Полезные материалы за все 6 курсов / Ответы к занятиям, экзаменам / 5_Патогенные_кокки_и_грамотрицательные_бактерии

Специфическая профилактика заболеваний, вызываемых гемофильными

бактериями в России, не разработана, но разрешены к применению зарубежные

вакцины против H.influenzae типа b.

5.Характеристика бордетелл. Микробиологическая диагностика коклюша

ипаракоклюша. Специфическая профилактика коклюша.

Род Bordetella включает 2 патогенных для человека вида:

B.pertussis – возбудитель коклюша;

B.parapertussis – возбудитель паракоклюша (коклюшеподобное заболевание

у человека).

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные мелкие, короткие бактерии, спор не образуют, имеют микрокапсулу, неподвижны.

Чистая культура B.pertussis. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: строгие аэробы, требовательны к питательным средам. B.pertussis культивируют на специальных питательных средах: казеи-

ново-угольный агар (КУА), среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с кровью человека), молочно-кровяной агар. На среде Борде-Жангу возбу-

дитель коклюша растет в виде гладких мелких блестящих выпуклых колоний,

напоминающих капельки ртути. B.parapertussis культивируют на МПА и в МПБ.

21

Антигенная структура:

1.О-антиген – родоспецифический;

2.К-антигены (капсульные) имеют значение для идентификации видов бордетелл по антигенным свойствам в реакции агглютинации.

Факторы патогенности B.pertussis:

1.Комплекс адгезинов: филаментозный гемагглютинин (протективный ан-

тиген), пили, белок наружной мембраны (пертактин), капсула;

2.Токсины:

•коклюшный экзотоксин вызывает повышенную чувствительность к ги-

стамину, лимфоцитоз;

•трахеальный цитотоксин повреждает мерцательный эпителий респира-

торного тракта;

•дермонекротоксин вызывает воспаление и некроз эпителия респиратор-

ного тракта;

•аденилатциклаза подавляет функции фагоцитов;

•эндотоксин (ЛПС) повреждает эпителиальные клетки респираторного тракта, обладает общетоксическим действием.

Коклюш – острое инфекционное заболевание. Чаще болеют дети до-

школьного возраста.

Источник инфекции: больной человек (особенно в катаральном периоде заболевания), редко – бактерионоситель.

Путь передачи: воздушно-капельный.

Заболевание характеризуется высокой контагиозностью. После контакта неиммунизированного человека с больным коклюшем вероятность развития за-

болевания составляет 75-90%.

Клиника: инкубационный период длится в среднем 2 недели, затем сле-

дует катаральный период (наиболее контагиозный, проявляется симптомами сухого, постоянно усиливающегося кашля). Пароксизмальный период (пери-

22

од судорожного кашля), который характеризуется появлением приступов спаз-

матического кашля, частые продолжительные приступы кашля могут приво-

дить к перевозбуждению дыхательного центра и остановке дыхания (развитию апноэ), стадия выздоровления характеризуется постепенным уменьшением частоты приступов кашля, выздоровление наступает медленно (в течение 1-2

месяцев).

Паракоклюш имеет более легкое течение.

Материал на исследование: слизь с задней стенки глотки.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-диагностика (в начале заболевания): РИФ и ИФА для опре-

деления антигенов возбудителей в материале от больного.

2.Бактериологический метод, основной (наиболее эффективен в конце инкубационного периода и в катаральном периоде): посев слизи с зад-

ней стенки глотки на соответствующие среды с последующей иденти-

фикацией. Забор материала в пароксизмальный период чаще проводят методом «кашлевых пластинок» (во время приступа кашля подносят чашку с питательной средой ко рту на расстояние 10-12 см). Реже берут мазок тампоном с задней стенки глотки.

3.Молекулярно-биологический: ПЦР.

4.Серологический метод (используют с 3 недели заболевания): опреде-

ление антител в сыворотке крови с помощью РА, РНГА, РИФ

(непрямая), ИФА.

Специфическая плановая профилактика коклюша.

В течение первого года жизни ребенку необходима трехкратная вакцина-

ция убитой коклюшной вакциной в составе АКДС (адсорбированная ко-

клюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина) (Россия).

23

Разработаны и применяются бесклеточные вакцины, содержащие очи-

щенные антигены возбудителей коклюша (филаментозный гемагглютинин, ко-

клюшный анатоксин и др.) (Япония, Бельгия, США и др.).

Экстренная профилактика (для неиммунизированных людей при кон-

такте с больным коклюшем): нормальный человеческий иммуноглобулин.

B.bronchiseptica представляют собой мелкие подвижные грамотрицатель-

ные палочки, которые являются паразитами млекопитающих. Они локализуют-

ся и размножаются среди ресничек эпителия дыхательных путей.

B.bronchiseptica крайне редко вызывает у людей заболевание, напоминающее паракоклюш. Ее можно обнаружить в носоглотке людей со сниженным имму-

нитетом, а также людей, содержащих домашних животных (кроликов, собак и др.). Возможно бессимптомное носительство этих бактерий у человека.

6. Характеристика легионелл, роль в патологии, микробиологическая диа-

гностика легионеллеза.

Из 22 видов легионелл, патогенных для человека, 95% случаев заболева-

ний связаны с видом Legionella pneumophila. Бактерии получили название бла-

годаря вспышке пневмонии со смертельными исходами среди участников съез-

да Американского Легиона в 1976 г. (болезнь легионеров, легионеллез).

Морфо-тинкториальные свойства: L.pneumophila – мелкие грамотрица-

тельные палочки, спор и капсул не образуют, подвижны.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к питательным средам,

размножаются только на сложных питательных средах (с добавлением железа и цистеина).

Факторы патогенности. Легионеллы – факультативные внутриклеточные паразиты. Активно размножаются в макрофагах, что приводит к их разруше-

нию и выходу бактерий в легочную ткань. Этот процесс обеспечивается следу-

ющими факторами патогенности: цитотоксином и супероксиддисмутазой.

Эндотоксин (ЛПС) обусловливает симптомы общей интоксикации.

24

Источники инфекции и путь заражения. Легионеллы в природных усло-

виях обитают в пресноводных водоемах, но способны успешно колонизировать искусственные водоемы системы водоснабжения, водопроводные трубы, кра-

ны, душевые установки, кондиционеры, медицинскую аппаратуру. На синтети-

ческих и резиновых поверхностях бактерии образуют биопленку, устойчивую к дезинфицирующим средствам. Путь заражения: аэрогенный, при вдыхании мелкодисперсного аэрозоля, содержащего возбудителя.

Патогенез и клиника. Ведущим фактором в патогенезе является накопле-

ние возбудителя в альвеолярных макрофагах. Высокая концентрация бактерий приводит к развитию острого воспалительного процесса в легочной ткани.

Болезнь легионеров сопровождается лихорадкой, болями в груди, кашлем,

одышкой. В 20-30% случаев развивается острая дыхательная недостаточность.

Могут развиться инфекционно-токсический шок, почечная недостаточность,

поражения ЦНС. Летальность до 25%.

Второе клиническое проявление этой патологии – лихорадка Понтиак –

ОРЗ без пневмонии. Течение легкое.

Материал на исследование: мокрота, материал при бронхоскопии.

Микробиологическая диагностика.

1. Экспресс-диагностика: РИФ биопсийного материала легких.

2. ПЦР.

3. Бактериологический метод: посев на соответствующие питательные

среды.

4.Серологический метод: РИФ, ИФА.

7.Синегнойная инфекция в патологии человека. Микробиологическая ди-

агностика и специфическое лечение.

Синегнойная палочка – Pseudomonas aeruginosa.

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные неспорообразу-

ющие палочки средних размеров, подвижны, вирулентные штаммы образуют

капсулоподобное вещество.

25

Культуральные свойства: облигатные аэробы, не требовательны к пита-

тельным средам, на МПА обычно растут в виде крупных плоских колоний с ха-

рактерным запахом жасмина или карамели (образует триметиламин) и окраской сине-зеленого цвета (растворимый пигмент пиоцианин), в МПБ дает диффузно-

мутящий рост с окрашиванием среды пигментом.

Сине-зеленый пигмент Pseudomonas aeruginosa.

Факторы патогенности P.aeruginosa:

1.Пили обеспечивают адгезию на клетках;

2.Капсулоподобное вещество (внеклеточная слизь) препятствует фагоци-

тозу, способствует образованию биопленок и колонизации различных био-

топов;

3.Ферменты патогенности: нейраминидаза, протеазы и др.;

4.Токсинопродукция:

-экзотоксин А (подобен гистотоксину) нарушает синтез белка;

-экзотоксин U – ведущий фактор вирулентности, вызывает тяжелое по-

ражение легочной ткани, способствует тромбообразованию при сине-

гнойной пневмонии, которая быстро переходит в сепсис;

-лейкоцидин обладает токсическим действием на лейкоциты;

-эндотоксин (ЛПС);

26

5. R-плазмиды (факторы множественной лекарственной устойчивости и устойчивости к дезинфектантам).

Источники инфекции и пути заражения многообразны.

