3 курс / Фармакология / Диссертация_Ромодановский_Д_П_Разработка_требований_для_оценки_фармакокинетики

период отмывки – 7 суток.

4. При выборе точек забора образцов крови для фармакокинетического анализа следует учитывать общую длительность 24 ч, и более частый отбор образцов крови в диапазоне времени достижения Cmax (1,3–2,4 ч). Можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови:

0, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.25, 1.5, 1.75, 2, 2.25, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 6, 7, 8, 10, 12, 16, 24ч.

5. Определять в плазме крови симвастатин и его метаболит рекомендуется аналитическим методом на основе ВЭЖХ с масс-спектрометрической детекцией или тандемной масс-

спектрометрической детекцией. При этом метод должен позволять достичь адекватного НПКО,

например, 0,1–0,5 нг/мл.

6. Выбор дозировки для исследований биоэквивалентности: возможно изучение биоэквивалентности только одной дозировки изучаемого препарата, при условии идентичности технологии, места производства и пропорциональности составов между всеми дозировками, а

также сопоставимости профилей растворения. Рекомендуется проведение исследования для максимально заявленной дозировки препарата, например, 20 или 40 мг.

7. Оценка биоэквивалентности. В исследовании со стандартным дизайном необходимо,

что бы 90 % доверительные интервалы для отношений средних геометрических значений параметров Cmax и AUC0-t исследуемого и референтного препарата были в диапазоне 80,00-

125,00%. Возможно использовать репликативный дизайн исследования с расширением границ признания биоэквивалентности для параметра Cmax, т.к. симвастатин можно отнести к препаратам с высокой внутрииндивидуальной вариабельностью.

Такролимус: капсулы 0.5, 1, 5 мг.

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию исследований биоэквивалентности:

1.В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности такролимуса, в

зависимости от ЛФ и дозировки следует использовать препараты Програф®, который является референтным согласно Государственному реестру лекарственных средств.

2.Количество субъектов для исследования биоэквивалентности такролимуса (в границах

80,00-125,00%) в исследовании со стандартным дизайном и предполагаемой точечной оценкой 0,95, ошибкой I рода 5%, ошибкой II рода 20%, при CVintra ≈ 26% (Cmax) должно быть не менее 30. Для параметра AUC (CVintra ≈ 26%) границы БЭ должны быть сужены до 90,00-111,11%, в связи с этим при предполагаемой точечной оценке 1,00, ошибке I рода 5%, ошибке II рода 20% размер выборки должен составлять 104 субъектов. Изменение предполагаемой точеной оценки приведет к многократному увеличению размера выборки. В случае репликативного дизайна и подхода

RSABE к оценке биоэквивалентности, размер выборки, при описанных выше условиях, составит

14-18 субъектов. Таким образом, подход RSABE для препаратов такролимуса является

421

предпочтительным. В исследования следует включать субъектов обоего пола в равном

соотношении.

3.С учетом периода полувыведения такролимуса до 43 часов у здоровых добровольцев можно рекомендовать длительность забора образцов крови усеченную до 72 ч (однако стоит иметь ввиду, что в ряде исследований по истечении 72 часов остаются концентрации такролимуса превышающие НПКО), достаточный период отмывки – 14 суток.

4.При выборе точек забора образцов крови для фармакокинетического анализа следует учитывать общую длительность 72 ч, и более частый отбор образцов крови в диапазоне времени достижения Cmax такролимуса (0,5-4 ч). Можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови: 0; 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5; 3; 3,5; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 12; 16; 24; 36; 48; 72 ч.

5. Рекомендуется использовать аналитический метод на основе ВЭЖХ с тандемной масс-

спектрометрической детекцией. При этом метод должен позволять достичь адекватного НПКО -

менее 1 нг/мл.

6. Выбор дозировки для исследований биоэквивалентности: возможно изучение биоэквивалентности только одной дозировки изучаемого препарата (например, максимальной в линейке), при условии идентичности технологии, места производства и пропорциональности составов между всеми дозировками, а также сопоставимости профилей растворения. Для дополнительных дозировок необходим тест сравнительной кинетики растворения в сравнении с

«биосерией» препарата.

