- •Микробиология, вирусология
- •Содержание
- •Введение
- •Глава 1 кишечная палочка. Возбудители брюшного тифа, сальмонеллезных токсикоинфекций. Микробиологическая диагностика
- •1.1. Кишечная палочка
- •Микробиологическая диагностика эшерихиозов
- •1.2. Брюшной тиф
- •Микробиологическая диагностика брюшного тифа
- •1.3. Сальмонеллезная токсикоинфекция
- •Микробиологическая диагностика пищевой токсикоинфекции сальмонеллезной этиологии
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 2 возбудители бактериальной дизентериИ, холерЫ. Микробиологическая диагностика
- •2.1. Дизентерия
- •Микробиологическая диагностика бактериальной дизентерии
- •2.2. Холера
- •Микробиологическая диагностика холеры
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 3 возбудители бруцеллеза, сибирской язвы. Микробиологическая диагностика
- •3.1. Бруцеллез
- •Микробиологическая диагностика бруцеллеза
- •3.2. Сибирская язва
- •Микробиологическая диагностика сибирской язвы
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 4 возбудители чумы, туляремии. Микробиологическая диагностика
- •4.1. Чума
- •Микробиологическая диагностика чумы
- •4.2. Туляремия
- •Микробиологическая диагностика туляремии
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 5 возбудители туберкулеза, лепры. Микробиологическая диагностика
- •5.1. Туберкулез
- •Микробиологическая диагностика туберкулеза
- •Ускоренные методы
- •5.2. Лепра
- •Микробиологическая диагностика лепры
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 6 патогенные кокки
- •6.1. Стафилококки
- •Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
- •I. Индикация
- •II. Идентификация
- •6.2. Стрептококки
- •I. Индикация
- •Готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют для оценки чистоты выделенной культуры.
- •II. Идентификация
- •6.3. Менингококки
- •Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции
- •6.4. Гонококки
- •Микробиологическая диагностика гонококковой инфекции
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 7 возбудители дифтерии. Микробиологическая диагностика
- •Микробиологическая диагностика дифтерии
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 8 возбудители столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции. Микробиологическая диагностика
- •8.1. Столбняк
- •Микробиологическая диагностика столбняка
- •8.2. Ботулизм
- •Микробиологическая диагностика ботулизма
- •8.3. Газовая анаэробная инфекция
- •Микробиологическая диагностика анаэробной инфекции раны
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 9 возбудители сифилиса, возвратного тифа, лептоспироза. Микробиологическая диагностика Общая характеристика
- •9.1. Сифилис
- •Микробиологическая диагностика сифилиса
- •Невенерические трепаносомозы
- •Фрамбезия
- •9.2. Возвратный тиф
- •Эпидемический возвратный тиф
- •Микробиологическая диагностика возвратного тифа
- •Клещевой возвратный тиф
- •9.3. Лептоспироз
- •Микробиологическая диагностика лептоспироза
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 10 риккетсии. Микробиологическая диагностика риккетсиозов
- •10.1. Эпидемический сыпной тиф
- •Микробиологическая диагностика сыпных тифов
- •10.2. Эндемический сыпной тиф
- •10.3. Пневмотропный риккетсиоз
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 11 общие свойства вирусов. Методы диагностики вирусных инфекций
- •11.1. Общие свойства вирусов
- •11.2. Методы диагностики вирусных инфекций
- •Культуры клеток, используемые для культивирования вирусов
- •Культивирование вирусов в курином эмбрионе
- •Культивирование вирусов на лабораторных животных
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 12
- •Вирусологический метод диагностики вич инфекции
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 13 вирусы, вызывающие острые респираторные вирусные инфекции. Вирусы гриппа. Коронавирусы. Лабораторная диагностика
- •3.1. Вирусы гриппа
- •Строение вируса гриппа
- •Вирусологическая диагностика гриппа
- •13.2. Коронавирусы
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 14 ГерпеСвИрусы. Лабораторная диагностика
- •Вирусологическая диагностика герпетической инфекции
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 15 Вирусные гепатиты. Лабораторная диагностика
- •15.1. Вирусный гепатит а
- •Вирусологическая диагностика вирусных гепатитов а, е
- •Вирусологическая диагностика вирусных гепатитов в, с, d, g, ttv
- •15.2. Вирусный гепатит в
