Полезные материалы за все 6 курсов / Ответы к занятиям, экзаменам / 5_Патогенные_кокки_и_грамотрицательные_бактерии

лентны пневмококки I, II и III сероваров. III серовар, имеющий мощную капсу-

лу, является высоко вирулентным и вызывает тяжелые деструктивные пораже-

ния тканей.

Источник инфекции: больной человек, бактерионоситель.

Путь заражения: воздушно-капельный.

Заболевания, вызываемые пневмококками, представлены в табл. 4.

Метод диагностики – бактериологический.

Специфическая профилактика: химическая (полисахаридная) вакцина

на основе капсульных антигенов.

5. Возбудители сепсиса. Микробиологическая диагностика.

Сепсис (от греч. sepsis – гниение) – системная воспалительная реакция в ответ на генерализацию местного инфекционного процесса с развитием бакте-

риемии и токсемии. Сопровождается размножением возбудителя в крови и ха-

рактерной клинической и патологоанатомической картиной.

Особенность сепсиса заключается в многообразии его возбудителей при достаточно общей клинической картине заболевания (табл. 5).

11

Правила забора крови при подозрении на сепсис:

1.Кровь забирают в процедурном кабинете, соблюдая правила асептики и антисептики;

2.Лучше забирать кровь до назначения антибактериальной терапии, если антибиотики назначены, то перед очередным введением антибиотика;

3.Натощак или через 3 часа после еды;

4.Во время подъема температуры;

5.Количество крови: у взрослых 10 мл, 2 пробы из двух сосудов или двух участков одного сосуда (локтевой вены), у детей (в зависимости от возраста) –

1,5-5 мл. Кровь помещают во флаконы со специальной транспортной средой; 6. Кровь из подключичного катетера необходимо забирать только при по-

дозрении на катетер-ассоциированную инфекцию.

Диагностика сепсиса проводится бактериологическим методом с посе-

вом крови на специальные питательные среды в аэробных и анаэробных усло-

виях культивирования. Посев крови необходимо проводить несколько раз.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1.Световая микроскопия препаратов из чистых культур стафилококков, стрептококков и пневмококков, окрашенных по Граму.

2.Световая микроскопия нативных препаратов из крови больного сепсисом, окрашенных по Граму.

3.Схема бактериологического исследования крови больного с подозрением на аэробный сепсис.

I этап исследования.

Посев крови больного во флаконы со специальной средой для аэробного и анаэробного культивирования в соотношении 1:10; приготовление мазка крови, окрашивание по Граму, световая микроскопия.

Посевы инкубируют при 370С в течение 8-10 дней, ежедневно просматривая их.

II этап исследования (через 24-48 часов).

1)Изучение характера роста в жидкой питательной среде:

2)Приготовление мазков из жидкой питательной среды, окрашивание по Граму, микроскопия:

3)Высев на плотные питательные среды с целью получения чистой куль-

туры и определения антибиотикочувствительности. Посевы инкубируют при 370С 24-48 часов.

12

III этап исследования.

1)Изучение характера роста на плотной питательной среде, приготовление мазков из изолированных колоний, окрашивание по Граму, микроскопия

2)Учет антибиотикочувствительности выделенной культуры

3)Идентификацию выделенной культуры проводят с использованием со-

ответствующих тест-систем.

Посевы инкубируют при 370С 24-48 часов.

IV этап исследования. Учет результатов

Вывод (определение вида выделенной культуры и ее антибиотикограмма):

4. Схема бактериологического исследования гноя из фурункула больного. Забор гноя при вскрывшемся фурункуле производят до обработки анти-

септиками стерильным тампоном из глубины фурункула. При абсцессе стерильным шприцем аспирируют гной и помещают в стерильную пробирку с транспортной средой.

I этап исследования.

1)Посев материала на соответствующие питательные среды.

2)Приготовление нативных мазков, окрашивание по Граму, микроскопия. Посевы инкубируют при 370С в аэробных и анаэробных условиях культивирования в течение 7 дней, ежедневно просматривая посевы.

II этап исследования (через 24 часа).

1)Изучение характера роста на соответствующих питательных средах

,

2) Приготовление мазков из выросших культур, окрашивание по Граму, микроскопия . 3) Выделение чистой культуры и определение антибиотикочувствительно-

сти посевом на плотные питательные среды.

Посевы инкубируют при 370С 24-48 часов в аэробных и анаэробных условиях.

III этап исследования.

