III раздел – Ситуационные задачи (Лечебное дело)

1. В лабораторию поступила мокрота пациента с патологическим процессом в легких. Составить алгоритм микробиологического исследования биоматериала.

Этиологическим компонентом в патологическом процессе в легких могут быть разные микроорганизмы: стафилококки, стрептококки, M. Tuberculosis, вирусы, грибы, риккетсии, хламидии, микоплазмы,

Алгоритм исследования стафило- и стрептококков

Бактериоскопия – окраска по Граму

Стафилококки - грамположительные кокки расположенные группами по 2-3 бактерии

Стрепто- грамположительные цепочки кокков

Бактериологический метод

1. Посев на ЖСА, кровяной мясо-пептонный агар. Засеянные среды выдерживают при 37 градусах сутки.

2. Просмотр характера и массивности роста

Стафилококки - на ЖСА ровные края, гладкая поверхность, вокруг колонии радужный венчик, цвет пигмента от золотистого до белого. На кровяном МПА вокруг колоний зоны гемолиза

Стрептококки - колонии мелкие, круглые, мутноватые и матовые. Альфа гемолиз- зеленоватая зона вокруг колони, бета гемолиз – прозрачная зона гемолиза

3. Пересадка на скошенный мясо-пептонный агар (стафило), сахарный МПБ (стрепто) колоний для выделения чистой культуры. Пробирки помещают в термостат при 37 градусах на 18-20ч.

Идентификация

1. Микроскопирование

Стафило - фиолетовые кокки, располагающиеся группами похожими на гроздья винограда;

Стрепто - фиолетовые кокки, располагающиеся цепочкой;

2. Биохимические свойства

Стафило - посев на среду Гисса, каталаза - положительны, оксидаза - отрицательны, ферментируют углеводы до кислоты без газа, разжижают желатин с образованием воронки, образуют сероводород, индол не образуют.

Стрепто - посев на среду Гисса, каталаза – отрицательно, оксидаза – положительно, ферментируют углеводы до кислоты без газа, индол не образуют, ферментируют глюкозу с образованием молочной кислоты

3. Антигенная характеристика

Стафило - наличие тейховой кислоты и белка А клеточной стенки

Стрепто - для определения серогруппы применяют реакцию преципитации в жидкой среде с использованием солянокислых экстрактов, полученных из стрептококков, и диагностических групповых сывороток.

4. Фаготипирование - с помощью 22 фагов международного набора для проведения

5. Чувствительность к антибиотикам –

Стафило - методом диффузии в агаре с помощью стандартных дисков или методом серийных разведений.

Стрепто - метод серийных разведений в бульоне необходимо использовать бульон Мюллера-Хинтон.

Серологический метод

Стафилококки

1. Определение титра анти-а-токсина в сыворотке крови больных реакцией торможения гемолиза по Выгодчикову.

2. Определение титра АТ к риботейхоевой кислоте,

3. Проведение реакции аутоагглютинации

Стрептококки

1. Определение наличия в крови стрептококкового АГ в РСК и специфических стрептококковых антител к токсинам.

2. Антистрептолизин О определяют в реакции нейтрализации.

Заключение

2. В стационаре у пациента с диагнозом «Острая бронхопневмония» появилась дисфункция кишечника. Как установить этиологию диареи?

В следствие лечения пациента антибиотиками была нарушена норма флора кишечника и возник дисбактериоз. В условиях дисбактериоза некоторые микроорганизмы получают активный рост и могут вызвать патологические процессы.

Данный патологический процесс могли вызвать следующие микроорганизмы: грибы рода Candida, стафило- и стрептококки.

Алгоритм исследования стафило- и стрептококков

Бактериоскопия – окраска по Граму

Стафилококки - грамположительные кокки расположенные группами по 2-3 бактерии

Стрепто- грамположительные цепочки кокков

Бактериологический метод

4. Посев на ЖСА, кровяной мясо-пептонный агар. Засеянные среды выдерживают при 37 градусах сутки.

5. Просмотр характера и массивности роста

Стафилококки - на ЖСА ровные края, гладкая поверхность, вокруг колонии радужный венчик, цвет пигмента от золотистого до белого. На кровяном МПА вокруг колоний зоны гемолиза

Стрептококки - колонии мелкие, круглые, мутноватые и матовые. Альфа гемолиз- зеленоватая зона вокруг колони, бета гемолиз – прозрачная зона гемолиза

6. Пересадка на скошенный мясо-пептонный агар (стафило), сахарный МПБ (стрепто) колоний для выделения чистой культуры. Пробирки помещают в термостат при 37 градусах на 18-20ч.

Идентификация

6. Микроскопирование

Стафило - фиолетовые кокки, располагающиеся группами похожими на гроздья винограда;

Стрепто - фиолетовые кокки, располагающиеся цепочкой;

7. Биохимические свойства

Стафило - посев на среду Гисса, каталаза - положительны, оксидаза - отрицательны, ферментируют углеводы до кислоты без газа, разжижают желатин с образованием воронки, образуют сероводород, индол не образуют.

Стрепто - посев на среду Гисса, каталаза – отрицательно, оксидаза – положительно, ферментируют углеводы до кислоты без газа, индол не образуют, ферментируют глюкозу с образованием молочной кислоты