- •15.3. Вирусный гепатит с
- •Задания для самоконтроля
- •Глава 16 Бешенство. Клещевой энцефалит. Лабораторная диагностика
- •16.1. Бешенство
- •Вирусологическая диагностика вируса бешенства
- •16.2. Клещевой энцефалит
- •Вирусологическая диагностика клещевого энцефалита
- •Задания для самоконтроля
- •Заключение
- •Библиографический список
- •Список сокращений
- •Эталоны ответов
- •Глава 1
- •Глава 2
- •Глава 3
- •Глава 4
- •Глава 5
- •Глава 6
- •Глава 7
- •Глава 8
- •Глава 9
- •Глава 10
- •Глава 11
- •Глава 12
- •Глава 13
- •Глава 14
- •Глава 15
- •Глава 16
- •Микробиология, вирусология
- •283003, Г. Донецк, пр. Ильича, 16
Список сокращений
Аг – антиген
АД – артериальное давление
АКДС – комплексная вакцина, содержащая коклюшную вакцину и анатоксины – дифтерийный и столбнячный
АПДС – антитоксическая противодифтерийная сыворотка
Ат – антитело
Вакцина СТИ – санитарно-технический институт
ВГА – вирусный гепатит А
ВГВ – вирусный гепатит В
ВГС – вирусный гепатит С
ВГЧ-3 – вирус герпеса человека 3 / HHV3 (Human Herpes virus 3)
ВГЧ-4 – вирус герпеса человека 4 / HHV4 (Human Herpes virus 4)
ВГЧ-5 – вирус герпеса человека 5 / HHV5 (Human Herpes virus 5)
ВГЧ-6 – вирус герпеса человека 6 / HHV-6 (Human Herpes virus 6)
ВГЧ-7 – вирус герпеса человека 7 / HHV-7 (Human Herpes virus 7)
ВГЧ-8 – вирус герпеса человека 8 / HHV-8 (Human Herpes virus 8)
ВПГ-1 – вирус простого герпеса 1 /HSV-1 (Herpes simplex virus 1)
ВПГ-2 – вирус простого герпеса 2 / HSV-2 (Herpes simplex virus 2)
ВСА – висмут-сульфит агар
ВЭБ – вирус Эпштейна-Барр
ГЧЗТ – гиперчувствительность замедленного типа
ДАДДС – 4-4-диацетил-диамино-дифенил-сульфон
ДДС – 4-4-диамино-диафенилсульфон
ЖКТ – желудочно-кишечный тракт
ЖСА – желточно-солевой агар
ИВЛ – ингаляционная вентиляция легких
ИФА – иммуноферментный анализ
КА – кровяной агар
К-антиген – капсульный антиген
КК – культура клеток
КЭ – куриный эмбрион
МЕ – международные единицы
МПА – мясо-пептонный агар
МПБ – мясо-пептонный бульон
Н-антиген – жгутиковый антиген
НС – нервная система
О-антиген – соматический антиген
ОВГВ – острый вирусный гепатит В
ОРВИ – острые респираторные вирусные инфекции
ПВ – пептонная вода
ПЦР – полимеразная цепная реакция
РА – реакция агглютинации
РГА – реакция гемагглютинации
РГадс – реакция гемадсорбции
РИА – радиоиммунный анализ
РИФ – реакция иммунофлюоресценции
РН – реакция нейтрализации
РНИФ – реакция непрямой иммунофлюоресценции
РОПГА – реакция обратной пассивной гемагглютинации
РП – реакция преципитации
РПГА – реакция пассивной гемагглютинации
РСК – реакция связывания комплемента
РТГА – реакция торможения гемагглютинации
РТГадс – реакция торможения гемадсорбции
СБ – сахарный бульон
ССС – сердечно-сосудистая система
ФНО – фактор некроза опухоли
ХАО – хорионалантоисная оболочка
цАМФ – циклический гуанидинмонофосфат
цГМФ – циклический аденозинмонофосфат
ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы
ЦМВ – цитомегаловирус
ЦНС – центральная нервная система
ЦП – цветная проба
ЦПД – цитопатическое действие
ЭБВ – Эпштейна-Барр вирус
ЭГКП – энтерогеморрагическая кишечная палочка
ЭИКП – энтероинвазивная кишечная палочка
ЭПКП – энтеропатогенная кишечная палочка
ЭТКП – энтеротоксигенная кишечная палочка
CMV – Human cytomegalovirus
EBV – Epstein-Bar virus
Ig – иммуноглобулин
TCBS – тиосульфат-цитрат-бромтимол сахарозный
TTSST-1 – токсин синдрома токсического шока
Vi-антиген – вирулентный антиген
VZV – Varicella-zoster virus
Эталоны ответов
Глава 1
Задание 1
A. Испражнения или рвотные массы высевают на среды – Эндо, Плоскирева, Левина. Инкубируют в термостате 18–24 часа при температуре 37ºС.
Изучают культуральные свойства выросших микроорганизмов, готовят мазки, окрашивают по Граму. При обнаружении выпуклых колоний с правильными очертаниями: красного с «металлическим блеском» или розового цвета – (на Эндо), розовых – (на Плоскирева), фиолетовых – (на Левина) отбирают 10 лактозоположительных колоний и агглютинируют их на стекле смесью ОК-сывороток патогенных серогрупп. Отрицательная РА свидетельствует об отсутствии энтеропатогенных эшерихий. При положительном результате РА оставшуюся часть колонии пересевают на среду Олькеницкого.
Ферментацию глюкозы и лактозы на среде Олькеницкого с образованием кислоты и газа выявляют по изменению цвета среды и нарушению ее целостности. Образование черного кольца на границе столбика и скошенной поверхности свидетельствует о выделении эшерихиями сероводорода.
