1 курс / Гистология / Общий курс гистологии

глыбок. Затем апоптотические почки преобразуются в ограниченные мембраной апоптотические тельца (рис. 4).

Некроз: нарушение трофики → дефицит АТФ → аутолиз (нейтральный красный диффузно окрашивает цитоплазму, в которой из-за снижения рН и активации лизосомных ферментов исчезают барьеры), ядро сморщивается (кариопикноз), фрагментируется (кариорексис), рассасывается (кариолизис) – «ядерная тень» → «клеточная тень» (детрит).

Плазмолемма – наружная клеточная мембрана толщиной 10 нм. В электронном микроскопе в ней различимы 5 структурных компонентов: наружная и внутренняя плотные, промежуточная прозрачная пластинки, внутримембранные частицы и гликокаликс. Наружная плотная пластинка образована гидрофильными «головками» фосфолипидов наружного слоя. Внутренняя плотная пластинка образована гидрофильными «головками» фосфолипидов внутреннего слоя. Промежуточная прозрачная пластинка образована гидрофобными «хвостами» фосфолипидов наружного и внутреннего слоев. Внутримембранные частицы – интегральные, полуинтегральные и периферические белки, вкрапленные в бислой фосфолипидов толщиной 7 нм и увеличивающие толщину плазмолеммы до 10 нм. Гликокаликс – надмембранный слой углеводов толщиной 3 нм (в энтероцитах – 50 нм). С белками внутренней поверхности мембраны взаимодействуют компоненты цитоскелета, составляющие плотный кортикальный слой толщиной 100–500 нм.

Функции: барьерная, интегративная (рецепторы для сигнальных молекул, клеточные контакты), транспортная. Транспорт: липиды проникают через плазмолемму свободно, вода – через поры, ионы, глюкоза, аминокислоты – посредством белков-переносчиков, макромолекулы – экзоцитозом (наружу), пиноцитозом (внутрь), частицы, бактерии поглощаются фагоцитозом.

Плазмолемма участвует в простом соединении клеток и по типу замка, формирует сложные контакты (плотные, щелевые, десмосомы). Изолирующие гребешками слияния плотные контакты напоминают стеганое одеяло (на разрезе – застежку «молния»), состоят из белков, встроенных в контактирующие мембраны. Щелевые контакты (нексусы) на сколе мембраны напоминают сито, через поры которого диаметром 2 нм (коннексоны), образованные белками коннексинами, диффундируют ионы. Сцепляющие контакты десмосомы напоминают заклепки, «шляпки» которых (внутриклеточные десмосомные пластинки) образованы структурами подмембранного

12

эндоплазматическая сеть, комплекс Гольджи, лизосомы, пероксисомы) и немембранные (рибосомы, полисомы, клеточный центр, микротрубочки, микрофиламенты). Органеллы общего значения присутствуют во всех клетках, специальные органеллы – в отдельных специализированных клетках.

Эндоплазматическая сеть обнаружена при исследовании в электронном микроскопе внутренней части цитоплазмы фибробласта

13

Рибосомы – электронно-плотные структуры размером 25×20×20 нм, состоят из рРНК и белков. Они обусловливают базофилию цитоплазмы и участвуют в синтезе белка (трансляции), используя в качестве матрицы иРНК. Аминокислоты транспортируют тРНК. Свободные рибосомы и полисомы синтезируют белки опорно-двигательной системы клетки (тубулины, кератин, актин, миозин), белки гиалоплазмы (фибронектин, гельзолин). 75% рибосом удерживает гранулярная эндоплазматическая сеть (ГЭС), синтезирующая экспортные белки, плазмолеммы, лизосомные ферменты. Расширение цистерн свидетельствует об активизации ГЭС (рис. 6).

14

белки из ГЭС. Окаймленные пузырьки транспортируют материал плазмолеммы для обновления мембраны мешочков. На вогнутой транс поверхности диктиосомы обнаруживаются лизосомные почки, везикулы Гольджи, транспортирующие лизосомные ферменты («первичные» лизосомы) и секреторные везикулы (рис. 8).

