Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
методичка_леч_2сем.docx
Скачиваний:
25
Добавлен:
09.02.2015
Размер:
303.23 Кб
Скачать

ГБОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова. Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии

Курс: « специальная микробиология » раздел: «частная бактериология»

Занятие 1. Дата _____. Тема: «Возбудители кишечных инфекций: брюшного тифа, сальмонеллезов»

Таблица 25. Протокол выделения и бактериологического исследования гемокультуры (крови) больного при брюшном тифе

Материал для исследования – кровь больного

Цель исследования – выделение и идентификация возбудителя

Предварительный клинический диагноз – брюшной тиф ( ?)

День исследования

Ход исследования

Результат исследования

1

Посев крови больного в соотношении 1:10 на 10% желчный бульон для накопления

2

3

4

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ: Из крови больного выделены бактерии вида _______________ фаготип _______.

Таблица 26. Протокол бактериологического исследования рвотных масс больного при сальмонеллезе

Материал для исследования – рвотные массы больного

Цель исследования – выделение и идентификация возбудителя

Предварительный клинический диагноз – сальмонеллез ( ?)

День исследования

Ход исследования

Результат исследования

1

2

3

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ: Из рвотных масс больного выделены бактерии вида _____________________.

Занятие 2. Дата _____. Тема: «Возбудители кишечных инфекций: брюшного тифа, сальмонеллезов (продолжение). Возбудители колиэнтерита, шигеллезов»

Таблица 27. Протокол бактериологического исследования фекалий (копрокультуры) больного при колиэнтерите

Материал для исследования – фекалии больного

Цель исследования – выделение и идентификация возбудителя

Предварительный клинический диагноз – колиэнтерит ( ?)

День исследования

Ход исследования

Результат исследования

1

2

3

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ: Из фекалий больного выделены _______________________ серогруппы _________.

Таблица 28. Протокол бактериологического исследования фекалий (копрокультуры) больного при шигеллезе (бактериальной дизентерии)

Материал для исследования – фекалии больного

Цель исследования – выделение и идентификация возбудителя

Предварительный клинический диагноз – дизентерия ( ?)

День исследования

Ход исследования

Результат исследования

1

2

3

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ: Из фекалий больного выделены _______________________ .

Таблица 29. Принципы классификации сальмонелл по схеме Кауфмана-Уайта

Серогруппа, серовар

O-антиген

H-антиген

Фаза 1

Фаза 2

Серогруппа 2 (A)

  • S. Paratyphi A

1, 2, 12

a

(1, 5)

Серогруппа 4 (B)

  • S. Paratyphi B

(S. Schottmuelleri)

1, 4(5), 12

b

1, 2

  • S. Typhimurium

1, 4(5), 12

i

1, 2

Серогруппа 6,7 (C)

  • S. Choleraesuis

6, 7

( c )

1, 5

Серогруппа 9 (D1)

  • S. Typhi

9, 12

d

-

  • S. Enteritidis

1, 9, 12

g, m

(1, 7)

  • S. Dublin

1, 9, 12

g, p

-

  • S. Moscow

9, 12

g, q

-

Серогруппа 3,10 (E1)

  • S. London

3, 10

l, v

1, 6

Таблица 30. О-РПГА с парными сыворотками при диагностике брюшного тифа

Результаты

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

контроль

Сыворотка 1

Сыворотка 2

ВЫВОДЫ: РПГА _____________________ (положительная /отрицательная).

  • Титр антител к ___-антигену в первой сыворотке _________.

  • Титр антител к ___-антигену во второй сыворотке ________.

  • ___ -кратное увеличение титра антител во второй сыворотке ___________ (подтверждает/не подтверждает) диагноз ___________________________ .

Таблица 31. Биохимические свойства энтеробактерий

Название бактерий

Среда Клиглера

Цитрат Симмонса

Среда с лизином

  • Незасеянные пробирки

  • Salmonella sp.

  • Shigella sp.

  • Escherichia sp.

