Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Биохимия и биохимия мышечной деятельности. Практикум
.pdf
111
то наблюдается кирпично-красное окрашивание в результате образования закиси меди.
Результаты опыта занести в табл. 3.5 и дать объяснение.
Работа 3. Реакция Троммера (на глюкозу).
Реактивы:
1) свежая моча;
2) глюкоза, 1 %-ный раствор;
3) едкий натрий, 10 %-ный раствор;
4) сульфат меди, 5 %-ный раствор.
Опыт. В первую пробирку (опытную) налить 10 капель мочи, во вторую
(контрольную) — 10 капель раствора глюкозы. В обе пробирки добавить по
10 капель едкого натрия и по 2 капли сульфата меди, нагреть на спиртовке до
кипения. В контрольной пробирке, содержащей глюкозу, выпадает осадок закиси меди кирпично-красного цвета. В опытной пробирке изменения цвета не
наблюдается, если в ней нет глюкозы.
Результат опыта занести в табл. 3.5 и дать объяснение.
Для количественного определения глюкозы в моче требуется предвари-
тельно профильтровать, подкислить мочу и удалить белок.
Лабораторная работа 2. Полуколичественное определение
глюкозы в моче (по Бенедикту)
Методика и порядок выполнения работы
Оборудование: штатив с пробирками, пипетки, бюретки, воронки, стака-
ны, колбы, спиртовки, водяная баня, фильтровальная бумага.
Реактивы:
1) свежая моча;
2) реактив Бенедикта. Заранее готовится лаборантом: 17,3 г лимоннокислого натрия смешать с 10 г безводного углекислого натрия, растворить при кипячении в 70 мл дистиллированной воды. Отдельно растворить 1,73 г сернокислой меди в 10 мл воды, растворы слить, все время помешивая, и после охлаждения довести объем до 100 мл.
Опыт. В пробирку налить 5 мл реактива Бенедикта, добавить 8 капель мо-
чи. Кипятить на спиртовке 2 мин. Если в моче не содержится глюкоза, то цвет
мочи не меняется. Если после кипячения в моче обнаруживается глюкоза, то цвет
112
мочи меняется и становится: горохово-зеленым (0,08–0,1 %), коричнево-зеленым
(0,5 %), коричневым (0,6 %), желтым (1 %), красным (2 % и более).
Результат опыта занести в табл. 3.6 и дать объяснение.
Лабораторная работа 3.
Количественное определение глюкозы в моче
диагностическими полосками глюкоФАН (Lachema)
Методика и порядок выполнения работы
Оборудование: штатив с пробирками, пипетки, бюретки, воронки, стака-
ны, колбы, спиртовки, водяная баня, фильтровальная бумага.
Реактивы:
1) свежая моча;
2) диагностические полоски глюкоФАН. Цветные квадратики на шкалах
сравнения соответствуют следующим величинам содержания глюкозы в исследуемой моче: в первой шкале — 2,78 ммоль/л, во второй — 5,54 ммоль/л, в третьей — 6,7 ммоль/л, в четвертой — 8,3 ммоль/л.
Опыт. Собрать мочу. В пробирку налить 10 мл мочи, опустить в нее диа-
гностическую полоску и сразу вынуть. Через 20–30 с после погружения полоски
оценивают зоны индикации для глюкозы мочи. Выявление и определение глюкозы основаны на ферментной глюкогозооксидазной реакции, при которой желтый цвет индикаторной шкалы при наличии в моче глюкозы переходит в зеленый
даже при наименьших количествах глюкозы в моче.
Результат реакции сравнить со шкалой, занести в табл. 3.6 и дать объяс-
нение.
Лабораторная работа 4. Количественное определение
глюкозы в моче тест-полосками Combina
Методика и порядок выполнения работы
Оборудование: штатив с пробирками, пипетки, бюретки, воронки, стака-
ны, колбы, спиртовки, водяная баня, фильтровальная бумага.