Идентифицируют выделенную чистую культуру по биохимическим свойствам (посев в пестрый ряд).
Определяют серовар у выделенной культуры с использованием агглютинирующих поливалентных и типовых ОК-коли сывороток в РА на стекле и в пробирках с гретой и живой культурой.
B. Энтеропатогенные кишечные палочки, которые вызывают у детей острую кишечную инфекцию – колиэнтерит.
Задание 2
A. Необходимо исследовать не менее 10 колоний.
Для исследования отбирают колонии, как с металлическим блеском, так и бледно-розовые.
В реакции агглютинации с помощью поливалентных ОК-сывороток вначале агглютинируют колонии одной группы, затем то же число второй и т.д. Это делается для обнаружения нескольких типов эшерихий, присутствие которых возможно у одного больного. На скошенный агар пересевают только те колонии, которые дают четко выраженную и быструю агглютинацию.
Выделенные чистые культуры микроскопируют, изучают подвижность, засевают в короткий пестрый ряд Гисса и агглютинируют типовыми ОК-сыворотками по инструкции, написанной на этикетке для каждой серии.
Штаммы, агглютинировавшиеся какой-либо типовой ОК-сывороткой на стекле, испытывают в линейной реакции агглютинации в двух рядах пробирок. Сыворотку с О- и К-антителами разводят до титра, указанного на этикетке ампулы.
В качестве антигена в один ряд пробирок вносят взвесь живых бактерий (чистую культуру смывают физиологическим раствором со скошенного агара), в другой ряд пробирок вносят гретые бактерии (часто той же взвеси бактерий, прогретых на водяной бане при 100ºС один час).
Результаты линейной РА учитывают после 20 часов инкубации при температуре 37ºС.
Оценку результатов проводят: невооруженным глазом – с живыми бактериями, учитывая крупнохлопчатый результат (определение К‑антигена); в агглютиноскопе – с гретыми бактериями, учитывая мелкозернистый результат (определение О-антигена).
B. Грамотрицательные, средних размеров, в мазках располагаются хаотично, одиночно. На плотных средах образуют колонии круглой формы, сочные, блестящие, плосковыпуклые, средних размеров. На дифференциальных средах (Эндо, Левина и др.) окрашиваются в цвет красителя более или менее интенсивно. Ферментируют с образованием кислоты глюкозу, лактозу, маннит, некоторые штаммы могут ферментировать лактозу в более поздние сроки. В отношении других углеводов эшерихии ведут себя различно, образуя множество биохимических вариантов. Энтеропатогенные эшерихии дают положительную агглютинацию с поливалентными ОК-сыворотками и с типовой сывороткой, соответствующей серовару.
Задание 3
A. Бактериологический – исследование гемокультуры.
B. На первой неделе заболевания, 10 мл крови; возможно на второй и третьей, но количество крови должно быть увеличено до 20–30 мл.
С. Увеличение количества бактерий, попавших вместе в среду Раппопорт.
D. 10% желчный бульон, среды Плоскирева, Левина, ВСА.
Задание 4
A. Серологический метод диагностики. Реакция агглютинации Видаля поставлена с сывороткой крови больного, полученной из образца крови без консерванта.
B. Из сыворотки больного в пробирках с физраствором готовят серийные разведения, начиная с 1:50 до 1:1600.
Реакцию проводят в нескольких рядах пробирках, т.к. используют различные диагностикумы: О- и ОН-диагностикумы брюшного тифа; О- и ОН-диагностикумы паратифов А и В.
После приготовления разведенной сыворотки в каждый ряд вносят по 2 капли соответствующего диагностикума.
Пробирки с реакцией встряхивают, помещают в термостат на 2 часа при температуре 37С, затем оставляют при комнатной температуре.
Учитывают реакции агглютинации через 18–20 часов.
С. Можно, так как титр О-антител к сальмонелам тифа равен диагностическому 1:200, однако, учитывая, что в некоторых случаях О‑антител можно обнаружить у привитых, необходимо изучать реакцию Видаля в динамике для выявления нарастания ее титра.
Задание 5
A. Это могут быть сальмонеллы.
B. Мелкие, бесцветные, с гладкими краями полупрозрачные колонии в количестве не менее 5 колоний пересевают на среду Олькеницкого (штрихами по скошенной поверхности, а затем колом вглубь столбика). Пробирки с посевами помещают в термостат до следующего дня при температуре 37С.
Идентифицируют культуры, выросшие на среде Олькеницого.
Учитывают изменение цвета в нижней части столбика (ферметантация глюкозы с выделением газа).
Микробы, не ферментирующие лактозу и не расщепляющие мочевину, подвергают дальнейшему изучению.
Подозрительные культуры пересевают в короткий ряд Гисса, изучают образование сероводорода и подвижность.
Серодогическая идентификация выделенных культур и реакция агглютинации вначале с поливалентной сальмонеллезной из коротких групп А, В, С, Д, Е, а затем набором монорецепторных О- и Н‑агглютинирующих сальмонеллезных сывороток.