1)Изучение характера роста на плотных средах. Определение чистоты выделенной культуры микроскопически.

2)Идентификацию выделенной культуры проводят с использованием соответствующих тест-систем.

3)Определение антибиотикочувствительности микроорганизмов.

Посевы инкубируют при 370С 24-48 часов. IV этап исследования.

Учет результатов.

Вывод (определение вида выделенной культуры и ее антибиотикограмма).

13

Занятие №2

Тема. Микробиологическая характеристика менингококковой и гонококковой инфекций. Гемофильные бактерии, бордетеллы, легионеллы и синегнойная палочка.

Цель занятия. Изучить характеристику менингококков, гонококков, гемофильных бактерий, бордетелл, легионелл, синегнойной палочки, микробиологическую диагностику вызываемых ими заболеваний, препараты для специфической профилактики и лечения.

I.Теоретические знания:

1.Характеристика менингококков, вызываемые заболевания. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингококковой инфекции.

2.Характеристика гонококков. Микробиологическая диагностика гонококковых инфекций.

3.Характеристика гемофильных бактерий, роль в патологии. Микробиологическая диагностика гемофильных инфекций.

4.Характеристика бордетелл. Микробиологическая диагностика коклюша и паракоклюша. Специфическая профилактика коклюша.

5.Характеристика легионелл, роль в патологии. Микробиологическая диагностика легионеллеза.

6.Синегнойная инфекция в патологии человека. Микробиологическая диагностика и специфическое лечение.

II.Практические навыки:

1.Световая микроскопия препаратов из чистых культур менингококков, гемофильных бактерий, бордетелл и синегнойной палочки, окрашенных по Граму.

2.Световая микроскопия нативных мазков из уретры больного острой гонореей, окрашенных метиленовым синим.

3.Изучить схему бактериологического исследования слизи из верхних дыхательных путей больного с подозрением на коклюш.

14

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1.Характеристика менингококков, вызываемые заболевания. Микро-

биологическая диагностика и специфическая профилактика менин-

гококковой инфекции.

Менингококки – Neisseria meningitidis.

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные диплококки бо-

бовидной формы, жгутиков и спор не имеют, в организме могут образовывать

капсулу.

Чистая культура Neisseria meningitides. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к условиям культиви-

рования, растут на сывороточном агаре, образуют мелкие гладкие прозрачные колонии. Строгий температурный оптимум 370С (при других температурах менингококки погибают) необходимо соблюдать как при культивировании, так и при транспортировке материала от больного в лабораторию.

Антигенная структура: по капсульным полисахаридным антигенам вы-

деляют 13 серогрупп, из которых наиболее патогенными для человека являются серогруппы А и С, вызывающие эпидемические вспышки.

Факторы патогенности менингококков:

1.Пили, белки наружной мембраны обеспечивают адгезию и инвазию в эпителий носоглотки;

15

2.Протеаза IgA расщепляет молекулы секреторных IgА, снижая местную защиту слизистых оболочек носоглотки;

3.Капсула защищает от фагоцитоза;

4.Ферменты инвазии: гиалуронидаза, нейраминидаза и др.;

5.Эндотоксин (ЛПС), основной фактор патогенности, который вызыва-

ет поражение кровеносных сосудов, что проявляется кровоизлияниями во внутренние органы и геморрагической сыпью на коже.

Источник инфекции: больной человек, бактерионоситель. Чаще (в 7080% случаев) болеют дети первых трех лет жизни.

Путь заражения: воздушно-капельный. Входные ворота инфекции слизи-

стая оболочка носоглотки.

Заболевания, вызываемые менингококками, представлены в табл. 6.

Микробиологическая диагностика менингококковых инфекций.

1.Бактериологический метод (основной): выделение чистой культуры возбудителя на сывороточных средах и определение его антибиотико-

чувствительности.

2.Бактериоскопический метод используется как обязательный ориенти-

ровочный. В мазках из нативного материала с окраской по Граму выяв-

ляется внутриклеточное расположение менингококков с характерной картиной незавершенного фагоцитоза.

3.Молекулярно-биологический метод: ПЦР.

16

Специфическая профилактика менингококковой инфекции проводится

только по эпидемическим показаниям менингококковой полисахаридной вак-

циной серогрупп А и С.

2.Характеристика гонококков. Микробиологическая диагностика гоно-

кокковых инфекций.

Гонококки – Neisseria gonorrhoeae.