7. Оценка биоэквивалентности. Препараты такролимуса относятся к препаратам с узким терапевтическим диапазоном, поэтому в исследованиях биоэквивалентности со стандартным дизайном рекомендуется, что бы 90 % доверительные интервалы для отношений средних геометрических значений параметров Cmax исследуемого и референтного препарата были в диапазоне 80,00-125,00, для AUC0-t (AUC0-∞) - в диапазоне 90,00-111,11%. При использовании повторного дизайна исследования возможно масштабирование границ признания биоэквивалентности для параметров Cmax и AUC согласно подходу RSABE. Что позволит значительно снизить размер выборки в исследовании и сравнить внутрииндивидуальную вариабельность обоих препаратов.

Телмисартан: таблетки 40, 80 мг.

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию исследований биоэквивалентности:

1.В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности телмисартана рекомендуется использовать препарат Микардис®, который является референтным согласно Государственному реестру лекарственных средств.

2.Планировать размер выборки в исследование следует с учетом повторного дизайна

422

исследования и возможностью масштабирования границ для параметра Cmax. При расчете следует ориентироваться на верхнюю границу доверительного интервала усредненных значений коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности около 45%. Например, в исследование с полным повторным дизайном достаточно будет включения 20 субъектов (предполагаемая точечная оценка 0,95, ошибка I рода 5%, ошибка II рода 20%, CVintra ≈ 45%). В исследования следует включать субъектов обоего пола в равном соотношении, т.к. для телмисартана показаны гендерные различия в фармакокинетике, которые могут оказать влияние на результаты исследований биоэквивалентности.

3. Длительность забора образцов крови должна быть не менее 72 ч, рекомендованный период отмывки – 7 суток. Можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови - 0,

0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.25, 1.5, 1.75, 2, 2.5, 3, 4, 5, 6, 8, 12, 24, 36, 48, 72 ч.

4.Определять в плазме крови телмисартан рекомендуется аналитическим методом ВЭЖХ МС/МС. При этом метод должен позволять достичь адекватного НПКО, например, 0,5–3 нг/мл.

5.Выбор дозировки для исследований биоэквивалентности: возможно изучение биоэквивалентности только одной дозировки изучаемого препарата, при условии идентичности технологии, места производства и пропорциональности составов между всеми дозировками, а

также сопоставимости профилей растворения. Рекомендуется проведение исследования для максимально заявленной дозировки препарата 80 мг. При этом в протоколе следует учесть возможность развития ортостатических реакций на фоне снижения артериального давления. Для дополнительных дозировок необходим тест сравнительной кинетики растворения в сравнении с

«биосерией» препарата.

6. Оценку результатов исследования следует проводить с учетом повторного дизайна исследования и масштабированием границ биоэквивалентности для параметра Cmax, согласно вышеуказанным руководствам [10, 35]. Границей признания биоэквивалентности для параметра

AUC0-t должна оставаться 80,00-125,00%, как и отношение геометрических средних для обоих параметров.

Урсодезоксихолиевая кислота: таблетки, покрытые пленочной оболочкой 500 мг;

капсулы 250 мг; суспензия для приема внутрь 250 мг/5 мл.

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию

исследований биоэквивалентности:

1.В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности урсодезоксихолиевой кислоты (УДХК) рекомендуется использовать препарат Урсофальк®, в

соответствующей лекарственной форме, который является референтным согласно Государственному реестру лекарственных средств.

2.Согласно анализу 13 исследований биоэквивалентности CVintra наиболее вариабельного

423

параметра Cmax составило более 30%. С целью решения проблемы возможной высокой внутрииндивидуальной вариабельности, можно рекомендовать проведение исследования с повторным дизайном и возможностью масштабирования границ биоэквивалентности исходя из оценки вариабельности референтного препарата. Так при CVintra ≈ 30-40% достаточно будет включения 18-20 субъектов (предполагаемая точечная оценка 0,95, ошибка I рода 5%, ошибка II

рода 20%). В исследования рекомендуется включать субъектов обоего пола в равном соотношении, для оценки возможный гендерных различий в фармакокинетике исследуемого и референтного препаратов.

3.УДХК обладает длительным периодом полувыведения – 3,5-5,8 дней. По данным литературы, уровень УДХК возвращается к эндогенному к 12-20 ч. По данным анализа концентрация УДХК снижалась к эндогенному уровню спустя 72 часа, однако в некоторых исследованиях требовалось большее количество времени. С учетом длительного периода полувыведения достаточная длительность забора образцов крови для определения УДХК можно считать - 72 ч. Рекомендованный период отмывки с учетом анализа исследований биоэквивалентности УДХК – 14 суток, т.к. за данный период во всех рассмотренных исследованиях концентрация УДХК снижалась к эндогенному уровню или значениям ниже НПКО.