__Энтеробактерии__ ___Vibrio cholerae___

____________________ ____________________

Окраска по Граму Окраска по Граму

Занятие 3. Дата _____. Тема: «Возбудители кишечных инфекций: брюшного тифа, сальмонеллезов, шигеллезов (продолжение). Возбудитель холеры»

Таблица 32. Протокол бактериологического исследования испражнений больного при холере

Материал для исследования – испражнения больного

Цель исследования – выделение и идентификация возбудителя

Предварительный клинический диагноз – холера ( ?)

День исследования

Ход исследования

Результат исследования

1

  • Посев испражнений больного на 1% пептонную воду и

  • щелочной агар

2

Постановка реакции агглютинации на стекле с адсорбированными монорецепторными холерными сыворотками О1 и О139

3

(если необходимо)

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ: Из фекалий больного выделены _______________________ серогруппы _________.

Таблица 33. Дифференциация холерных вибрионов

Признак

V. cholerae,

биовар CLASSIC

V. cholerae,

биовар Эль-Тор

Агглютинация O1 -сывороткой

+

+

Лизис специфическими бактериофагами:

  • бактериофаг C

  • бактериофаг Эль-Тор

+

-

-

+

Агглютинация куриных эритроцитов

-

+

Гемолиз эритроцитов барана

-

+ или -

Чувствительность к полимиксину

чувствителен

устойчив

Гексаминовый тест

-

+

Реакция Фогес-Проскауэра

--/+

+

Занятие 4. Дата ______. Тема: «Возбудители кишечных бактериальных инфекций (окончание). Патогенные и условно-патогенные микобактерии. Возбудители дифтерии, коклюша и паракоклюша».

Mycobacterium tuberculosis ___ M. bovis __M. tuberculosis__

____(в ткани легкого) ____ (чистая культура) __(cord-фактор)__

Окраска по Цилю-Нельсену Окраска по Цилю-Нельсену Окраска по Цилю-Нельсену

__Bordetella pertussis__ Corynebacterium diphtheriae

__(чистая культура)__ ____(чистая культура)____

Окраска по Граму Окраска по Нейссеру

Таблица 34. Дифференциация бордетелл

Признаки

Bordetella pertussis

B.parapertussis

Рост на МПА

--

+

Время культивирования

3-5 сут.

48 ч.

Образование колоний коричневого цвета

--

+

Образование уреазы

--

+

Образование каталазы

--

+

Рост на среде с тирозином

--

+

(коричневый пигмент)

Реакция агглютинации с типовыми сыворотками к:

  • Bordetella pertussis

  • B. parapertussis

+

--

--

+

Таблица 35. Дифференциация коринебактерий

Признаки

C. diphtheriae

C.pseudodiphtheriticum

Зерна волютина на полюсах (два в каждой клетке)

+

--

Диффузное расположение зерен волютина (от 1 до 3 в каждой клетке)

--

+

Расположение клеток под углом друг к другу

+

--

Параллельное расположение клеток («частоколом»)

--

+

Ферментация глюкозы

+

--

Ферментация крахмала

Биовар gravis “+” / mitis “--“

--

Цистиназная активность

+

--

Уреазная активность

--

+

Токсигенность

+/--

--

Агглютинабельность типовой сывороткой

+

--

Занятие 6. Дата ______. Тема: «Патогенные кокки: стафилококки, стрептококки, нейссерии»

Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes S.aureus в гное Neisseria gonorrhoeae в гное

(в органах) (чистая культура) _ ______________ (незавершенный фагоцитоз)

Окраска водным фуксином Окраска по Граму Окраска по Граму Окраска метиленовым синим

Neisseria meningitidis Рисунок 11. Факторы вирулентности стафилококков

(чистая культура) Плазмокоагулаза Рост на 5% кровяном агаре Рост на ЖСА

(β-гемолиз) (лецитовителлаза)

Окраска по Граму

Таблица 36. Этиологически значимые виды стрептококков

Вид

Серогруппа

Тип гемолиза

Дифференцирующий признак

Биотоп

Примеры заболеваний

S. pyogenes

A

β- гемолиз

Чувствителен к бацитрацину

Кожа, ротоглотка

Фарингит, ангина, пневмония, сепсис, скарлатина, рожа, ревматизм, гломерулонефрит, септический эндокардит