Реактивы:
1) свежая моча;
2) глюкозооксидаза (1E); пероксидаза (1Е);
113
3) тетраметилбензидин (230 мкг);
4) тест-полоски для глюкозы мочи. Цветные квадратики на шкалах могут
изменяться от желтого до зеленого и темно-синего цвета и соответствуют следующим величинам концентрации глюкозы в исследуемой моче: в первой шкале — 2,8 ммоль/л, во второй — 5,5 ммоль/л, в третьей — 17 ммоль/л, в четвертой — 55 ммоль/л; обозначения на шкале можно выразить в мг/дл, тогда соответственно: в первой шкале — 50, во второй — 100, в третьей — 300 и в четвертой — 1 000 мг/дл.
Опыт. Собрать мочу. Тест-полоску погрузить в мочу так, чтобы реактив-
ная полоска полностью смочилась. Извлечь из пробирки, удалить с тест-полоски
излишки мочи, положить горизонтально. Сравнить через 1 мин с соответствующей шкалой цветов на контейнере и определить количество глюкозы в моче
(ммоль/л или мг/дл).
При наличии глюкозы в моче желтая окраска изменяется в различные от-
тенки зеленого, голубого или синего цветов.
Определение глюкозы в моче с помощью глюкотеста основано на специ-
фической ферментативной реакции окисления глюкозы до глюконовой кислоты
с образованием окрашенного соединения.
Результат опыта занести в табл. 3.6 и дать объяснение.
Таблица 3.5
Качественное определение глюкозы в моче
№ проб
ы
ФИО
студента
Факультет
Курс
Группа
Пол
Возраст
Специализация
Квалификация
Покой
Глюкоза в моче
Окрашивание
Проба
Мора
Реакция
Фелинга
Реакция
Троммера
К
О 1
2
3
4
5
Нормальные значения
– – –
–
114
Таблица 3.6
Количественное определение глюкозы в моче
№ проб
ы
ФИО
студента
Факультет
Курс
Группа
Пол
Возраст
Специализация
Квалификация
Покой
Глюкоза в моче
Проба
Бенедикта,
%
ГлюкоФАН
(Lachema),
ммоль/л
Глюкотест
(Combina),
ммоль
л
мгдл
1
2
3
4
5
Нормальные значения
0 0 0
Контрольные вопросы
1. В чем заключается различие механизма действия стероидных гормонов
и гормонов белковой и аминокислотной природы? Почему нейрогормонам гипоталамуса принадлежит ведущая роль в регуляции обмена веществ в организме?
2. Что такое эпифиз (шишковидная железа)? Почему она нам так помогает
в «творческих» делах, поддерживает наше настроение, регулирует наш сон
и бодрствование? Но если она начинает плохо секретироваться, то это целый букет «хандры», т. е. «депрессии» — чумы XXI в.? Какой гормон всем этим руководит? Как в сказке сказано, в древности он у нас было как «третье око». Почему
мы от него так зависимы и не так все «гениальны», как хотелось бы?
3. Какие гормоны вырабатывает вилочковая железа (тимус)? Какие гор-
моны влияют на Т- и В-систему иммунитета? Почему «у бывших знаменитых
спортсменов» с окончанием спортивной карьеры часто встречается снижение
иммунитета?
4. Почему в одной эндокринной железе (самой древней), например надпо-
чечниках, вырабатываются различные по строению и механизму действия гормоны, но при этом они не мешают работе друг друга? Укажите, какие гормоны
вырабатываются в мозговом, а какие — в корковом слое надпочечников.
115
5. Где еще, кроме эндокринных желез, наш организм образует и секрети-
рует гормоны (тканевые, желудочно-кишечного тракта, простагландины)? Какие
еще внутренние органы в этом участвуют?
6. Какие вы знаете феромоны (гормоны запаха)? Почему они так успешно
выпускаются косметической промышленностью?
7. Сколько всего в нашем организме насчитывается гормонов, если учесть,
что все вместе они весят всего 1 г?
8. Какие гормоны изменяют проницаемость биомембран?
9. Какие гормоны принимают участие в биосинтезе белка, кроме анаболи-
ческих? Какие гормоны усиливают биосинтез белка в мышечной ткани?
10. Объясните механизм действия анаболических стероидных гормонов.
Укажите их положительное и отрицательное действие.