4.С учетом наличия эндогенных концентраций следует запланировать период отбора крови до приема исследуемых препаратов по меньшей мере за 24 часа (например, 6 точек отбора:

-24; -18; -12; -6; 0). С учетом длительности забора крови 72 часа, необходимо запланировать более частый отбор образцов крови в диапазоне времени достижения Cmax УДХК (1,5-2,5 ч) после приема исследуемых препаратов - 0,333; 0,667; 1; 1,333; 1,5; 1,667; 2; 2,333; 2,5; 2,667; 3 ч и достаточное количество точек для оценки экспозиции УДХК нисходящего участка кривой

«концентрация-время», например, 4; 6; 12; 18; 24; 48; 72 ч. Таким образом, можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови: -24; -18; -12; -6; 0; 0,333; 0,667; 1; 1,333; 1,5; 1,667; 2; 2,333; 2,5; 2,667; 3; 4; 6; 12; 18; 24; 48; 72 ч.

5. Определять в плазме крови следует свободную («неконъюгированную») и общую

(«конъюгированную») УДХК. Рекомендуется использовать аналитический метод на основе ВЭЖХ с масс-спектрометрической детекцией или тандемной масс-спектрометрической детекцией. При этом метод должен позволять достичь адекватного НПКО, например, в диапазоне

20-100 нг/мл.

6. Выбор дозировки для исследований биоэквивалентности: для таблеток, покрытых пленочной оболочкой 500 мг и суспензии для приема внутрь 250 мг/5мл - следует изучить дозировку 500 мг; для капсул 250 мг возможно изучение биоэквивалентности в дозировке 250 мг или в дозировке 500 мг (прием 2 капсул 250 мг).

424

7. Оценка биоэквивалентности проводится по свободной («неконъюгированной») и общей

(«конъюгированной») УДХК без поправки на эндогенную концентрацию и после поправки на эндогенную концентрацию. В исследовании со стандартным дизайном необходимо, что бы 90 %

доверительные интервалы для отношений средних геометрических значений параметров Cmax и

AUC0-72 исследуемого и референтного препарата были в диапазоне 80,00-125,00%. При использовании повторного дизайна исследования возможно масштабирование границ признания биоэквивалентности для параметра Cmax, согласно правилам описанным в Национальном стандарте ГОСТ Р 57679–2017 «Исследования биоэквивалентности лекарственных препаратов» и Правилам проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза [10, 35].

Фолиевая кислота: таблетки 1 мг; таблетки 5 мг.

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию исследований биоэквивалентности:

1.В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности фолиевой кислоты рекомендуется использовать зарегистрированный в России препарат фолиевой кислоты

ваналогичной лекарственной форме и максимально близкий по составу вспомогательных веществ, т.к. согласно Государственному реестру лекарственных средств для препаратов фолиевой кислоты референтный препарат не установлен.

2.Согласно анализу исследований биоэквивалентности фолиевой кислоты наиболее вариабельный параметр AUC - CVintra около 13%. Соответственно, количество субъектов для исследования биоэквивалентности фолиевой кислоты в исследовании со стандартным дизайном и предполагаемой точечной оценкой 0,95, ошибкой I рода 5%, ошибкой II рода 20%, должно быть не менее 10. С учетом возможного выбывания из исследования и минимального требования по количеству субъектов в исследования биоэквивалентности можно рекомендовать включение 12-

18 субъектов. В исследования рекомендуется включать субъектов обоего пола в равном соотношении, для оценки возможных гендерных различий в фармакокинетике исследуемого и референтного препаратов.

3. Данные о периоде полувыведения фолиевой кислоты после приема таблеток 1 и 5 мг отсутствуют. Согласно данным литературы концентрации фолиевой кислоты, возвращаются к эндогенному уровню через 24 часа после приема в дозировке 1 мг [305]. Таким образом, можно предположить, что приемлемая длительность забора образцов крови для определения фолиевой кислоты составляет 24 часа и AUC0-24 будет > 80% AUC0-∞. С учетом приведенных данных – период отмывки должен быть не более 7 дней. При должном обосновании период отмывки может быть сокращен.

