Микробиологическая диагностика ботулизма

Выявление ботулотоксина и определение его типа крайне важно для назначения специфической терапии. Для этого используют несколько способов.

Биологический метод на мышах

Отбирают партию из 6 животных.

Одного животного заражают только исследуемым материалом, а каждое из остальных животных – смесью материала, смешанного с 200 МЕ антитоксической сыворотки соответствующего типа – А, В, С, Е, F, и выдержанной 40 минут при комнатной температуре для нейтрализации токсина. Заболевание характеризуется появлением учащенного дыхания, расслаблением мышц брюшной стенки («осиная талия»), судорогами, параличом, смертью животного. Если в материале есть токсин, погибают все мыши, кроме той, у которой произошла нейтрализация токсина антитоксической сывороткой соответствующего типа.

Экспресс-метод

Реакция обратной пассивной гемагглютинации – эритроциты сенсибилизируются специфическими антителами соответствующих типов, при наличии в исследуемом материале антигена, происходит гемагглютинация. Диагностический титр 1:10. Для обнаружения и идентификации токсина также применяют ИФА.

Иммунологический

Определение фагоцитарного показателя – количества стафилококков, поглощенных в среднем одним лейкоцитом (ботулотоксин способен подавлять активность фагоцитов, которая восстанавливается в присутствии соответствующей антитоксической сыворотки).

Принципы лечения

Раннее применение антитоксических сывороток всех типов, а после определения типа токсина – моновалентной сыворотки (вводят по Безредке). Также применяют анатоксины – сначала всех типов (A, B, E), далее – гомологичный. Назначают слабительные, антибиотики (левомицетин). Иногда нужна респираторная поддержка – ингаляционная вентиляция легких (ИВЛ).

Принципы профилактики

Неспецифическая – соблюдение правил консервирования продуктов, термическая обработка домашних консервов, утилизация вздутых банок. Лицам, которые употребляли пищу, вызывавшую отравление, но не заболели, – вводят сначала поливалентную, затем гомологичную антисыворотку.

Специфическая – трианатоксин (анатоксины типов A, B, E), а также тетранатоксин, пентаанатоксин, секстаанатоксин (анатоксины типов A, B, E в сочетании со столбнячным и/или гангренозными анатоксинами).

8.3. Газовая анаэробная инфекция

Газовая гангрена (от греч. gangraina, разъедающая язва) – тяжелая полимикробная раневая инфекция, характеризующаяся крепитацией тканей из-за пузырьков газа (продукта ферментативного действия клостридий), интоксикацией, некрозом тканей, их распадом, и общими септическими проявлениями.

История открытия и изучения газовой анаэробной инфекции

В 1562 г. Амбруаз Паре впервые описал анаэробную инфекцию. В 1839 г. подобное заболевание описал и А. Вельпо, назвав его «травматической экземой». Н.И. Пирогов в 1848 г. подробно описал ее клиническую картину, отметил связь с войной. Другие названия болезни – антонов огонь, голубая (бронзовая) рожа. В 1877 г. Л. Пастер и Ж. Жубер открыли Cl. septicum; в 1892 г. М. Уэлч и Дж. Наттолл – Cl. perfringens (в 1899 г. О. Лиденталь доказал ее роль в развитии газовой гангрены); в 1892 г. Ф. Нови – Cl. novyi; в 1908 г. И.И. Мечников – Cl. sporogenes; в 1915–1916 г. М. Вейнберг и П. Сэген – Cl. histolyticum и Cl. fallax; в 1922 г. А. Сорделли – Cl. sordellii; в 1935 г. И. Холл и Э. О’Тул – Cl. difficile.

Этиология

Это полимикробная инфекция. Основные возбудители: Cl. perfringens (70–80% случаев), Cl. novyi (C. oedematiens) – 20–30% случаев, Cl. septicum (10–15% случаев) и C. histolyticum (5–10% случаев) и др., однако нередко это ассоциации клостридий как друг с другом, так и с аэробными гноеродными кокками, неспорообразующими анаэробами (бактероиды, вейлонеллы). Вегетативные клетки – крупные грамположительные прямые палочки с обрубленными или закругленными (Cl. histolyticum) концами; подвижны. Штаммы отличаются по толщине (0,4–2,0 мкм) и длине (4,0–15,0 мкм). Располагаются парами или цепочками (рис. 8.3 А). Cl. septicum – тонкая длинная палочка, образует нити. У Cl. perfringens имеется капсула (рис. 8.3 Б) и отсутствуют жгутики.

А

Б

Рис. 8.3. Мазок из чистой культуры C. Perfringens: А – окраска по Граму; Б – окраска по Бурри‑Гинсу (вокруг красных палочек видна бесцветная капсула на фоне туши)

(источник заимствования – ресурсы сети Интернет)

Эпидемиология

Сапроноз. Cl. perfringens – нормальный обитатель кишечника человека и животных, в почву попадает с испражнениями. Механизм передачи – контактный, путь – раневой (загрязнение раны землей либо через контаминированный перевязочный материал, медицинские инструменты, руки).

В зоне риска лица, участвующие в боевых действиях. Болезнь актуальна для военного времени, катастроф, стихийных бедствий, техногенных аварий, взрывов (длительное нахождение под завалами, сдавление). Опасны травмы на производстве, ожоги, обморожения.

Патогенез

Возбудители – некропаразиты. Предрасполагающие факторы – раздробление костей, тканевая гипоксия, омертвение, гематомы, обширные или глубокие колотые раны с образованием «слепых карманов» (свищей), плохо снабжаемых кислородом, осколочные ранения, загрязненная одежда, шок, голодание, стресс. В этих условиях споры прорастают и выделяют экзотоксины и ферменты. Особенно активно повреждаются мышцы (содержат гликоген, являющийся хорошей питательной средой). Нет явного воспаления. В тканях развивается отек, газообразование, сдавливание тканей, закупорка мелких сосудов, ишемия, а затем и некроз, что способствует дальнейшему продвижению анаэробов по тканям. Гангрена сопровождается сильной общей интоксикацией (отравление токсинами бактерий и продуктами разложения собственных тканей), гемолизом, повреждением паренхиматозных органов.

Клиника

Инкубационный период – 1–5 дней (молниеносные формы – 1–2 часа, летальный исход через 1–2 суток). В области раны появляется сильная боль с холодным безболезненным отеком. В зоне отека на коже появляются сине-багровые и зеленые пятна. Через несколько часов к отеку присоединяется крепитация вследствие газообразования. Отделяемое раны пенистое, с неприятным гнилостным запахом. Мышцы преобретают вид вареного мяса, в дальнейшем становятся черно-бурыми. Общее состояние больных тяжелое. После выздоровления иммунитет не формируется.

Специфическая диагностика (Схема 19)

Материал для исследования – кусочки пораженной и некротизированной ткани, жидкость отеков, кровь.

Микробиологическую диагностику анаэробной раневой инфекции проводят микроскопическим, бактериологическим, биологическим методами.

Схема 19