Глава 2

Задание 1

А. По характеру течения заболевания у больного можно предположить острую дизентерию.

В. Для исследования служат испражнения больных. Из них отбирают для посева кусочки слизи и гноя, которые тщательно промывают в физиологическом растворе. Испражнения собирают тампоном или специальной стерильной стеклянной трубочкой.

С. В данном случае применяют бактериологический метод. Так как больной не принимал антибиотиков, можно использовать посев материала сразу на плотные среды (можно также сделать предварительный посев на селенитовую среду обогащения).

D.

1. Отмытые физраствором кусочки гноя и слизи переносят на поверхность питательной среды в чашки Петри и досуха растирают стерильным шпателем. Посев делают на среду Плоскирева, Эндо. В селенитовую, магниевую среду засевают для задержки роста сопутствующей флоры. Посевы ставят в термостат (37°С) на 18–24 часа.

2. Шигеллы на средах Плоскирева и Эндо образуют колонии S формы – круглые, выпуклые, с ровным краем, бесцветные, мелкие или средних размеров (1–3 мм), могут давать колонии R-формы – плоские с зазубренными краем, что характерно для S. sonnei.

3. После приготовления мазка из не менее 3 подозрительных колоний, окраски по Граму, его микроскопируют. При условии однородности морфологических свойств материал из этих колоний пересевают в пробирки со средами Ресселя или Олькеницкого. Помещают в термостат (37°С).

4. На следующий день учитывают характер роста на данных средах, проводят анализ культур, не ферментирующих лактозу и мочевину, но ферментирующих глюкозу с образованием кислоты, готовят мазок, окрашивают по Граму, микроскопируют. Если культура микробов чистая, продолжают изучать ее биохимические свойства.

5. Культуру пересевают в полужидкие среды Гисса с глюкозой, лактозой, маннитом, мальтозой, сахарозой, для изучения сахаролитических свойств, а также в 1% пептонную воду (ПВ) с индикаторными бумажками для определения образования сероводорода и индола. Для изучения подвижности микробов их засевают в пробирку с 0,2% питательным агаром.

6. Выделенную культуру микробов испытывают на чувствительность к поливалентному дизентерийному бактериофагу.

7. Для определения антигенных свойств исследуемых штаммов микробов используют реакции агглютинации на стекле. Реакцию сначала выполняют с групповыми сыворотками, которые включают антитела к шигеллам, преобладающим в данной местности, а затем с монорецепторными видовыми и типовыми сыворотками.

8. Через 18–24 часа анализируют результаты посевов предыдущего дня. Шигеллы, как правило, ферментируют глюкозу до кислоты (исключая S. flexneri серовара 6). Ферментация лактозы наблюдается на 2–3-е сутки только у штаммов S. sonnei. Возбудители дизентерии не ферментируют сахарозу, в 1% ПВ – не образуют сероводород, а образование индола – разное у разных видов шигелл и серовариантов в пределах одного вида. Шигеллы неподвижны, лизируются поливалентным дизентерийным бактериофагом.

9. Для определения вида шигелл может быть использована прямая реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Задание 2

А.

1. Учитывают посевы на среде Олькеницкого через 24 часа (изменение цвета столбика без образования газа, отсутствие расщепления мочевины и образования сероводорода).

2. Положительная агглютинация со смесью сывороток Флекснера и Зонне.

3. Готовят мазки, окрашивают по Граму. В мазках наблюдают средних размеров грамотрицательные, хаотично расположенные палочки с закругленными концами. Спор, капсул нет.

4. Высевают выделенную культуру в короткий пестрый ряд Гисса, в который можно добавить пробирки с арабинозой, рамнозой. Лучше использовать полужидкие среды, так как сразу можно изучить подвижность. В результате подвижность бактерий отсутствует; культура ферментирует глюкозу, маннит, иногда дульцит с образованием кислоты.

5. Агглютинация на стекле с адсорбированными сыворотками Флекснера, Ньюкасла и Бойда; агглютинация на стекле с адсорбированными типовыми сыворотками.