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные диплококки бо-

бовидной формы, имеют микрокапсулу, неподвижны, спор не образуют.

N.gonorrhoeae. Мазок из гноя. Окраска метиленовым синим.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к питательным средам и температуре инкубации, температурный оптимум 370С, растут на сывороточ-

ных средах.

Факторы патогенности гонококков:

1.Пили, белки наружной мембраны обеспечивают адгезию и инвазию в цилиндрический эпителий мочеполовых путей, ингибируют фагоцитоз;

2.Капсула защищает от фагоцитоза;

3.Протеаза IgA расщепляет секреторные иммуноглобулины;

4.Эндотоксин (ЛПС) вызывает повреждение клеток и воспалительную реакцию ткани;

17

5. R-плазмиды (факторы множественной лекарственной устойчивости).

Источник инфекции: больной человек.

Пути заражения: половой, контактный, контактно-бытовой, интранаталь-

ный (во время родов).

Клиническая классификация гонококковой инфекции (приведена в со-

кращенном варианте) основана на локализации патологического процесса

(Клинические рекомендации «Гонококковая инфекция», 2020):

1.Гонококковая инфекция нижних отделов мочеполового тракта: уретрит,

цервицит, цистит, вульвовагинит и др. У женщин в 70% случаев без симптоматики;

2.Гонококковая инфекция мочеполовых органов: эпидидимит, орхит,

простатит, эндометрит, сальпингоофорит и др.;

3.Гонококковая инфекция глаз: конъюнктивит, офтальмия новорожден-

ных;

4.Гонококковый фарингит;

5.Гонококковая инфекция аноректальной области;

6.Гонококковая инфекция костно-мышечной системы: артрит, бурсит и др.;

7.Другие гонококковые инфекции: эндокардит, менингит, сепсис и др.

Микробиологическая диагностика гонококковой инфекции.

1.Бактериоскопический метод: только при исследовании отделяемого уретры у мужчин с выраженными симптомами уретрита.

2.Молекулярно-биологический метод: определение специфических фрагментов ДНК N.gonorrhoeae с помощью ПЦР. Материал на исследо-

вание зависит от локализации: отделяемое уретры, моча, отделяемое влагалища, шейки матки, мазок со слизистой оболочки ротоглотки, от-

деляемое слизистой оболочки прямой кишки, отделяемое конъюнктивы.

18

3.Бактериологический метод: выделение чистой культуры возбудителя на сывороточных средах и определение его антибиотикочувствительно-

сти. Материал – в зависимости от локализации.

4.Характеристика гемофильных бактерий, роль в патологии. Микробио-

логическая диагностика гемофильных инфекций.

В группу гемофильных (от греч. haima – кровь, philos – любить) объедине-

ны мелкие грамотрицательные бактерии, способные расти только на средах, со-

держащих кровь или ее производные. Многие гемофильные бактерии в норме обитают на слизистых оболочках дыхательных путей человека.

Основную роль в патологии человека играет Haemophilus influenzaе. В

странах с тропическим климатом также регистрируют H.ducreyi.

Морфо-тинкториальные свойств: грамотрицательные мелкие палочки,

жгутиков и спор не имеют. H.influenzae может образовывать капсулу в орга-

низме.

Haemophilus influenzae. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: требовательны к питательным средам, для культивирования необходимы факторы роста, обозначенные буквами X и V: X-

фактор: гемин, содержащийся в эритроцитах; V-фактор: кофактор окислитель-

но-восстановительных ферментов (НАД). На шоколадном агаре (с прогретой кровью) образуют мелкие блестящие гладкие колонии.

19

Антигенная структура H.influenzae: по капсульному антигену подразде-

ляют на 6 серотипов, из них наиболее патогенный H.influenzae типа b.

Факторы патогенности H.influenzae:

1.Пили обеспечивают адгезию к эпителиальным клеткам;

2.Капсула защищает от фагоцитоза, обладает антикомплементарным дей-

ствием;

3.Протеаза IgA расщепляют секреторные IgA;

4.Эндотоксин (ЛПС) стимулирует инвазию и развитие воспаления;

Источник инфекции: больной человек, бактерионоситель.

Путь передачи: воздушно-капельный.

H.influenzae вызывает различные заболевания (табл. 7).

Таблица 7 Основные заболевания, вызываемые гемофильными бактериями и

материал для бактериологического исследования

Микробиологическая диагностика.

1.Бактериологический метод с определением антибиотико-

чувствительности возбудителя.

2.ПЦР.

20