11. Какие гормоны участвуют в мобилизации энергетических веществ во
время выполнения физических упражнений?
12. Перечислите гормоны, участвующие в обмене углеводов при мышеч-
ной деятельности.
13. Перечислите гормоны, регулирующие липидный обмен при мышечной
деятельности.
14. Какие гормоны поддерживают водно-минеральный обмен? Почему обез-
воживание организма спортсменов снижает их физическую работоспособность?
15. Почему потовые железы, помогая нам удалять из организма ненужные
вещества (аммиак, воду, мочевину, ацетон, лактат), одновременно с этим заставляют нас терять различные очень ценные минеральные вещества?
16. Какие гормоны участвуют в поддержании постоянной концентрации
глюкозы в крови (ммоль/л)? По какой причине глюкоза может обнаружиться
в моче?
17. Сделайте заключение по определению глюкозы в моче.
Литература
1. Березов, Т.Т. Биологическая химия : учебник / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коров-
кин. — 3-е изд., перераб. и доп. — Москва : Медицина, 2004. — С. 248–297;
357–359; 403–404; 534–544.
2. Биохимия : учебник для институтов физической культуры / под редак-
цией Н.Н. Яковлева. — 2-е изд., испр. и доп. — Москва : Физкультура и спорт,
1974. — С. 196–201; 281–294.
3. Биохимия : учебник для институтов физической культуры / под редак-
цией В.В. Меньшикова, Н.И. Волкова. — Mосква : Физкультура и спорт,
1986. — С. 115–123; 246–257.
116
4. Биохимия : учебник / Е.С. Северин, Т.Л. Алейникова, Л.В. Авдеева
[и др.] ; под редакцией Е.С. Северина. — 4-е изд., испр. — Москва : ГЭОТАРМедиа, 2005. — С. 545–615.
5. Биохимия мышечной деятельности : учебник для студентов физического
воспитания и спорта / Н.И. Волков, Э.Н. Несен, А.А. Осипенко, С.Н. Корсун. —
Киев : Олимпийская литература, 2000. — С. 63–73; 148–149; 166–168; 203–205;
481–485.
6. Виру, А.А. Гормональные механизмы адаптации и тренировки / А.А. Ви-
ру. — Ленинград : Наука, 1981. — 156 с.
7. Дубровский, В.И. Спортивная медицина : учебник для студентов вузов /
В.И. Дубровский. — Москва : ВЛАДОС, 1998. — С. 231–250.
8. Иегатесан, М. Допинг и контроль за ним / М. Иегатесан // Спортивная
медицина. Справочник для врача и тренера. — Москва : Терра-Спорт, 1999. —
С. 202–206; 233–237.
9. Мелвин, У. Эргогенные средства в системе спортивной подготовки /
У. Мелвин. — Киев : Олимпийская литература, 1997. — С. 111–124.
10. Николаев, А.Я. Биологическая химия : учебник для студентов медвузов
и врачей всех специальностей / А.Я. Николаев. — 3-е изд., перераб. и доп. —
Москва : Медицинское информационное агентство, 2004. — С. 387–431.
11. Рогозкин, В.А. Метаболизм анаболических андрогенных стероидов /
В.А. Рогозкин. — Ленинград : Наука, 1988. — 153 с.
12. Уилмор, Дж.Х. Физиология спорта и двигательной активности /
Дж.Х. Уилмор, Д.Л. Костилл. — Киев : Олимпийская литература, 1997. —
С. 122–131.
13. Яковлев, Н.Н. Биохимия спорта : учебник для студентов института фи-
зической культуры / Н.Н. Яковлев. — Москва : Физкультура и спорт, 1974. —
С. 77–104; 191–205.
ТЕМА 23. БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ
РАЦИОНАЛЬНОГО ПИТАНИЯ СПОРТСМЕНОВ
Теоретические вопросы:
1. Потребности организма спортсменов в энергетических веществах. Кало-
рийность питания спортсменов.
2. Соотношение белков, липидов и углеводов в пищевом рационе спортс-
менов.
3. Значение витаминов, минеральных веществ (макро- и микроэлементов)
в питании спортсменов.
