1. Микроскопирование

В чистой культуре - мелкие кокки с капсулой

2. Биохимические свойства

слабо ферментируют до кислоты без газа глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу, образуют сероводород.

3. Антигенная характеристика - РА с туляремийной агглютинирующей сывороткой

Содержит соматический О-и поверхностный Vi- антигены. Имеют антигенную близость с бруцеллами. В R- форме теряют Vi- антиген, а вместе с ним вирулентность и иммуногенность.

4. Фаготипирование невозможно, связи с высокой специфичностью механизмов взаимодействия бактерий и паразитирующих в них вирусов.

5. Чувствительность к антибиотикам –

используют метод серийных разведений препаратов в плотной питательной среде (МСР) и диско-диффузионный метод (ДДМ).

Серодиагностика - используют развернутую реакцию агглютинации, РПГА, РСК на

холоде, РИФ.

Аллергические пробы применяют для ранней диагностики туляремии. Используют два вида тулярина и 2 способа их введения: накожный и внутрикожный. Результат отмечают в динамике через 2-4-36-48 часов. Положительный – инфильтрат не менее 5 мм

10. В клинику поступил больной с предварительным диагнозом сибирской язвы, кожная форма (?). В отделяемом карбункула обнаружены грамположительные палочки, расположенные единично, попарно или короткими цепочками, напоминающими бамбуковую трость. На чашке с МПА из отделяемого карбункула выросли колонии, край которых напоминает львиную голову. В мазке-отпечатке органа белой мыши на красном фоне видны крупные, расположенные цепочкой палочки, окруженные бесцветной капсулой, общей для всей цепочки (окраска фуксином). Перечислите микробиологические методы, подтверждающие этиологию заболевания.

Микроскопический метод – окраска препарата по Граму (грамположительные палочки, расположенные единично, попарно или короткими цепочками, напоминающими бамбуковую трость)

Бактериологический метод

1. Посев на кровяной МПА. Культивирование при 37 градусах

2. Учет характера роста

Шероховатые колонии R формы в виде «головы медузы», края которых при малом увеличении микроскопа имеют вид вьющихся локонов или «львиной гривы»

3. Пересев колонии на скошенный МПА для выделения чистой культуры. 37 градусов Цельсия 18-20 часов

4. Идентификация

тест «жемчужного ожерелья» - На поверхность МПА в чашке Петри с 0,5 и 0,05 ЕД/мл пенициллина засевают 3-ча­совую бульонную культуру выделенного микроорганизма, через 3 ч инкубирования при 370 С готовят мазки, в которых при микроскопии находят «жемчужные ожерелья» в виде округлившихся стрептобацилл сибирской язвы. Почвенные ба­циллы сохраняют форму палочек, расположенных цепочками.

1. Микроскопирование

Крупные грамположительные палочки, расположенные одиночно или короткими цепочками, окруженными тонкими бесцветными капсулами.

2. Биохимические свойства

Пересев на среды пестрого ряда

ферментирует до кислоты глюкозу, сахарозу, фруктозу, мальтозу, крахмал, инулин,

характеризуется протеолитической и липолитической активностью. Гидролизуют крахмал,

образуют ацетилметилкарбинол. Вьщеляют желатиназу, обладают слабой гемолитической,

лецитиназной и фосфатазной активностью.

3. Антигенная характеристика

Капсульные антигены ( Аг ) сибирской язвы представлены пол и пептидами, соединёнными с молекулами D-глутаминовой кислоты, что отличает их от прочих капсульных антигенов ( Аг ) сибирской язвы.

Соматические антигены ( Аг ) сибирской язвы представлены полисахаридами клеточной стенки

Токсин состоит из трёх термолабильных компонентов и включает протективный Аг (взаимодействует с мембранами клеток и опосредует проявление активности других компонентов); летальный фактор (проявляет цитотоксический эффект и вызывает отёк лёгких) и отёчный фактор (вызывает развитие отёков различных тканей).

4. Фаготипирование - с применением бактериофагов Гамма А-26 и 186

5. Чувствительность к антибиотикам – используют метод серийных разведений препаратов в плотной питательной среде (МСР) и диско-диффузионный метод (ДДМ).Чувствительны к пенициллину, цефалоспоринам, тетрациклинам, рифампицинам, аминогликозидам, фторхинолонам

Биопроба

В биопробе патологический материал или испытуемую культуру вводят подкожно: морским свинкам в паховой области, мышам в корень хвоста. Обычно мыши погибают через 1-2 суток, морские свинки — через 2 -4 суток. Наблюдение за животными продолжают в течение 10 дней. У павших животных исследуют печень, селезенку, лимфатические узлы, почки, кровь из полостей сердца, места введения исследуемого материала. О наличии возбудителя сибирской язвы свидетельствуют типичная патолого-анатомическая картина у подопытных Животных: отек в месте введения исследуемого материала, темная не свернувшаяся кровь, кровоизлияния в клетчатке, рыхлая селезенка и плотная красная печень.

Микроскопический метод В мазках-отпечатках из органов и крови при окраске фуксином

красном фоне видны крупные, расположенные цепочкой палочки, окруженные бесцветной капсулой, общей для всей цепочки

Так же можно проводить серологическую диагностику, когда не удается обнаружить возбудителя в материале

реакцию латексной агглютинации или РПГА с протекгивным сибиреязвенным АГ. Сибиреязвенные антигены определяют в РИФ, ИФА, РСК, РНГА, РП

аллергические пробы с антраксином.