В комплексе Гольджи происходят накопление и сортировка (сегрегация) белков, гликозилирование (образование гликопротеидов).

Лизосомы впервые описал в 1949 г. бельгийский гистохимик С. де Дюв (разделил Нобелевскую премию с Дж. Паладе). Отпочковавшиеся везикулы Гольджи, транспортирующие около 50 лизосомных ферментов (маркерный – кислая фосфатаза), неактивны. Они имеют диаметр 0,2–0,5 мкм, базофильны, с мелкозернистым электронноплотным матриксом, отграниченным от цитозоля мембраной. При закислении цитозоля лизосомная мембрана становится проницаемой, происходит аутолиз клетки – некроз. При слиянии лизосом с фагосомами образуются активные фаголизомы, с органеллами клетки – аутолизосомы. Основная функция лизосом – утилизация структур. Телолизосомы (остаточные, резидуальные тельца) – неактивные, прекратившие переваривать материал лизосомы. Непереваренный материал может структурироваться в пигмент липофусцин, кальцинироваться и выделяться из клетки путем экзоцитоза.

Пероксисомы являются производными гладкой эндоплазматической сети, имеют диаметр 0,3–1,5 мкм, кристаллоидную сердцевину (у крыс), ограничены мембраной. Продолжительность жизни – 5–6 дней. Содержат около 40 различных ферментов, в том числе имеющих отношение к расщеплению Н2О2 (маркерный фермент каталаза), синтезу солей желчных кислот (в гепатоцитах печени).

Митохондрии – самовоспроизводящиеся (почкованием) органеллы размером 0,5×5 мкм, которые окрашиванием кислым фуксином впервые обнаружил немецкий ученый Р. Альтман в 1894 г., а К. Бенда в 1897 г. предложил современное название. Совокупность митохондрий клетки составляет хондриом. Основная функция органелл

– синтез АТФ («болезнь митохондрий» сопровождается разобщением окисления и фосфорилирования, рассеиванием вырабатываемой энергии в виде тепла). Митохондрия имеет рибосомы (миторибосомы), кольцевую ДНК, плотные гранулы кальцификатов в митохондриальном матриксе, митохондриальную оболочку и кристы. Кристы образует внутренняя митохондриальная мембрана, усеянная грибовидными частицами диаметром 8 нм. Наружная мембрана гладкая. Межмембранное пространство составляет 20 нм (рис. 9).

15

чек), продольная (кардиомиоциты). Кристы могут ветвиться или образовывать пальцевидные

отростки, изгибаться. У простейших, одноклеточных водорослей, в некоторых клетках высших растений и животных (кортикостероциты) выросты внутренней митохондриальной мембраны имеют вид трубок, в гепатоцитах – пластинчатые, в мышечных волокнах мухи – перфорированные, у амебы – волнистые.

Цитоскелет: клеточный центр, микротрубочки, микрофиламенты.

Клеточный центр обна-

(9х3+0). Основная функция –

16

образование микротрубочек, веретена клеточного деления. Микротрубочки состоят из белков тубулинов диаметром 7 нм,

формирующих 13 нитей, расположенных по окружности. Имеют просвет 14 нм и наружный диаметр 28 нм. Определяют форму клетки и перемещают компоненты цитоплазмы, используя механизм скольжения и поперечные «ручки» из белка кинезина. «Ручки» обладают АТФазной активностью.

Микрофиламенты – нити белка актина диаметром 5–7 нм, промежуточные филаменты – нити белка кератина диаметром 7–10 нм, миозин – белковая нить диаметром 10–15 нм с подвижной «головкой», проявляющей АТФ-азную активность. Промежуточные филаменты выполняют опорную функцию. Актино-миозиновые комплексы обеспечивают изменение формы клетки (сократительный аппарат).

