2. Биохимические свойства –

А) C.perfringens расщепляет с образованием кислоты и газа глюкозу, ксилозу, галактозу, сахарозу, мальтозу, лактозу и др. углеводы, не сбраживает маннит, дульцит, редко салицин и инулин. Восстанавливают нитраты, расщеплять лактозу, образовывать лецитиназу. Протеолитическая активность слабая: разжижает желатин, не разлагает казеин.

Б) Cl. tetani инертны, сахара не расщепляют (иногда глюкозу, лактозу, сахарозу; протеолитическая активность слабая; медленно свертывают молоко (4-7 дней) и разжижают желатин; образуют желатиназу и рениноподобный фермент, восстанавливают нитраты.

3. Экзотоксин – определяется реакциями: преципитации, нейтрализации на биологическом объекте (мыши).

4. Антигенная характеристика –

У С. tetani выявляют О- и Н-Аг. По жгутиковым Аг (Н-Аг) выделяют 10 сероваров. Все серовары столбняка продуцируют идентичные по своим антигенным свойствам тетаноспазмин и тетанолизин.

C. perfringens разделяют на пять сероваров, которые обозначаются большими латинскими буквами А, В, С, D и Е. Эти серовары отличаются друг от друга по антигенным и биохимическим свойствам своих токсинов.

5. Чувствительность к антибиотикам – диско-диффузионным методом

Биологический метод

Исследуемый материал эмульгируют в физиологическом растворе, фильтруют и вводят белым мышам по 0,5 мл под кожу. Контрольным животным вводят фильтрат, смешанный с антитоксической сывороткой.

При наличии в материале столбнячных палочек или их токсина у зараженных мышей в течение 1-2 суток появляются характерные признаки - несгибаемый хвост («хвост трубой»), взъерошенная шерсть, а затем типичные спазмы, начинающиеся с мышц в месте введения материала и далее переходящие на все мышцы. При этой характерной картине животные погибают. Контрольные животные остаются живыми.

9. В стационар поступил пациент с клиникой ботулизма. В лабораторию доставлены рвотные массы, остатки консервов (предполагаемый источник заражения). Составить алгоритм микробиологического исследования материала.

Бактериоскопический – окраска по Граму, грамположительные палочки с закругленными концами, образуют споры и имеют вид веретена. Капсулой не обладают, перитрихи.

Бактериологический метод:

1. Накопление микроорганизмов – посев на среды Китта-Тароции в 2 пробирках. Одну пробирку необходимо нагреть до 60 градусов 15 минут для выведения C. Botulinum типа Е, вторую 80С в течение 20 минут (нагревание необходимо, чтобы убить вегетативные формы). Инкубирование 2 суток при 37С в анаэростате.

2. Оценка роста

При наличии роста на среде Китта-Тароции наблюдается помутнение и газообразование.

2. Культуру пересеивают на кровяной сахарный агар для выделения чистой культуры

Инкубируют при 37С 24 часа.

На кровяном агаре в чашках Петри вырастают колонии в виде росинок с блестящей поверхностью и ровными или изрезанными краями (R-форма).

Идентификация: