3 курс / Фармакология / Диссертация_Ромодановский_Д_П_Разработка_требований_для_оценки_фармакокинетики

НПКО менее 3,75 (±1,5) нг/мл. Правило НПКО – менее 5% от Cmax не было соблюдено в ряде проанализированных исследований.

Период полувыведения эналаприлата составляет около 11 часов [208, 423], поэтому при выборе точек забора образцов крови для ФК анализа препаратов с немедленным высвобождением следует учитывать общую длительность 48 часов. Более частый отбор образцов крови следует планировать в диапазоне времени достижения Сmах около 3-4 часов. Период отмывки с учетом длительности периода полувыведения должен быть 7 дней.

Во всех 10, вошедших в анализ, исследованиях БЭ определяли концентрацию активного метаболита и только в 4 исследованиях также определяли исходное соединение. Однако зарубежные руководства рекомендуют определение исходного соединения и активного метаболита. Биоэквивалентность должна оцениваться по исходному соединению28. Ни в одном из 10 рассмотренных исследований не наблюдалась высокая внутрииндивидуальная вариабельность эналаприла и его активного метаболита (см. таблицы 105 и 106) [51].

Примечание: MSE – среднеквадратичная ошибка; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал.

Примечание: MSE – среднеквадратичная ошибка; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra –

28 Product-Specific Guidance for Enalapril. [Электронный ресурс] // United States Food and Drug Administration. URL: https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/psg/Enalapril_Maleate_tab_18998_RC8-08.pdf (дата обращения: 11.05.2020).

191

коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал.

«Пулирование» данных 4 исследований с оценкой эналаприла показало, что значение

CVpooled Cmax составило 15,33% (верхняя граница доверительного интервала 16,49%) и CVpooled

AUC0-t составило19,91% (верхняя граница доверительного интервала 21,44%).

Результаты оценки взвешенного среднего значения CVintra («пулированного» значения

CVintra) 10 исследований эналаприла показали, что значение для Cmax эналаприлата составило

15,13% (верхняя граница доверительного интервала 15,88%), для AUC0-t эналаприлата составило

15,92% (верхняя граница доверительного интервала 16,71%).

Таким образом, препараты эналаприла не являются высоковариабельными, для расчета размера выборки следует ориентироваться на значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности исходного соединения - 21%.

Также были рассчитаны коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности эналаприла и его метаболита для отдельных популяций субъектов мужского и женского пола (см.

таблицу 107). Всего в исследованиях эналаприла в статический анализ были включены данные от 196 субъектов, из которых 104 было мужского пола и соответственно 92 женского. Из 10

исследований в 7 исследованиях участвовали субъекты обоего пола. Для эналаприла значения

CVintra более 30% не были выявлены. Анализ связи частоты высокой внутрииндивидуальной вариабельности с гендерными различиями не проводился.

Таблица 107. Данные о внутрииндивидуальной вариабельности эналаприла у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж – женщины, Ж/M – отношение значений внутрииндивидуальной вариабельности фармакокинетического параметра у женщин к соответствующему значению у мужчин, СРЗНАЧ – среднее арифметическое значение, СРГЕОМ – среднее геометрическое значение, МАКС – максимальное значение, МИН – минимальное значение, СО – стандартное отклонение; * - значения демонстрируют превышение внутрииндивидуальной вариабельности у женщин в сравнении с мужчинами.

Средние значения вариабельности для Сmax были выше у женщин (20,16±3,62 и 14,59±5,61, соответственно). Значения отношений внутрииндивидуальной вариабельности между женщинами и мужчинами во всех исследованиях составило – 1,80. Анализ сравнения

192

внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-1,445; p=0,199).

В отношении параметра AUC0-t средние значения вариабельности у мужчин и женщин также близки (15,02±3,08 и 10,92±6,04, соответственно). Отношение значений вариабельности между женщинами и мужчинами составило 3,13. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров AUC0-t у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-1,048; p=0,348).

Можно судить о том, что внутрииндивидуальная вариабельность параметров ФК эналаприла у женщин незначительно выше, чем у мужчин, однако, различия статистически не значимы.

Данные по внутрииндивидуальной вариабельности метаболита эналаприлата у мужчин и женщин приведены в таблице 108. Для эналаприлата значения CVintra более 30% не были выявлены. Анализ связи частоты высокой внутрииндивидуальной вариабельности с гендерными различиями не проводился.

Таблица 108. Данные о внутрииндивидуальной вариабельности эналаприлата у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины; Ж – женщины; Ж/M – отношение значений внутрииндивидуальной вариабельности фармакокинетического параметра у женщин к соответствующему значению у мужчин; СРЗНАЧ – среднее арифметическое значение; СРГЕОМ – среднее геометрическое значение; МАКС – максимальное значение; МИН – минимальное значение; СО – стандартное отклонение; * - значения демонстрируют превышение внутрииндивидуальной вариабельности у субъектов одного пола в сравнении с субъектами другого пола.