4. При выборе точек забора образцов крови для фармакокинетического анализа фолиевой

425

кислоты следует учитывать наличие эндогенной концентрации. По данным анализа и данным литературы, эндогенные концентрации фолиевой кислоты составляли 8-18 нг/мл и не претерпевали существенных суточных колебаний. Поэтому целесообразно определять среднюю эндогенную концентрацию перед каждым периодом дозирования. Для подтверждения отсутствия суточных колебаний и стабильности эндогенного уровня можно рекомендовать определение эндогенного уровня за 24, 18, 12, 8 ч и непосредственно перед приемом исследуемых препаратов (точка «0»). При должном обосновании период определения эндогенной концентрации фолиевой кислоты может сокращен. Среднюю эндогенную концентрацию следует вычитать из концентраций для каждой временной точки после приема исследуемых препаратов. Если после коррекции возникает отрицательное значение концентрации в плазме, его следует установить равным 0 до расчета скорректированной AUC0-24.

Для описания кривой «концентрация время» в районе восходящей части кривой и времени достижения Cmax 30-60 минут после приема исследуемых препаратов можно рекомендовать следующие временные точки: 0,333; 0,5; 0,667; 0,833; 1; 1,333; 1,5; 1,667; 2 ч; для описания нисходящей части кривой – 2,5; 3; 4; 6; 9; 12; 24 ч. Таким образом, можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови:

-определение эндогенной концентрации: - 24, -18, -12, -8; 0 ч.

-определение концентрации левокарнитина после приема исследуемых препаратов -

0,333; 0,5; 0,667; 0,833; 1; 1,333; 1,5; 1,667; 2; 2,5; 3; 4; 6; 9; 12; 24 ч.

5. Для определения фолиевой кислоты рекомендуется использовать максимально чувствительный метод определения, например, аналитические методы на основе ВЭЖХ с масс-

спектрометрической детекцией или тандемной масс-спектрометрической детекцией. По данным одного исследования, после приема 1 мг фолиевой кислоты наблюдались максимальные концентрации на уровне 85 нг/мл, согласно данным зарубежных исследований после приема 5

мг максимальные концентрации были на уровне 240 нг/мл, и 700 нг/мл – после приема 15 мг фолиевой кислоты [305, 311]. Поэтому аналитический метод должен позволять достичь адекватного НПКО, например не менее 4,25 нг/мл (5% от 85 нг/мл) в исследовании дозировки 1

мг, или 12 нг/мл - в исследовании дозировки 5 мг.

6.Выбор дозы для исследований биоэквивалентности: следует выбрать дозу для изучения

висследовании биоэквивалентности достаточную для адекватного количественного определения с учетом используемого аналитического метода. В случае регистрации нескольких дозировок возможно изучение биоэквивалентности только одной дозировки изучаемого препарата, при условии идентичности технологии, места производства и пропорциональности составов между всеми дозировками, а также сопоставимости профилей растворения. Для дополнительных дозировок необходим тест сравнительной кинетики растворения в сравнении с «биосерией»

426

препарата.

7. Оценка биоэквивалентности. В исследовании со стандартным дизайном необходимо,

что бы 90 % доверительные интервалы для отношений средних геометрических значений параметров Cmax и AUC0-24 исследуемого и референтного препарата были в диапазоне 80,00125,00%.

Примечание: с учетом наличия эндогенных концентраций рекомендуется предусмотреть следующие ограничения:

• перед исследованием и во время его проведения рекомендуется соблюдать ограничение в потреблении продуктов, содержащих фолиевую кислоту: листовая зелень (шпинат, салат, укроп, петрушка), мука грубого помола, печень, почки, мясо,

яйца, молочные продукты.

•пища должна быть строго стандартизована на всем протяжении исследования.

Циклоспорин, капсулы мягкие 10, 25, 50, 100 мг.

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию

исследований биоэквивалентности:

1.В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности циклоспорина следует использовать препарат Сандиммун® Неорал®, который является референтным согласно Государственному реестру лекарственных средств.

2.Количество субъектов для исследования биоэквивалентности циклоспорина (границы биоэквивалентности 90,00-111,11%) в исследовании со стандартным дизайном и предполагаемой точечной оценкой 1,00, ошибкой I рода 5%, ошибкой II рода 20%, при CVintra ≈ 12% должно быть не менее 46. При применении репликативного дизайна и подхода RSABE при описанных выше условиях размер выборки составит 14 субъектов. В исследования следует включать субъектов обоего пола в равном соотношении, т.к. для циклоспорина показаны гендерные различия в фармакокинетике.

