий T. Patula
Рис. 10. ВЭТСХ хроматограмма (оригинал) определения кверцетина
в экстрактах соцветий T. patula
Все выбранные виды экстракции позволяют извлекать такой флавоноид как
кверцетин (табл. 11). Большее содержание кверцетина наблюдается в водноспиртовых экстрактах, полученных методом настаивания с нагреванием и без.
Большой разницы по содержанию кверцетина между этими двумя экстрактами не
наблюдалось. Водная экстракция в результате использования только полярного
46
растворителя воды (как с нагреванием, так и без) позволяет выделять из соцветий
T. patula в 1,5–2 раза меньше кверцетина, чем экстракция менее полярными растворителями, подходящими для менее полярных соединений, таких, как флавоноиды. Таким образом, для выделения кверцетина в данном случае подходит элюент
относительно средней полярности. Использование сильнополярного элюента – воды – не позволяет достаточно полно извлекать данный флавоноид.
2.8. Результаты химического анализа сульфидно-иловой грязи
оз. Карантинное Астраханской области
Изучаемая нами сульфидно-иловая лечебная грязь добывается из оз. Карантинное, которое расположено в западной части дельты реки Волги, в Лиманском
районе Астраханской области. Озеро дельтового происхождения, питается пресными поверхностными солёными грунтовыми водами. В расходной части баланса преобладают потери воды над испарением и в значительно меньшей степени – на
фильтрацию в берега. Гидролого-гидрохимический режим неустойчив: озеро самосадочное, почти ежегодно пересыхает с выпадением солевой корки. Изучаемая
нами грязь из оз. Карантинное в структурном отношении представляет собой сложную физико-химическую динамическую систему, которая состоит из трёх взаимосвязанных компонентов: грязевого раствора (жидкая часть), грубодисперсного (остов,
скелет) и тонкодисперсного (коллоидный комплекс). Структура лечебных грязей неодинакова, что имеет большое значение для её лечебных свойств (табл. 12).
Основная часть грязи – кристаллический скелет, состоящий из грубодисперсных обломков силикатных материалов, гипса, кальцита, доломита, арагонита и органических остатков растительного или животного происхождения. В связи с преобладанием карбонатных частиц скелет грязи можно отнести к карбонатному типу
(Агапов, 1988; Ветитнев, 2007). Вторую составную часть лечебной грязи определяет коллоидная фракция, которая связывает отдельные частицы скелета и заполняет все его промежутки (табл. 13).
Это наиболее тонкодисперсная часть грязевого скелета, включающая в себя
частицы размером менее 0,001 мм, органические вещества, органоминеральные
соединения, гидротроилит, кремниевую кислоту, серу, гидраты окиси алюминия,
закиси и окиси железа.
В результате масс-спектрального анализа сульфидно-иловой грязи оз. Карантинное Астраханской области были выявлены 27 элементов (табл. 14), среди которых бальнеологически значимые: Mg (2,6641 атом.%), B (0,0072, атом.%),
Br (0,0064 атом.%), K (2,4583 атом.%) (Обросов, 1990; Холопов, 1991, 2002).
47
Таблица 12
Основные компоненты
% на сырую грязь
% на сухое вещество
Грязевой раствор
А. Кристаллический скелет, в том
числе:
Б. Гидрофильный коллоидный комплекс:
Общая сумма
100,00
100,00
В литре раствора содержится
Граммы
Мг-
экв %-экв Катионы: натрий и калий
102,73
4466,59
81
Сумма катионов
115,95
5541,65
100,0
рН
6,84
Состав сульфидно-иловой грязи оз. Карантинное Астраханской области
Жидкая
фаза
Твёрдая
фаза
1. Вода
2. Растворенные соли
Сумма
1. Гипс (CaSO4)
2. Карбонат кальция (СаСО3)
3. Карбонат магния (MgCO3)
4. Глинистый остов,
в т.ч. силикатных частиц диаметром:
> 0,1 мм
0,1–0,05 мм
0,05–0,01 мм
0,01–0,005 мм
0,005–0,001 мм
1. Силикатных частиц диаметром < 0,001 мм
2. Сульфид железа (FeS),
в том числе Н2S
3. Продукты разрушения HCl,
в т.ч. SiO
Fe2O
Al2O
2
3
3
4. Органическое вещество (потери при
прокаливании), в т.ч. углерод
5. Поглощённые ионы
46,08
14,74
60,82
9,52
8,94
1,47
8,96
2,16
1,25
3,60
1,70
0,25
5,05
0,10
0,04
3,33
0,58
1,75
1,00
1,69
0,98
0,12
27,34
17,65
16,58
2,73
16,62
4,01
2,32
6,68
3,15
0,46
9,36
0,19
0,07
6,18
1,08
3,25
1,85
3,13
1,82
0,22
кальций
магний
железо закисное
железо окисное
Анионы: хлор
бром
йод
сульфат гидрокарбонат
карбонат
Сумма анионов
Борная кислота (Н3ВО3), г/л
Общая минерализация, г/л
Растворенный сероводород
Формула химического состава
Состав грязевого отжима
0,381
12,84
0,0003
0,0012
175,43
0,093
не обн.
