Микробиологическая диагностика холеры
Этапы бактериологического метода:
Посев кала, иного материала засевают на 1% щелочную ПВ у постели больного или непосредственно на месте отбора пробы. Доставку материала в специализированную лабораторию осуществляет медицинский персонал, соблюдая все меры безопасност
Через 6 часов после инкубации оценивают рост микроорганизмов. Для возбудителя холеры характерно образование нежной, быстроразрушающейся пленки с голубоватым или серым оттенком. Содержимое пленки микроскопируют в препарате «висячая» или «раздавленная» капля, либо в мазке, окрашенном по Граму. При обнаружении грамотрицательных, слегка изогнутых, тонких подвижных палочек, ставят реакцию агглютинации на стекле с О-холерной сывороткой. Как при положительном, так и при отрицательном результате содержимое пленки пересевают на вторую 1% щелочную ПВ и на щелочной МПА или для подавления роста сопутствующей флоры на селективную среду Монсура, среду тиосульфат-цитрат-бромтимол сахарозную (TCBS). На фоне голубовато-серого цвета этой среды образуются колонии холерных вибрионов с желтым оттенком. Исследование посева на второй 1% щелочной ПВ проводят так же, как и на начальном этапе.
При повторном выявлении морфологических признаков холерного вибриона, агглютинирующегося с О-холерной сывороткой, дают предварительное заключение об обнаружении возбудителя холеры, и обязательно продолжают исследования.
Со второй щелочной ПВ еще раз делают пересев на щелочной МПА, среду Монсура, среду TCBS. Выросшие за 12 часов мелкие, гладкие, стекловидно-прозрачные колонии с едва заметным голубоватым оттенком пересевают для накопления чистой культуры на лактозо-сахарозную среду (37°С, 12 часов). Кроме культур, выращенных на элективных средах, ставят пробу на оксидазу (нижняя часть «столбика» без наличия пузырьков газа). При изучении сахаролитических свойств возбудитель холеры ферментирует сахарозу, маннозу, а арабинозу – нет.
Окончательное типирование проводят с помощью диагностических агглютинирующих сывороток О, OR, Инаба, Огава и бактериофагов, после чего дают ответ об обнаружении биовара холерного вибриона.
Серологический
Данный метод имеет вспомогательный характер. В сыворотке крови больного обнаруживают специфические антитела в РА, РПГА, ИФА, РИФ (непрямая). Токсиннейтрализующие антитела появляются на 5–6-й день болезни и достигают максимума на 14–21-е сутки. Диагностическим титром в РПГА считается разведение 1:160.
Принципы лечения
Обязательная госпитализация, выполнение рекомендаций ВОЗ.
Первичная регидратация и восстановление нормального водно-солевого обмена введением жидкости в 2–3 вены – раствор Филипса 1 или раствор трисоль.
При улучшении самочувствия, повышении АД и восстановлении диуреза – раствор Филипса 2 или раствор дисоль.
Рациональная антибиотикотерапия (например, тетрациклин).
Принципы профилактики
Специфическая профилактика
Специфическая профилактика предполагает вакцинацию по эпидемиологическим показаниям.
Вакцина WC/rBS состоит из убитых целых клеток V. сholerae О1 с очищенной рекомбинантной В‑субъединицей холерного анатоксина (WC/rBS, Швеция). Вакцину WC/rBS применяют для вакцинации детей старше 5 лет. После двухкратной вакцинации у 70% вакцинированных иммунный ответ сохраняется в течениие трех лет.
Модифицированная вакцина WC состоит только из инактивированных холерных вибрионов и не содержит В-субъединицы холерного анатоксина (WC, Швеция). Вакцину готовят на основе вирулентных штаммов холерного вибриона классического биотипа или биотипа Эль‑Тор сероваров Инаба и Огава. Применяют две дозы с недельным интервалом.
Вакцина CVD 103-HgR состоит из ослабленных живых оральных генетически модифицированных штаммов V. сholerae О1 (CVD 103‑HgR, США). Однократная доза вакцины предоставляет защиту от V. cholerae на высоком уровне (95%).
Анатоксин + О-Аг (Россия). У взрослых и детей однократная доза вакцины способствует выработке гуморального иммунитета и по эффективности не уступает вакцине WC/rBS.
Неспецифическая профилактика
Проведение противоэпидемических мероприятий в очаге инфекции.
Соблюдение строгого санитарно-гигиенического режима на пищевых предприятиях.
Контроль систем водоснабжения и канализации.
Соблюдение личной гигиены, санитарно-просветительная работа среди населения.