3.С учетом периода полувыведения циклоспорина до 6,3 часов у здоровых добровольцев можно рекомендовать длительность забора образцов крови 48 ч (однако стоит иметь ввиду, что

вряде исследований по истечении 48 часов остаются концентрации циклоспорина превышающие НПКО), достаточный период отмывки – 7 суток.

4.При выборе точек забора образцов крови для фармакокинетического анализа следует учитывать общую длительность 48 ч, и более частый отбор образцов крови в диапазоне времени достижения Cmax циклоспорина (1-2 ч). Можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови: 0; 0,333; 0,667; 1; 1,25; 1,5; 1,75; 2; 2,5; 3; 3,5; 4; 6; 8; 12; 16; 24; 36; 48 ч.

5. Рекомендуется использовать аналитический метод на основе ВЭЖХ с масс-

спектрометрической детекцией или тандемной масс-спектрометрической детекцией. При этом

427

метод должен позволять достичь адекватного НПКО, например, 5 нг/мл и менее.

6. Выбор дозировки для исследований биоэквивалентности: возможно изучение биоэквивалентности только одной дозировки изучаемого препарата (например, максимальной в линейке), при условии идентичности технологии, места производства и пропорциональности составов между всеми дозировками, а также сопоставимости профилей растворения. Для дополнительных дозировок необходим тест сравнительной кинетики растворения в сравнении с

«биосерией» препарата.

7. Оценка биоэквивалентности. Препараты циклоспорина относятся к препаратам с узким терапевтическим диапазоном, поэтому в исследованиях биоэквивалентности со стандартным дизайном рекомендуется, что бы 90 % доверительные интервалы для отношений средних геометрических значений параметров Cmax и AUC0-t (AUC0-∞) исследуемого и референтного препарата были в диапазоне 90,00-111,11%. При использовании повторного дизайна исследования возможно масштабирование границ признания биоэквивалентности для параметров Cmax и AUC согласно подходу RSABE.

Эверолимус

Рекомендации к проведению исследований биоэквивалентности эверолимуса для

применения в онкологии (дозировки 2,5 мг, 5 мг, 10 мг).

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию исследований биоэквивалентности:

1. В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности эверолимуса,

следует использовать препарат Афинитор®, который являются референтным согласно Государственному реестру лекарственных средств для дозировок 2,5 мг, 5 мг и 10 мг.

2.Следует запланировать исследования с приемом препаратов натощак и после приема пищи, т.к. для эверолимуса показано влияние фактора приема жирной пищи на фармакокинетические параметры. В случае планируемого приема воспроизведенного препарата

ввиде приготовленной суспензии после растворения таблетки препарата в воде, следует также запланировать исследование биоэквивалентности при таком способе применения эверолимуса. В

данном случае достаточно изучение биоэквивалентности натощак. Таким образом, необходимо планировать 3 исследования биоэквивалентности (натощак, после приема пищи и приема приготовленной суспензии натощак).

3.Количество субъектов для исследования биоэквивалентности эверолимуса (границы признания биоэквивалентности 80,00-125,00%) в исследовании со стандартным дизайном и предполагаемой точечной оценкой 0,95, ошибкой I рода 5%, ошибкой II рода 20%, при CVintra ≈ 20% должно быть не менее 20. В исследования биоэквивалентности следует включать субъектов обоего пола, по возможности в равном соотношении, т.к. препарат планируется к применению у

428

пациентов обоего пола. Рекомендуется оценить наличие или отсутствие гендерных различий в фармакокинетике, которые могут оказать влияние на результаты исследований биоэквивалентности.

4. С учетом данных о периоде полувыведения в исследованиях биоэквивалентности эверолимуса – в среднем около 30 часов (после однократного приема) можно рекомендовать длительность забора образцов крови 72 ч, период отмывки между периодами должен быть не менее 8 суток. Возможен более длительный период отмывки для исключения возможных пред-

дозовых концентраций эверолимуса до приема препаратов, например, длительностью 14 суток. 5. При выборе точек забора образцов крови для фармакокинетического анализа следует

учитывать общую длительность 72 ч или более (при оценке AUC0-t и/или AUC0-∞). Согласно нашему анализу и данным референтного препарата Tmax находиться в диапазоне 1-2 ч. Таким образом, в области достижения Tmax следует проводить более частый отбор крови. Можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови: 0, 0.17, 0.33, 0.50, 0.75, 1.00, 1.33, 1.67,

2.0, 2.33, 2.67, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0, 12.0, 24.0, 48.0 и 72.0 ч.