117
4. Применение углеводов, полиненасыщенных жирных кислот, липотроп-
ных веществ, незаменимых белков и аминокислот в питании спортсменов.
5. Питьевой режим спортсменов.
6. Отличие питания спортсменов от питания лиц умственного и физиче-
ского труда и студентов других профессий.
Лабораторная работа.
Качественное определение углеводов в моче
Методика и порядок выполнения работы
Оборудование: штатив с пробирками, пипетки, бюретки, воронки, стака-
ны, колбы, спиртовка.
В моче человека, кроме глюкозы, могут быть обнаружены и другие угле-
воды: галактоза, фруктоза, сахароза, лактоза, пентоза, которые дают положительные качественные реакции.
Работа 1. Проба Крафта (на пентозу).
Реактивы:
1) свежая моча;
2) реактив Крафта: 1 г орцина растворяют в 500 мл соляной кислоты
(удельный вес 1,191) и прибавляют 20 капель 10 %-ного полуторахлорного железа. Реактив стоек, хранить в хорошо закупоренной темной склянке.
Оформление протокола лабораторного занятия см. в прил. 13 и 14.
Опыт. В пробирку налить 5 мл реактива Крафта и нагреть на спиртовке до
кипения, затем сразу прилить 5 капель мочи. При наличии пентозы в моче сразу
появляется зеленое окрашивание в верхнем слое жидкости.
Результат опыта занести в табл. 3.7 и дать объяснение.
Работа 2. Проба Селиванова (на фруктозу) (теоретическое ознаком-
ление).
Реактивы:
1) свежая моча;
2) соляная кислота, 25 %-ный раствор;
3) резорцин (кристаллы).
Опыт. К 1 мл исследуемой мочи добавить 1 мл раствора соляной кисло-
ты и, прибавив несколько кристаллов резорцина, прокипятить на спиртовке
1–2 мин. Наблюдать появление красного окрашивания, если в моче содержится
фруктоза. После охлаждения выпадает осадок кирпично-красного цвета.
Результат опыта занести в табл. 3.7 и дать объяснение.
118
Работа 3. Проба Мальфатти (на лактозу).
Реактивы:
1) свежая моча;
2) аммиак водный, концентрированный;
3) едкий натрий или калий, 10 %-ный раствор.
Опыт. К 10 мл мочи прилить 5 мл раствора аммиака и 10 капель раствора
едкого натрия. Полученную смесь нагреть в течение 5 мин на водяной бане (но
некипящей). Наблюдать появление розового окрашивания в присутствии лактозы, а глюкоза окрашивает смесь в красно-коричневый или коричневый цвета.
Результат опыта занести в табл. 3.7 и дать объяснение.
Работа 4. Обнаружение мальтозы в моче.
Реактивы:
1) свежая моча;
2) аммиак водный, концентрированный;
3) гидроокись калия, 20 %-ный раствор;
4) мальтоза, 1 %-ный раствор.
Опыт. Собрать мочу. В первую пробирку (опытную) налить 5 мл мочи, во
вторую (контрольную) — 5 мл раствора мальтозы. В обе пробирки прилить по
2,5 мл раствора аммиака и 0,2 мл гидроокиси калия. Нагреть на водяной бане
в течение 30 мин при температуре 60 °С. Мальтоза с аммиаком в щелочной среде
при нагревании образует окрашенные соединения. При обнаружении мальтозы
в моче появляется красное окрашивание.
Результат опыта занести в табл. 3.7 и дать объяснение.
Таблица 3.7
Качественное определение углеводов в моче
№ проб
ы
ФИО
студента
Факультет
Курс
Группа
Пол
Возраст
Специализация
Квалификация
Покой
Определение углеводов
в моче
Окрашивание
Пентоза
Фруктоза
Лактоза
Мальтоза
К
О
1
2
119
№ проб
ы
ФИО
студента
Факультет
Курс
Группа
Пол
Возраст
Специализация
Квалификация
Покой
Определение углеводов
в моче
Окрашивание
Пентоза
Фруктоза
Лактоза
Мальтоза
К
О
3
4 5
Нормальные значения
– – –
–
Контрольные вопросы
1. В чем заключается особенность питания спортсменов в отличие от лиц
умственного и физического труда, а также от студентов других специальностей?