P.aeruginosa является одним из основных возбудителей внутрибольнич-

ных инфекций. Гнойно-воспалительные заболевания, которые она вызывает,

почти в 100% случаев связаны с экзогенным инфицированием при длительном нахождении в стационаре на фоне снижения резистентности организма.

Особенности P.aeruginosa, как возбудителя госпитальной инфекции:

-широкое распространение в окружающей среде (обитает в почве, воде, яв-

ляется факультативным симбионтом организма человека);

-минимальные пищевые потребности, хорошая выживаемость в окружающей среде;

-множественная устойчивость к антибиотикам, антисептикам и дезинфектан-

там.

Гнойно-воспалительные процессы, обусловленные P.aeruginosa могут иметь различную локализацию в организме и отличаются особым упорством и неблагоприятным прогнозом.

Выделяют несколько видов отделений стационаров, в которых внутри-

больничная синегнойная инфекция занимает лидирующие позиции (табл. 8).

Таблица 8 Основные лечебные отделения с наибольшей частотой встречаемости

внутрибольничной синегнойной инфекции

27

Материал на исследование берут в зависимости от формы заболевания

(гной, кровь, отделяемое ран, моча, мокрота и др.) желательно до начала лече-

ния больного антимикробными препаратами.

Микробиологическая диагностика: основной метод бактериологиче-

ский с обязательным определением чувствительности выделенной культуры к антимикробным препаратам и бактериофагам.

Специфическая профилактика: корпускулярная поливалентная вакцина показана больным из групп риска (иммунодефицит, сахарный диабет и др.).

Также применяется для лечения, снижая риск развития сепсиса.

При тяжелых формах синегнойной инфекции и множественной лекар-

ственной устойчивости культуры для специфического лечения используют

противосинегнойную плазму человеческую. При наличии чувствительности

кбактериофагам применяют: синегнойный бактериофаг, интести-

бактериофаг и пиобактериофаг.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1.Световая микроскопия препаратов из чистых культур менингококков, гемофильных бактерий, бордетелл и синегнойной палочки, окрашенных по Граму.

2.Световая микроскопия нативных мазков из уретры больного острой гонореей, окрашенных метиленовым синим.

3.Схема бактериологического исследования слизи из верхних дыхательных путей больного с подозрением на коклюш.

28

I этап исследования.

Посев исследуемого материала, методом «кашлевых пластинок» на среду КУА. Посевы инкубируют при 370С 72 часа.

II этап исследования.

1.Изучение характера роста на КУА, приготовление мазков из подозрительных колоний, окраска по Граму, микроскопия.

2.С целью выделения чистой культуры производят пересев подозрительной колонии на КУА. С оставшейся частью колонии проводят ориентировочную РА на стекле с монорецепторными сыворотками к видовым

агглютиногенам 1 (B.pertussis) и 14 (B.parapertussis). Посевы инкубируют при 370С 2-5 суток.

III. этап исследования.

1.Изучение чистоты выделенной культуры макро- и микроскопически.

2.С целью идентификации выделенной культуры производят посев на

МПА, МПА с тирозином, среду с мочевиной и ставят развернутую РА с диагностическими сыворотками 1 и 14.

IV этап исследования.

Учет:

Вывод.

29

Занятие №3

Тема. Возбудители зоонозных инфекций: бруцеллеза, сибирской язвы, чумы, туляремии, сапа и мелиоидоза. Микробиологическая диагностика зоонозных инфекций.

Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей зоонозных инфекций, микробиологическую диагностику, препараты для специфической профилактики и лечения.

I.Теоретические знания:

1.Характеристика возбудителя бруцеллеза, клинические формы заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия.

2.Характеристика возбудителя сибирской язвы, клинические формы заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия.

3.Характеристика возбудителя чумы, клинические формы заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.

4.Характеристика возбудителя туляремии, клинические формы заболевания, микробиологическая диагностика и специфическая профилактика.

5.Характеристика возбудителей сапа и мелиоидоза, микробиологическая диагностика.

II.Практические навыки:

1.Световая микроскопия препаратов, окрашенных по Граму, из чистых культур возбудителей бруцеллеза, сибирской язвы, чумы, туляремии, сапа и мелиоидоза.

2.Учет реакций Хеддльсона и Райта для диагностики бруцеллеза.

30