6. Рекомендуется использовать адекватный аналитический метод, например, ВЭЖХ с тандемной масс-спектрометрической детекцией. При этом метод должен позволять достичь адекватного НПКО, например, в рассмотренном нами исследовании НПКО был 1 нг/мл, в работе

Thudium K. И соавт., 2015, НПКО был 0,3 нг/мл.

7. В случае регистрации нескольких дозировок исследуемого препарата возможно изучение биоэквивалентности только одной дозировки изучаемого препарата (например,

максимальной в линейке), при условии идентичности качественного состава вспомогательных веществ, технологии, места производства и пропорциональности составов вспомогательных веществ между всеми дозировками, а также сопоставимости профилей растворения. Для дополнительных дозировок необходим тест сравнительной кинетики растворения в сравнении с

«биосерией» препарата.

8. Оценка биоэквивалентности. Препараты эверолимуса в дозировках 2,5 мг, 5 мг, 10 мг для применения в онкологии должны подтвердить биоэквивалентность референтному препарату в границах 90 % доверительных интервалов для отношений средних геометрических значений параметров Cmax и AUC0-72 (AUC0-t и/или AUC0-∞) исследуемого и референтного препарата в диапазоне 80,00-125,00%.

Рекомендации к проведению исследований биоэквивалентности эверолимуса для

применения в трансплантологии (дозировки 0,25 мг, 0,5 мг, 0,75 мг и 1 мг).

Целесообразно использовать следующие подходы к оценке и планированию исследований

биоэквивалентности:

429

1.В качестве препарата сравнения в исследованиях биоэквивалентности следует использовать препарат Сертикан®, который являются референтным согласно Государственному реестру лекарственных средств для дозировок 0,25 мг, 0,5 мг, 0,75 мг и 1 мг.

2.Следует запланировать исследования с приемом препаратов натощак и после приема пищи, т.к. для эверолимуса показано влияние фактора приема жирной пищи на фармакокинетические параметры. В случае планируемого приема воспроизведенного препарата

ввиде приготовленной суспензии после растворения таблетки препарата в воде, следует также запланировать исследование биоэквивалентности при таком способе применения эверолимуса. В

данном случае достаточно изучение биоэквивалентности натощак. Таким образом, необходимо планировать 3 исследования биоэквивалентности (натощак, после приема пищи и приема приготовленной суспензии натощак).

3.Количество субъектов для исследования биоэквивалентности эверолимуса (границы признания биоэквивалентности 90,00-111,11%) в исследовании со стандартным дизайном и предполагаемой точечной оценкой 0,95, ошибкой I рода 5%, ошибкой II рода 20%, при CVintra ≈ 20% должно быть не менее 168. При применении репликативного дизайна и подхода RSABE при

описанных выше условиях размер выборки составит 18 субъектов. В исследования биоэквивалентности следует включать субъектов обоего пола, по возможности в равном соотношении, т.к. препарат планируется к применению у пациентов обоего пола. Рекомендуется оценить наличие или отсутствие гендерных различий в фармакокинетике, которые могут оказать влияние на результаты исследований биоэквивалентности.

4. С учетом данных о периоде полувыведения в исследованиях биоэквивалентности эверолимуса – в среднем около 30 часов (после однократного приема) можно рекомендовать длительность забора образцов крови 72 ч, период отмывки между периодами должен быть не менее 8 суток. Возможен более длительный период отмывки для исключения возможных пред-

дозовых концентраций эверолимуса до приема препаратов, например, длительностью 14 суток.

5. При выборе точек забора образцов крови для фармакокинетического анализа следует учитывать общую длительность 72 ч или более (при оценке AUC0-t и/или AUC0-∞). Согласно нашему анализу и данным референтного препарата Tmax находиться в диапазоне 1-2 ч. Таким образом, в области достижения Tmax следует проводить более частый отбор крови. Можно рекомендовать следующий график отбора образцов крови: 0, 0.17, 0.33, 0.50, 0.75, 1.00, 1.33, 1.67,

2.0, 2.33, 2.67, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0, 12.0, 24.0, 48.0 и 72.0 ч.

6. Рекомендуется использовать адекватный аналитический метод, например, ВЭЖХ с тандемной масс-спектрометрической детекцией. При этом метод должен позволять достичь адекватного НПКО, например в исследованиях дозировки эверолимуса 10 мг НПКО был 1 нг/мл,

в работе Thudium K. и соавт., 2015, НПКО был 0,3 нг/мл [411].

430