2. Кто из отечественных биохимиков обратил на это впервые пристальное
внимание?
3. В чем заключается заслуга А.И. Пшендина, В.А. Рогозкина, В.Л. Смуль-
ского, Н.Н. Шишиной, Н.Н. Яковлева и др. в изучении вопросов питания спортс-
менов?
4. Почему «новую теорию питания» академика A.M. Уголева, раскрываю-
щую тонкие механизмы мембранного пищеварения, необходимо знать каждому
человеку в повседневной жизни, а особенно спортсменам?
5. Каким должен быть качественный и количественный состав пищи спортс-
менов? Почему она должна быть привычной, легкоусвояемой?
6. Перечислите полноценные белки в питании спортсменов. Какие незаме-
нимые аминокислоты в этом помогают? Например, одна аминокислота может
синтезировать три гормона: «гормон радости», «гормон-хулиган» и «гормон
энергетический» (укажите их биохимические названия).
7. Почему в питании спортсменов должны преобладать непредельные жир-
ные кислоты? Почему нельзя исключать из пищевого рациона спортсменов животные жиры?
8. Почему такие три продукта, как икра рыб, молоко и яичный белок, очень
хорошо используются нашим организмом при биосинтезе белка?
9. Что такое свободные радикалы, когда и где они образуются? Перечис-
лите продукты питания, которые убирают эти ядовитые вещества из нашего организма.
120
10. Почему россияне так любят Масленицу? Видимо, не зря, потому что
они себе устраивают праздник из «блинов, и все это смазывают сливочным маслом, сметаной, начиняют красной и черной икрой». Каким, на ваш взгляд, полезным свойством они обладают?
11. Японцы придумали деликатес «суши», в состав которого входят самые
ценные морепродукты: икра красная и черная, икра морского ежа, тунец, лососевая рыба и крабы. Объясните, в чем заключается секрет этих морепродуктов.
12. Почему морепродукты, используемые многими народами, не приводят
к развитию у них такого грозного недуга, как атеросклероз, и они живут дольше?
Каких веществ в этих продуктах больше: незаменимых белков, незаменимых
жирных кислот, витаминов, минеральных веществ?
13. В сутки холестерина (холестерола) в организме синтезируется 0,8–
1,5 г — около 1 г, а с пищей холестерина (холестерола) в наш организм поступает
300–500 мг — 0,5 г! Почему все так боятся холестерина (холестерола), ведь без
него и дня нельзя прожить? Если он себя ведет нормально, то он дает нам «гормон любви» (тестостерон). Если он начинает вести себя не так, как надо, то вот
вам, пожалуйста, «гормон зла» (кортизол). Если его недостаточно в нужном месте и в нужном количестве, то вот вам, пожалуйста, лысина на голове у мужчин.
Почему он так себя ведет?
14. Какие вы знаете «эргогенные» средства, используемые в практике
спорта?
15. Перечислите жиро- и водорастворимые витамины, используемые спортс-
менами, их анаболическое и антиоксидантное действие. На какие еще другие
виды обмена веществ они влияют (прил. 15)?
16. Какова потребность в минеральных веществах у спортсменов?
17. Какие минеральные вещества необходимы для построения белков, фер-
ментов и гормонов?
18. В чем заключается особенность питьевого режима (воды) у спортс-
менов?
19. Почему мы забыли старые традиции наших народов и исключили из
питьевого режима спортсменов алкогольные напитки? А ведь как на Руси хорошо готовили «медовуху, пшеничную водку, пиво, квас»! А вина виноградные
грузинские и молдавские! А коньяк армянский пятизвездный, который, кстати,
пил сам Черчилль! А наши кыргызские напитки: «Советское шампанское мускатное», целебный напиток «Кымыс», «Шоро» и многие другие! Так давайте же
употреблять все наши продукты, а то, как сказал поэт С. Михалков, «все заграничное, все заграничное, а сало русское едят!» Как вы считаете?
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]