6. Методы диаг в разные сроки заб: материал для исследования, на какие среды производится посев, что обнаруживают?

Учитывая цикличность течения заб, материал для исслед и метод исслед опред стадией течения болезни.

В 1ые дни заб наблюдается бактериемия, поэтому на 1-й нед заб и в течение всего лихорадочного периода испол метод гемокультуры: посев крови в желчный бульон с последующим Пересевом на дифференциально-элективные среды (Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар). Выделенную культуру идентифицируют по биохим св-вам и антигенной структуре, а выделенную культуру S. Typhi типируют Vi-фагами для опред ист инф. С конца 2-й нед заб производят выделение копро-, урино- и би- ликультур, т. е. материалом для исслед явл моча, испражнения, желчь. Начиная со 2-й нед заб проводят серологическое исслед с целью опред наличия и типа антител. Исслед проводится постановкой РНГА. РНГА ставят с О-, Н- и Vi-диагностикумами. «+» считают диагностический титр не менее 1:200. Ранее для серологической диаг применяли развернутую р-цию агглютинации Видаля. В наст вр серологическое исслед проводят также постановкой ИФА.

7. Серологическая диагностика: материал для исследования, что обнаруживают в этом материале?

Диаг. основана на выявлении живых бак. возбуд в пробах биологич. субстратов в зависимости от стадии заб; идентификации возбуд по культурально-ферментативным св-вам, антигенной характ. до ур. Серолог. варианта (S. Typhi), опред. чувствительности к антимикробным препаратам и проведения молекулярно-эпидемиологических исслед. На 1ой нед заб берут кровь для выделения гемокультуры. С соблюдением правил асептики из локтевой вены берут кровь в кол-ве 10 мл, засевают в 100 мл желчного бульона, направляют в лаб. Выделенную чистую культуру (гемокультуру) идентифицируют по морфологии, биохим. Св-вам и антигенной структуре, определяют фаговар. Начиная с 3ей нед заб, возбуд. выделяют из испражнений, мочи, желчи. В сыворотке крови опред. антитела, титр кот нарастает к концу 1ой - началу 2ой недели заб. Ставят р-цию агглютинации по Видалю, РНГА с эритроцитарными диагностикумами, ИФА. Для выявления бактерионосительства исслед. с целью обнаружения возбуд. испражнения, мочу, желчь; с целью обнаружения Vi-антигена ставят РНГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом.

8. Методика постановки реакции Видаля и рнга. Какие антигены нужны в этих реакциях?

Серолог. анализ, проведенный с помощью р-ции Видаля, позволяет выявить в человеч. организме иммунные антитела к возбуд. брюш тифа - бактериям рода Salmonella enterica, серотипа typhi.

Анализ проводится след образом: исслед. сыворотку разводят, к пробам добавляют пара- и брюшнотифозные диагностикумы (стандартные эритроциты, сенсибилизированные антигенами возбуд.), выдерживают при Т +37 градусов 2 часа. Позитивной считается р-ция, при кот образовался осадок в виде белесых хлопьев: при О-агглютинации осадок мелкозернистый, при Н – крупными пластинками. При негативной реакции жидкость в пробирке мутная, а осадок отсут. Основана на том, что эритроциты, на кот предварительно адсорбированы антигены, приобретают способность агглютинироваться в присутствии гомологичных сывороток (антител). Методика постановки РНГА для обнаруж. и опред. титра антител заключается в след.: к последовательным 2-кратным разведениям сыворотки добавляют равные дозы эритроцитов, сенсибилизированных антигеном; смесь оставляют на 2—3 ч при комнатной Т или на 16—18 ч при 4 °С; учитывают результаты. Если в сыворотке содержатся антитела к вирусу, кот были сенсибилизированы эритроциты, наблюдают гемагглютинацию, кот оценивают в крестах. За титр антител в сыворотке принимают наивысшее разведение сыворотки, кот еще обеспечивает гемагглютинацию не менее чем на 2 креста. РНГА сопровождается всеми соответствующими контролями. Обычно ставят реакцию микрометодом.

РНГА позволяет решать след диагнос. задачи: · обнаружить антитела и опред. их титр в сыворотке крови с помощью известного эритроцитарного антигенного диагностикума; · обнаружить и идентифицировать неизвестный вирус с помощью известного эритроцитарного антительного диагностикума. Достоинства РНГА: высокая чувствительность, простота техники постановки и быстрота ответа. Однако важно отметить, что возникают большие трудности в приготовлении стабильных эритроцитарных диагностикумов (большая зависимость от чистоты испол компонентов, необход. подбора режима фиксации, танизации и сенсибилизации эритроцитов для каждого вида вируса).