Средние значения вариабельности для Сmax были выше у мужчин (13,20±5,82 и 13,62±7,99,

соответственно). Значения отношений внутрииндивидуальной вариабельности между женщинами и мужчинами во всех исследованиях составило – 1,23, что говорит о большей вариабельности ФК у женщин. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=0,112; p=0,913).

193

В отношении параметра AUC0-t средние значения вариабельности у мужчин и женщин также близки (12,18±7,97 и 10,21±7,28, соответственно). Отношение значений вариабельности между женщинами и мужчинами составило 1,43. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров AUC0-t у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-0,483; p=0,638).

Можно судить о том, что внутрииндивидуальная вариабельность эналаприлата у женщин выше, чем у мужчин, однако, различия статистически не значимы.

Таблица 109 демонстрирует, отношение средних T/R Cmax и AUC0-t эналаприла для мужчин и женщин в проведенных исследованиях БЭ. Критерий наличия взаимосвязи «пол-лекарственная форма» (различия ±20%) выявлен в 1 из 4 рассмотренных исследований (36%). Анализ не выявил статистически значимых различий для Сmax (t=1,039; p=0,339) и для AUC0-t (t =0,518; p=0,623).

Таблица 109. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препарата у мужчин и женщин для эналаприла.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R); * - значения превышающие порог ±0,2.

Таблица 110 демонстрирует, отношение средних T/R Cmax и AUC0-t эналаприлата для мужчин и женщин в проведенных исследованиях БЭ. Критерий наличия взаимосвязи «пол-

лекарственная форма» (различия ±20%) выявлен для эналаприлата только в 1 случае. Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R ФК параметров периндоприлата у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий для Сmax (t =-0,650; p=0,528) и для AUC0-t

(t=0,905; p=0,383).

Таблица 110. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препарата у мужчин и женщин для эналаприлата.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R); * - значения, превышающие порог ±0,2.

Сравнительный анализ средних логарифмированных значений ФК параметров Cmax и

эналаприла и эналаприлата у мужчин и женщин показал, что в 2 из 7 исследований с участием субъектов обоего пола (28%), были обнаружены статистически значимые различия по параметрам Cmax и AUC0-t эналаприла (у женщин средние значения были выше), AUC0-t

эналаприлата в 1 исследовании оказался выше у мужчин (см. таблицу 111 ).

Таблица 111. Гендерные различия фармакокинетики эналаприла и эналаприлата

(распределение близко к нормальному).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; * - данные по эналаприлату.

Таким образом, в 28% наблюдаемых исследований были обнаружены гендерные различия

вФК ЛП эналаприла.

Спомощью полученных в результате анализа значений внутрииндивидуальной вариабельности и точечной оценки, рассчитали симуляционные 90% доверительные интервалы для эналаприла и эналаприлата при допущении, что количество субъектов мужского и женского пола будет приравнено к значению общей исходной выборки. Как видно из таблицы 112, в

результате проведенных расчетов, в 2 исследованиях выявлены неэквивалентные результаты (2

случая в группах мужского пола и 1 случай в группе женского пола).

Таблица 112. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препарата у мужчин и женщин по эналаприлу.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; N – количество субъектов; М – мужчины; Ж – женщины; L – нижняя граница 90% доверительного интервала; U – верхняя граница 90% доверительного

195

интервала.

Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ эналаприла, выполнили, используя точный критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 113). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00 %, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (Fр=0,57143; р>0,05).

Таблица 113. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов эналаприла.

Примечание: n – количество наблюдений.

В результате проведенных расчетов для эналаприлата в 3 из 7 исследований получены доверительные интервалы, не укладывающиеся в допустимый диапазон 80,00-125,00 % (см.

таблицу 114). В группе мужчин было выявлено 2 случая, в группе женщин - 1 случая неэквивалентности.

Таблица 114. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препарата у мужчин и женщин по эналаприлату.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; N – количество субъектов; М – мужчины; Ж – женщины; L – нижняя граница 90% доверительного интервала; U – верхняя граница 90% доверительного интервала; * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%.

Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ эналаприлата, выполнили, используя точный критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 115). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00%, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (Fр=0,59615; р>0,05).

196

Таблица 115. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов исследований эналаприлата.

Примечание: n – количество наблюдений.

Препараты эналаприла не являются высоковариабельными, при планировании и оценке результатов исследований БЭ следует руководствоваться принципами, описанными в Приложении №2.

3.4.1.3. Оценка внутрииндивидуальной вариабельности антагонистов рецепторов ангиотензина II.

Валсартан

Валсартан является антагонистом ангиотензиновых рецепторов 2 типа и обладает антигипертензивным действием. Время достижения Cmax для валсартана составляет 2-4 часа. Период полувыведения валсартана до 9 часов29.