28,14
0,329
203,99
0,016
319,95
0,0024
M 320,0 (Na + K) 81 Mg 19
19,00
1056,00
4948,84
1,16
586,25
5,40
5541,65
Cl 89 SO4 11
Таблица 13
19
89
11 100,0
48
Таблица 14
Содержание
Содержание
Содержание
Содержание
B 0,0072
0,0029
Ca
14,1734
20,9266
C
0,4592
0,2032
Ti
0,3306
0,5833
N
0,1214
0,0626
V
0,0039
0,0073
O
36,9156
21,7585
Cr
0,0096
0,0185
F
0,0076
0,0053
Mn
0,0417
0,0843
Na
5,0071
4,3017
Fe
2,256
4,6415
Mg 2,6641
2,3868
Co
0,0003
0,0007
Al 6,1448
6,105
Ni
0,0018
0,004
Si
10,5962
10,9531
Cu
0,0033
0,0076
P
0,0743
0,0848
Zn
0,0059
0,0142
Si 1,635
1,9316
Ga
0,0002
0,0004
Cl 16,9526
22,1448
As
0,0001
0,0004
Se 0,0008
0,0023
Br
0,0064
0,0187
Элемент
Содержание в пробе
сухого пелоида
, мг/кг
Среднее содержание в почвах, мг/кг
Цинк
6,2 50 Марганец
310 850 Медь
6 20
Никель
2 40
Кобальт
0,6 10 Свинец
3,6 10 Кадмий
<0,1 0,5 Хром
1,2 200 Ртуть
не обн.
0,01
Химический состав сульфидно-иловой грязи оз. Карантинное
Элемент
K 2,4583 3,5409
в атом. %
Содержание тяжёлых металлов пробы лечебной грязи
в масс. %
Элемент
в атом. %
в масс. %
Таблица 15
В используемом для внутрижелудочного введения экстракте содержатся
бальнеологически значимые компоненты в соответствующих физиологически адекватному разведению концентрациях (Бальнеологическое заключение, 2007).
Большое значение для экспериментальных исследований на биологических
объектах имеет знание степени токсичности и радиоактивности (Зеленецкая, 1992;
Пирумян, 1990). Как показано в таблицах 13–14, оба показателя находились на
уровне нижних границ нормы.
Изучение химического состава сульфидно-иловой лечебной грязи предшествовало дальнейшим исследованиям её активности на биологических объектах, что требовало подготовки экстракта. Приготовление экстракта производилось путём тщательного перемешивания одной части сульфидно-иловой грязи и пяти частей дистиллированной воды. Далее водно-грязевую смесь экстрагировали на встряхивателе
49
«Экрос-6500» (с интенсивностью колебаний в минуту) и центрифугировали при 5000
Содержание радионуклидов
Радий
-
226 Торий
-
232 Цезий
-
137 Калий
-40
5,4 6,8 <13,0
126
об./мин. в течение 15 минут, получая прозрачную бесцветную жидкость.
Таблица 16
Анализ гамма-спектрометрических измерений пробы лечебной грязи,
активность в Бк/кг
Минерализация и содержание хлоридов в подобных водных экстрактах увеличены. Это связано с тем, что при экстрагировании вода размывает кристаллическую
решётку, вызывая дополнительное поступление солей в грязевой раствор. В связи
с этим возникает необходимость разведения полученного экстракта до физиологически адекватного состояния. Для этого полученный маточный экстракт доводили
дистиллированной водой до получения изотонического раствора. Изотоничность
контролировали с помощью теста на осмотическую резистентность эритроцитов. Таким образом, готовый для внутрижелудочного введения животным грязевой экстракт
имел следующее разведение: 17,5 мл маточного экстракта, доведённого до 100 мл
дистиллированной водой (Касимова и др., 2007, 2008; 2017).
2.9. Результаты химического анализа рапы оз. Карантинное
(Малое Лиманское) Астраханской области
Исследовавшийся образец рапы был отобран в конце лета (17.08.2007 г.) при
минимальном уровне вод и, соответственно, при максимальном значении минерализации – 368 г/л. Реакция среды слабокислая (рН = 5,3), что, видимо, обусловлено
наличием в рапе повышенного содержания органических кислот. Органолептические свойства: вода полупрозрачная, светло-коричневая, с небольшим коричневым
осадком и слабым своеобразным морским запахом.
Реакция среды слабокислая (рН = 5,3), что, видимо, обусловлено повышенным
содержанием органических кислот в рапе. Органолептические свойства: вода полупрозрачная, светло-коричневая, с небольшим коричневым осадком и слабым своеобразным морским запахом. Токсичные компоненты (свинец, ртуть, нитраты и другие)
содержатся в количествах, значительно меньших допустимых концентраций. Содержание радионуклидов не превышает пределов, установленных нормами радиационной безопасности (НРБ-99). Санитарно-микробиологические показатели рапы благополучные, чему способствует её высокая минерализация (Кондратенко, 2008).
В соответствии с Классификацией минеральных вод Минздрава России рапа
оз. Лиманское при максимальных величинах минерализации (> 300 г/л) относится
к бромным (Вr 1096 мг/л), борным (Н3ВО3 644 мг/л) крепким рассолам хлоридно-
50
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]