Поверхностные специализированные структуры – микровор-

синки и реснички.

Микроворсинки имеет размеры 0,1×1 мкм, продольно расположенные микрофиламенты, выполняющие опорную функцию. Они увеличивают площадь поверхности всасывания веществ (в энтероцитах, нефроцитах).

Реснички размером 0,3×5 мкм с аксонемой и базальным тельцем. Являются подвижными органеллами (25 мерцаний в 1 секунду). Ак-

17

нарушает взаимосвязь филамина с микрофиламентами, гель переходит в золь, что благоприятствует обмену веществ.

Цитоплазматические включения по значимости подразделяют на трофические (резервные накопления питательных веществ – суданофильных, осмиофильных липидных капелек, гликогеновых ШИКпозитивных гранул), секреторные (ШИК-позитивные слизистые везикулы, оксифильные электронно-плотные белковые секреторные везикулы), экскреторные (выделяемые конечные продукты обмена) и пигментные (гемоглобин, липофусцин, меланин, введенный прижизненно (витально) внутривенно краситель трипановый синий).

ОПИСАНИЕ МИКРОПРЕПАРТОВ

1. Кровь человека. Мазок. Окраска азур II – эозином (Прило-

жение, рис. 1). При малом увеличении микроскопа в препарате различимы свободно расположенные мелкие клетки. Это мазок. Численно преобладают в нем безъядерные оксифильно окрашенные эозином в красный цвет округлые клетки – эритроциты. Единичные клетки имеют темное ядро, базофильно окрашенное азуром II в синефиолетовый цвет. Это лейкоциты. Препарат – мазок крови человека. При большом увеличении микроскопа в эритроцитах-дискоцитах в центральной двояковогнутой части различимо просветление. Периферическая часть эритроцитов имеет более интенсивную окраску. В лейкоцитах проявляется полиморфизм клеточных ядер. Чаще других обнаруживаются клетки, размером несколько превосходящие эритроциты с сегментированным ядром и с оксифильно окрашенной в розо- во-фиолетовый цвет мелкозернистой цитоплазмой. Количество сегментов составляет 3–5. Они связаны тончайшими перемычками и имеют околоядерный придаток в виде барабанной палочки – мазок крови женщины. Более мелкие, чем эритроциты, или одинакового с ними диаметра лейкоциты имеют сферическое ядро, окруженное узким ободком базофильной цитоплазмы. Самые крупные лейкоциты содержат крупное почковидное или с несколькими выемками ядро, окруженное широким ободком слабо базофильной цитоплазмы. Просматривая несколько полей зрения, можно обнаружить лейкоциты с палочковидным U-образно или S-образно изогнутым ядром.

Зарисовать на одном рисунке безъядерную клетку эритроцитдискоцит при большом увеличении, на другом – несколько безъядерных эритроцитов и лейкоциты, обозначив полиморфизм их ядер (малый лимфоцит с округлым ядром, окруженным узким ободком цито-

18

плазмы, моноцит с почковидным ядром, окруженным широким ободком слабо базофильной цитоплазмы, нейтрофильные гранулоциты с сегментированным и палочковидным ядром).

2.Однослойный кубический эпителий канальцев почки. Окраска гематоксилином и эозином (Приложение, рис. 2). При ма-

лом увеличении микроскопа в срезе обнаруживаются структуры с округлым просветом – канальцы, характерные для почки кролика. При большом увеличении микроскопа в стенке канальцев различимы расположенные в один ряд клетки. Высота клеток и поперечный размер равнозначны (кубические клетки). Ядра сферической формы, с хроматином, конденсированным в виде мелких глыбок, и ядрышками, базофильно окрашенными гематоксилином в сине-фиолетовый цвет. Оксифильная цитоплазма из-за присутствия в ней белкового цитоскелета и митохондрий, обеспечивающих энергией реабсорбцию веществ, окрашивается кислым красителем эозином в розовый цвет.