Проведенный анализ 18 исследований БЭ препаратов валсартана показал, что во всех рассмотренных исследованиях был выбран стандартный простой перекрёстный дизайн. Препаратом сравнения в большинстве исследованиях был референтный препарат Диован®, изучались различные дозы от 80 до 320 мг. Период отмывки более чем в половине исследований составил 7 дней, длительность отбора и количество временных точек отбора значительно варьировало в различных исследованиях. Количество субъектов, включённых в статистический анализ параметров ФК, варьировало от 18 до 70 добровольцев (Приложение №1).

В качестве биоаналитического метода определения валсартана в большинстве исследований использовали высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-

спектрометрической или тандемной масс-спектрометрической детекцией аналитов, НПКО варьировал в диапазоне 50 – 100 нг/мл (Приложение №1).

В результате анализа значений концентраций валсартана были рассчитаны ФК параметры

Cmax, AUC0-t, tmax. В таблице 116 представлены усредненные ФК параметры, на рисунке 34

представлены усредненные ФК профили валсартана.

29 Диован®. Инструкция по медицинскому применению [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных средств. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/InstrImg/0001456736/0000603826/%D0%9F_N013991_01[2020]_0.pdf (дата обращения: 11.05.2020)

197

Таблица 116.

Усредненные фармакокинетические параметры валсартана.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; tmax – время достижения максимальной концентрации; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат; Mean – среднее арифметическое; SD – стандартное отклонение.

Рисунок 34.

Усредненные фармакокинетические профили валсартана.

а

198

б

Примечание: а) фармакокинетические профили воспроизведенных препаратов (T); б) фармакокинетические профили препаратов сравнения (R); Т1-Т18 и R1-R18 – нумерация исследований биоэквивалентности, вошедших в анализ.

Полученные результаты позволяют судить о том, что tmax валсартана находиться в диапазоне 2,5-3,2 часа после приема, средние значения Cmax находились на уровне 4200 (±2300)

нг/мл в зависимости от изучаемой дозировки.

Таким образом, при выборе схемы забора образцов крови следует планировать более частый отбор в интервале времени 2-4 часа с целью получения наиболее точных значений Cmax.

Аналитическую методику определения валсартана следует планировать с учетом НПКО менее

65 нг/мл для дозировки 80 мг, менее 220 нг/мл для дозировки 150 мг и менее 350 нг/мл для дозировки 320 мг (в рассмотренных исследованиях НПКО был в диапазоне 5 – 100 нг/мл, т.е.

условие 5% от Cmax было выполнено).

Период полувыведения валсартана, по данным литературы, составляет 9 часов [77],

поэтому при выборе точек забора образцов крови для ФК анализа препаратов с немедленным высвобождением следует учитывать общую длительность около 36 часов. Более частый отбор образцов крови следует планировать в диапазоне времени достижения Сmах около 2,5-3,2 часов.

Период отмывки с учетом длительности периода полувыведения может быть менее 7 дней,

однако общепринятый минимальный период отмывки в исследованиях БЭ составляет 7 дней.

В таблице 117 приведены данные оценки внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax и AUC0-t валсартана [55, 372]. Показано, что в 12 исследованиях была выявлена высокая внутрииндивидуальная вариабельность Cmax, т.е. частота выявления высокой вариабельности валсартана составила 67%. Высокая внутрииндивидуальная вариабельность

AUC0-t выявлена в 7 исследованиях валсартана (39%).

199

Таблица 117. Коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности валсартана.

(верхняя граница ДИ)***

Примечание: AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал; * - значения, превышающие 30%; ** - значения не подпадающие под общее распределение («выбросы»); *** - значения рассчитаны за вычетом «выбросов».

Результаты «пулирования» данных 18 исследований валсартана показали, что значение CVpooled Cmax составило 31,43% (верхняя граница доверительного интервала 32,22%) и CVpooled AUC0-t составило 28,26 (верхняя граница доверительного интервала 28,97), что говорит в пользу высокой внутрииндивидуальной вариабельности валсартана. Скорректированные (с учетом «выбросов») значения CVpooled Cmax и CVpooled AUC0-t составили 29,97% (30,77%) и 32,36% (33,20%), соответственно. Для расчета размера выборки следует ориентироваться на значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности 33%.

Также были рассчитаны коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности валсартана для отдельных популяций субъектов мужского и женского пола (см. таблицу 118).

Всего в исследованиях валсартана в статический анализ были включены данные от 701 субъекта,

из которых 477 было мужского пола и соответственно 224 женского. В 14 исследованиях валсартана участвовали субъекты обоих полов. В анализ было включено 12 исследований, т.к. в 2 исследованиях из 14 не указан пол по каждому субъекту исследования.

В 6 исследованиях были получены значения CVintra ФК параметров более 30% у мужчин.

200