Задание 3

А. С целью расшифровки вспышки острой кишечной инфекции необходимо провести бактериологическое исследование испражнений.

В. Острое начало, повышенная температура, жидкий стул с примесью слизи и крови, частые, ложные позывы на дефекацию позволяют заподозрить острую дизентерию.

С. В первую очередь проводят однократное бактериологическое обследование всех детей и персонала этого коллектива.

За детьми и персоналом установливают строгое наблюдение с двухкратным измерением температуры в начале и в конце дня с осмотром стула детей.

При выявлении новых случаев заболевания – немедленно госпитализируют в инфекционное отделение.

При выявлении бактерионосителя – его изолируют от коллектива и лечат.

Проводят дезинфекцию на пищеблоке и в подсобных помещениях.

Задание 4

А. Да, можно сказать, что из испражнений больного выделены холерные вибрионы, относящиеся к I группе по классификации Хейберга.

В. Биовар определяют на основании изучения у культуры фаголизабельности фагами С и Эль-Тор 2, а также по способности гемолизировать эритроциты барана. Используют также определение чувствительности к полимиксину.

Серовар определяют в реакции агглютинации с типоспецифическими сыворотками Инаба, Огава.

С. Да. Используют экспресс-метод диагностики (РИФ), иммобилизацию вибрионов О-холерной сывороткой и пробу с типовыми холерными бактериофагами.

Задание 5

А. В бактериологической лаборатории по диагностике особо опасных инфекций на щелочных простых питательных средах и селективной среде ТСВS выделена культура грамотрицательных, подвижных, слегка изогнутых тонких палочек. Культура агглютинировалась О‑холерной сывороткой, ферментировала сахарозу, маннозу с образованием кислоты, лизировалась типовым фагом Эль-Тор 2.

В. С целью профилактики используют вакцину WC/rBS (Швеция), которая состоит из убитых целых клеток V. сholerae О1 с очищенной рекомбинантной В‑субъединицей холерного анатоксина. Вакцину WC/rBS применяют для вакцинации детей старше 5 лет. После двухкратной вакцинации у 70% вакцинированных иммунный ответ сохраняется в течение трех лет. А также применяют вакцину CVD 103-HgR (США), состоящую из ослабленных живых оральных генетически модифицированных штаммов V. сholerae О1. Однократная доза вакцины предоставляет защиту от V. cholerae на высоком уровне (95%). Применяют еще анатоксин + О-Аг (Россия). У взрослых и детей однократная доза вакцины способствует выработке гуморального иммунитета и по эффективности не уступает вакцине WC/rBS.

В первую очередь вакцинацию проводят лицам, вероятность заражения которых наиболее высока. К ним, прежде всего, относятся медицинские работники и все лица, участвовавшие в борьбе с холерой, работники канализационных и очистных сооружений, работники, занятые сбором мусора и его утилизацией, работники прачечных, водного, железнодорожного и воздушного транспорта, пищевой промышленности и предприятий общественного питания.

Химиопрофилактику холеры проводят в тех случаях, когда регистрируют заболевание холерой. Заключается она в назначении тетрациклина в течение 5 дней по 1 г.

Задание 6

А. На щелочной 1% ПВ, щелочном МПА, ТСВS, лактозо-сахарозной среде.

В. Вид идентифицируемого микроорганизма – холерный вибрион.

С. Определяют хемовар, биовар и серовар выделенного возбудителя.

1. Определяют хемовар по изучению биохимических свойств в углеводном ряду, состоящем из маннозы, сахарозы и арабинозы.

2. Изучают способность гемолизировать эритроциты барана и чувствительность к полимиксину.

3. Проверяют фаголизабельность фагами С и Эль-Тор 2.

4. Определяют серовар в реакции агглютинации с типовыми сыворотками Инаба, Огава.

5. Для идентификации используют ряд дополнительных тестов: оксидазный тест, тест окисления ферментации, тест «тяжа», реакцию гемагглютинации куриных эритроцитов, гексаминовый тест.