3 курс / Фармакология / Диссертация_Ромодановский_Д_П_Разработка_требований_для_оценки_фармакокинетики

Таблица 217.

Усредненные фармакокинетические параметры УДХК.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; tmax – время достижения максимальной концентрации; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат; Mean – среднее арифметическое; SD – стандартное отклонение; * - значения не учитывались при расчете среднего и стандартного отклонения, т.к. размерность выражена в мкмоль/л.

Рисунок 54.

Усредненные фармакокинетические профили УДХК.

а

301

б

Примечание: а) фармакокинетические профили исследуемых препаратов; б) фармакокинетические профили препаратов сравнения; Т1-Т15 и Р1-Р15 – нумерация исследований биоэквивалентности, вошедших в анализ (за исключением исследований 3 и 9, в которых концентрация измерялась в мкмоль/л).

В рамках одного из исследований была изучена эндогенная концентрация УДХК на ограниченной выборке - 4 субъекта в течение 24 до приема исследуемых препаратов. Результаты продемонстрировали колебание концентрации в диапазоне 0,2-0,5 мкмоль/л (см. рисунок 55).

Рисунок 55.

Профиль эндогенной концентрации УДХК (мкмоль/л).

Примечание: T - профили исследуемых препаратов; R - профили препаратов сравнения;

Результаты исследования позволяют судить о том, что tmax для УДХК находиться в районе

1,5-2,5 часов, средние значения Cmax находились на уровне 4700 (±1800) нг/мл.

Аналитическую методику определения УДХК следует планировать с учетом ожидаемой максимальной концентрации и имеющегося оборудования, например, НПКО менее 235 (±90) нг/

мл. В проведенных исследованиях НПКО варьировал от 20 нг/мл до 250 нг/мл (0,25 мкг/мл), т.е.

302

правило «НПКО менее 5% от Cmax» было соблюдено в большинстве исследований.

Период полувыведения УДХК согласно инструкции референтного препарата составляет около 3,5-5,8 дней; по данным анализа исследований биоэквивалентности t1/2 варьировал от 1 до

30 часов (в среднем 12,49±11,48 часов), концентрация УДХК снижалась к эндогенному уровню спустя 72 часа, однако в некоторых исследованиях требовалось большее количество времени.

Поэтому при выборе точек забора образцов крови для ФК анализа можно ограничиться длительностью 72 часов. Более частый отбор образцов крови следует планировать в диапазоне времени достижения Сmах около 1,5-2,5 часов. Период отмывки с учетом длительности периода полувыведения - 7 дней.

При выборе точек забора образцов крови для ФК анализа УДХК следует учитывать наличие эндогенной концентрации. По данным анализа, в большинстве случаев концентрации УДХК до приема исследуемых препаратов значительно варьировали (от 20 нг/ до 350 нг/мл), что,

скорее всего, связано с особенностями проведения клинического исследования и биоаналитической методики определения аналитов (см. таблицу 218).

Примечание: ВЭЖХ МС - высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрической детекцией; ВЭЖХ МС/МС – высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной массспектрометрической детекцией; ВЭЖХ УФ - высокоэффективная жидкостная хроматография с

303

ультрафиолетовой детекцией; ГХ МС - газовая хроматография с масс-спектрометрической детекцией; ГХ ДИП – газовая хроматография с ионно-плазменной детекцией; НПКО – нижний предел количественного определения; SD

–стандартное отклонение.

Вбольшинстве исследований средние эндогенные концентрации были ниже НПКО

аналитического метода или незначительно превышали НПКО, но не превышали 5% от средней

Cmax. (см. таблицу 219).

Таблица 219. Доля средних эндогенных концентраций УДХК от средних значений Cmax.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; НПКО – нижний предел количественного определения; SD

– стандартное отклонение; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат.

Результаты анализа внутрииндивидуальной вариабельности УДХК из исследований БЭ со стандартным простым перекрестным дизайном 2х2х2 представлены в таблице 220, и

демонстрируют, что в 4 исследованиях из 13 была обнаружена высокая вариабельность хотя бы одного из ФК параметров AUC0-t Cmax.

304

Таблица 220.

Коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности УДХК.

(верхняя граница ДИ)

Примечание: AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал; НД – нет данных (метаболит не определялся); * - значения, превышающие 30%.

Полученные значения коэффициентов внутрииндивидуальной вариабельности УДХК были «пулированы». «Результаты «пулирования» данных 13 исследований показали, что значения CVpooled Cmax и AUC0-t не превышают 30% (23%; верхняя граница 80% доверительного интервала 24%, и 21%; верхняя граница 80% доверительного интервала 23%, соответственно).