Зарисовать при большом увеличении эпителиоциты канальцев почки кубической формы с округлым ядром, сине-фиолетовым ядрышком и глыбками хроматина, оксифильной цитоплазмой, окрашенной в розовый цвет.

3.Однослойный столбчатый эпителий канальцев почки. Окраска гематоксилином и эозином (Приложение, рис. 3). При ма-

лом увеличении микроскопа в срезе обнаруживаются структуры с округлым просветом – канальцы, характерные для почки кролика. При большом увеличении микроскопа в стенке канальцев различимы расположенные в один ряд клетки. Высота клеток превосходит в несколько раз поперечный размер (столбчатые клетки). Ядра овоидной формы вытянуты вдоль оси клеток. Хроматин конденсирован в виде мелких глыбок. Ядрышки и хроматин базофильно окрашиваются гематоксилином в сине-фиолетовый цвет. Оксифильная цитоплазма изза присутствия в ней белкового цитоскелета и большого числа митохондрий, обеспечивающих энергией реабсорбцию веществ, окрашивается кислым красителем эозином в розовый цвет. На апикальной поверхности клеток, обращенной в просвет канальцев, различима поверхностная специализированная структура – щеточная каемка. Она более интенсивно окрашивается эозином и состоит из микроворсинок, увеличивающих площадь поверхности реабсорбции и экскреции веществ в почках.

Зарисовать при большом увеличении столбчатые эпителиоциты канальцев почки с овальным ядром, сине-фиолетовым ядрышком и

19

глыбками хроматина, оксифильной цитоплазмой, окрашенной в розовый цвет.

4. Нейрофибриллы в нервных клетках спинного мозга. Импрегнация нитратом серебра (Приложение, рис. 4). При малом уве-

личении микроскопа в срезе органа обнаруживаются центрально расположенное темное вещество, имеющее форму бабочки или буквы «Н», серое вещество, которое окружает более светлое – белое вещество, характерные для спинного мозга собаки, импрегнированного нитратом серебра. В более широких передних рогах серого вещества спинного мозга при большом увеличении микроскопа обнаруживаются группы крупных клеток отростчатой формы – α-мотонейроны. Клетки имеют несколько отростков, в теле нейрона центрально располагается пузырьковидное ядро округлой формы с ядрышком. В перекарионе и отростках выявляется зачерненный серебром цитоскелет в виде тонких нитчатых образований, называемых нейрофибриллами

– органеллы специального значения, характерные только для нервных клеток. В перикарионах нейрофибриллы располагаются в виде плотной сети, окружающей ядро. В отростках нервных клеток нейрофибриллы следуют параллельно друг другу.

Зарисовать при большом увеличении отростчатую нервную клетку с пузырьковидным ядром, ядрышком и зачерненными нейрофибриллами в желто-коричневой цитоплазме. Обозначить нейрофибриллы.

5. Поперечнополосатая мышечная ткань языка. Окраска же-

лезным гематоксилином (Приложение, рис. 5). При малом увеличении микроскопа в препарате отыскать продольно и поперечно разрезанные толстые темно-синего цвета волокна, характерные для мышечной ткани языка кролика, окрашенной железным гематоксилином. Мышечные волокна собраны в пучки и разделены светлыми прослойками. При большом увеличении микроскопа в продольно разрезанных мышечных волокнах различимы узкие поперечные темные и светлые диски, состоящие из толстых миозиновых миофиламентов и тонких актиновых миофиламентов. Миофиламенты организуются в поперечнополосатые миофибриллы – органеллы специального значения, составляющие сократительный аппарат. Миофибриллы простираются вдоль центральной части волокон без перерыва на всем их протяжении. Снаружи от миофибрилл в общей цитоплазме располагаются многочисленные ядра овоидной формы с умеренно конденсированным хроматином, характерные для миосимпластов, производных клеток миобластов, образующих многоядерные струк-

20