S. agalactiae

B

β- гемолиз

Устойчив к бацитрацину

Женские половые органы

Неонатальный менингит, сепсис

Enterococcus faecalis

D

α – или β - гемолиз

Устойчив к 6,5% NaCl; образование колоний черного цвета на желчном агаре с эскулином

Кишечник, уретра, женские половые органы

Инфекции мочевыводящих, желчевыводящих путей, эндокардит

S. pneumoniae

Не определена

α - гемолиз

Чувствителен к желчи и оптохину

Верхние дыхательные пути, ротоглотка

Пневмония, отит, синусит, сепсис

S. viridians

S. mitis, S. mutans

Не определена

α - гемолиз

Устойчивы к желчи и оптохину

Ротоглотка

Инфекционный эндокардит, кариес

Таблица 37. Сравнительная характеристика стрептококков

Вид

Морфология, тинкториальные свойства

Среда для культивирования

Культуральные свойства

Факторы патогенности

Видовая дифференциация

Внутривидовая дифференциация

S. pneumoniae

Грам+ ланцеторидные диплококки,

имеют капсулу

5% кровяной агар, 37оС, СО2-инкуботор

Мелкие колонии с зоной зеленящего гемолиза

  • Капсула

  • IgA-протеаза

  • Гиалуронидаза

Чувствителен к желчи и оптохину

По капсульному антигену на серовары (>80)

S. pyogenes

Грам+ кокки, расположенные цепочкой

5% кровяной агар, 37оС, СО2-инкуботор

Мелкие колонии с зоной полного гемолиза

  • М-протеин

  • Гиалуронидаза

  • Стрептокиназа

  • Стрептолизин

Чувствителен к бацитрацину

По типовому белковому М-антигену на серовары

(по Ланцфельд)

Таблица 38. Протокол бактериологического исследования гноя

Материал для исследования – гной из абсцесса

Цель исследования – выделение и идентификация возбудителя

Предварительный клинический диагноз – абсцесс мягких тканей бедра

День исследования

Ход исследования

Результат исследования

1

  1. Приготовление мазка из гноя и окраска по Граму.

  2. Посев гноя на желточно-солевой и 5% кровяной агар

2

  1. Микроскопия колоний (окраска по Граму).

  2. Пересев на скошенный МПА

3

  1. Приготовление мазка и окраска фуксином (для определения чистоты выделенной культуры)

  2. Посев на цитратную кроличью плазму и среду Гисса с маннитом (под вазелиновым маслом для создания анаэробных условий)

  3. Фаготипирование культуры типовыми стафилококковыми бактериофагами:

__________________________

  1. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам

  • Доксициклин - ____мм

  • ___________________- ____ мм

  • ___________________ - ___ мм

  • ___________________ - ___ мм

  • ___________________ - ___ мм

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ: Из гноя больного выделены бактерии вида ________________ фаготип ____, чувствительные к ________________________ ______________________________________ устойчивые к __________________ ___________________________________.

Занятие 7. Дата ______. Тема: «Патогенные анаэробы: клостридии и неспорообразующие анаэробы»

Clostridium perfringens Clostridium perfringens Clostridium tetani

(в органах) (чистая культура) (чистая культура)

Окраска фуксином Окраска по Граму Окраска по Граму

Clostridium botulinum Peptostreptococcus anaerobius (чистая культура) чистая культура)

Окраска по Граму Окраска фуксином

Таблица 39. Определение типа ботулинического токсина с помощью РОНГА (РПГА)

Ингредиенты

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

Конт-роль

Изотонический раствор натрия хлорида, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Исследуемый материал (промывные воды желудка, разведение 1:5), мл

0,5

вылить

0,5

---

Антительный эритроцитарный диагностикум соответствующего серотипа, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

РЕЗУЛЬТАТЫ:

  • с поливалентным диагностикумом АВЕ

  • с диагностикумом А

  • с диагностикумом В

  • с диагностикумом Е

ВЫВОД:

Рисунок 12. Tесты для ускоренной диагностики инфекций,

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]