В двух исследованиях с неполным повторным дизайном (2х2х3), в которых участвовало

36 субъектов, были получены высокие значения внутрииндивидуальной вариабельности исследуемого и референтного препарата (см. таблицу 221).

Таблица 221. Коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности исследуемого и референтного

препаратов УДХК.

(верхняя граница ДИ)

Примечание: AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности.

Таким образом, получены противоречивые данные в отношении внутрииндивидуальной вариабельности ФК параметров УДХК. В 6 из 15 исследований была показано высокая внутрииндивидуальная вариабельность. Поэтому препараты УДХК можно отнести к препаратам

305

с «умеренной» высокой внутрииндивидуальной вариабельностью (высокая вариабельность продемонстрирована в 40% исследований) [98] и включить в Перечень лекарственных средств с высокой внутрииндивидуальной вариабельностью ФК параметров (см. Приложение №3). При планировании расчета размера выборки в исследования БЭ следует ориентироваться на значения вариабельности около 25-38%.

Также были рассчитаны коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности УДХК для отдельных популяций субъектов мужского и женского пола (см. таблицу 222). Всего в исследованиях УДХК в статический анализ были включены данные от 365 субъектов, из которых 197 было мужского пола и соответственно 168 женского.

В10 из 13 исследований стандартного дизайна (2х2х2) участвовали субъекты обоего пола,

в3 исследованиях, соответственно участвовали субъекты только одного пола. В 10 исследованиях УДХК участвовало 155 субъектов мужского пола и в 150 женского. Высокие значения CVintra фармакокинетических параметров Cmax и AUC0-t (более 30 %), были получены в 2 исследованиях у мужчин и 2 у женщин.

Таблица 222. Данные о внутрииндивидуальной вариабельности УДХК у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж – женщины, Ж/M – отношение значений внутрииндивидуальной вариабельности фармакокинетического параметра у женщин к соответствующему значению у мужчин, СРЗНАЧ – среднее арифметическое значение, СРГЕОМ – среднее геометрическое значение, МАКС – максимальное значение, МИН – минимальное значение, СО – стандартное отклонение, * - значения, превышающие 30% (высокая вариабельность), ** - значения демонстрируют превышение внутрииндивидуальной вариабельности у женщин в сравнении с мужчинами.

В двух исследованиях с неполным повторным дизайном (2х2х3), в которых участвовало 38 субъектов мужского пола и 34 субъекта женского пола, были получены высокие значения внутрииндивидуальной вариабельности (см. таблицу 223).

306

Таблица 223. Коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности исследуемого и референтного

препаратов УДХК.

Примечание: AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; * - значения, превышающие 30% (высокая вариабельность).

Таким образом, высокая внутрииндивидуальная вариабельность ФК УДХК хотя бы одного изучаемого ФК параметра наблюдалась и у мужчин, и у женщин в 4 из 12 исследований.

Т.е. частота встречаемости высокой вариабельности у мужчин и женщин одинаковая, в связи с чем анализ ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением высокой частоты внутрииндивидуальной вариабельности ФК параметров, не проводился.

Анализ средних значений внутрииндивидуальной вариабельности параметра Cmax 10

исследований со стандартным дизайном показал незначительно большие значения в группе женщин (20,92±11,40 и 20,76±7,88, соответственно). Значения отношений внутрииндивидуальной вариабельности между женщинами и мужчинами составило – 1,14, что также говорит о незначительно большей внутрииндивидуальной вариабельности у женщин.

Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-0,037; p=0,971).

В отношении параметра AUC0-t была обнаружена аналогичная тенденция – среднее значение в группе женщин 20,39±6,04 и 17,58±4,08 в группе мужчин. Отношение значений вариабельности между женщинами и мужчинами составило 1,24. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров AUC0-t у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-1,216; p=0,240). Можно судить о том, что внутрииндивидуальная вариабельность параметров ФК УДХК у женщин незначительно выше,

чем у мужчин, однако, различия статистически не значимы.

Таблица 224 демонстрирует, отношение средних T/R для мужчин и женщин в проведенных исследованиях БЭ и случаи выявленной клинически значимой разницы отношений средних T/R у мужчин и женщин. В 5 из 12 исследований выявлена клинически значимая разница отношений средних T/R у мужчин и женщин, т.е. примерно в 40% исследований. В литературе наличие взаимосвязи «пол–лекарственная форма» в исследованиях БЭ выявлялось с частотой

36% (4 из 11 исследований) [231] и 46% (12 из 26 исследований) [120]. Данная взаимосвязь свидетельствует о наличии более чем 20% различий между сравниваемыми препаратами у мужчин и женщин по параметрам Cmax и AUC0-t. Указанные различия обусловлены

307

характеристиками готовой ЛФ, такими как состав и технология производства. Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R ФК параметров у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий для Сmax (t=-0,447; p=0,659) и для AUC0-t (t=-1,253; p=0,223).

Таблица 224. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препаратов УДХК у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрациявремя», М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R), * - значения превышающие порог ±0,2.

Таким образом, наблюдаемая частота обнаружения взаимосвязи «пол–лекарственная форма» в нашем исследовании и по данным литературы позволяет судить о целесообразности данной оценки в исследованиях БЭ воспроизведенных препаратов в целом и в частности препаратов УДХК.

Проведен анализ ФК различий путем сравнения значений Cmax и у мужчин и женщин, принимающих оба препарата (исследуемый и референтный) в 12 исследованиях УДХК,

в которых участвовали субъекты обоего пола. В 1 исследовании были выявлены статистически значимые различия у мужчин и женщин для параметров Cmax и AUC0-t (у женщин значения выше)

(см. таблицу 225). Распределение логарифмированных данных было близко к нормальному,

поэтому для сравнения использовали критерий Стьюдента.

Таблица 225. Фармакокинетические различия у мужчин и женщин из исследований УДХК.

Примечание: № - номер исследования; ФК – фармакокинетика; N – количество субъектов анализа; t-критерий – критерий Стьюдента; р – значимость; ln – логарифм; Cmax – максимальная концентрация в плазме крови AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови.

С помощью полученных в результате нашего анализа значений внутрииндивидуальной вариабельности и отношений геометрических средних T/R, рассчитали симуляционные 90%

доверительные интервалы для 10 исследований воспроизведённых препаратов УДХК при допущении, что количество субъектов мужского и женского пола будет приравнено к значению общей исходной выборки. Как видно из таблицы 226, в результате проведенных расчетов, в 6 из

12 исследований получены доверительные интервалы, не укладывающиеся в допустимый диапазон 80,00-125,00 %.

Таблица 226. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препаратов УДХК у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови; AUC – площадь под кривой «концентрация-время»; N – количество субъектов; М – мужчины; Ж – женщины; L – нижняя граница 90% доверительного интервала; U – верхняя граница 90% доверительного интервала; * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%; ** - границы масштабированы.

У мужчин не эквивалентные результаты были получены в 6 исследованиях (50%), у

женщин в 4 исследованиях (33%). Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований биоэквивалентности УДХК, выполнили, используя критерий χ2 с поправкой Йетса, для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 227). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00 %, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (χ2=0,171; р=0,679).

309

Таблица 227. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов.

Примечание: n – количество наблюдений.

Препараты УДХК могут быть отнесены к ЛП – АЭС и включены в Печень лекарственных средств аналогов эндогенных соединений (Приложение №5). Также препараты УДХК обладают высокой внутрииндивидуальной вариабельности и могут быть включены в Печень высоковариабельных лекарственных средств (Приложение №3).

При планировании и оценке результатов исследований БЭ УДХК следует руководствоваться принципами, описанными в Приложении №2.

Фолиевая кислота.

Фолиевая кислота – синтетический аналог витамина В9 для лечения заболеваний, вызванных дефицитом фолиевой кислоты. Время достижения максимальной концентрации после приема внутрь составляет 30-60 минут. Выводится в виде метаболитов, либо в неизменном виде,

вслучае если доза превышает суточную потребность74.

Врезультате анализа баз данных было выявлено 1 исследование БЭ. Исследование было выполнено с простым перекрёстным дизайном в 2 последовательностях, 2 режимах терапии, 2 периодах. В исследовании участвовали 20 взрослых здоровых добровольцев 8 мужского и 12

женского пола. Препаратом сравнения был препарат фолиевой кислоты, представленный на рынке, т.к. в России для препаратов фолиевой кислоты референтный препарат не установлен. В исследовании изучалась дозировка 1 мг. Исследуемые препараты принимались натощак. Период отмывки в исследовании составил 7 дней, длительность забора образцов крови – 24 часа (0; 0,16; 0,25; 0,32; 0,5; 0,75; 1; 2; 3; 4; 6; 9; 12; 24 ч).

Для определения концентраций фолиевой кислоты в качестве биоаналитического метода использовали высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-спектрометрической детекцией аналитов, НПКО был 10 нг/мл.

В результате анализа нескорректированных на эндогенный уровень значений концентраций фолиевой кислоты были рассчитаны ФК параметры Cmax, AUC0-t, tmax. В таблице

228 представлены усредненные ФК параметры, на рисунке 56 представлены усреднённые ФК профили.

74 Фолиевая кислота. Инструкция по медицинскому применению [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных средств. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/InstrImg/0001445096/%D0%9B%D0%9F-002991[2015]_0.pdf (дата обращения: 11.05.2020).

310