16. Осуществить приготовление "толстой капли" и мазков крови для исследования на малярию.

При изготовлении мазков палец держат проколом вверх. К выступившей капле крови прикасаются нижней поверхностью предметного стекла, отступив на 1,5 - 2 см от узкого края. Затем стекло переворачивают, берут в левую руку, а в правую - предметное стекло с шлифованными краями и сточенными уголками, Его узким краем под углом 45о касаются капли крови. Кровь растекается по краю шлифованного стекла, после чего быстрым движением этого стекла вперед делают мазок (рис.1). Последний должен быть тонким (эритроциты не должны налегать друг на друга) и располагаться в средней части стекла, не доходя до его боковых сторон и противоположного края, так как пораженные эритроциты в значительной степени группируются по периферии мазков.

При изготовлении толстых капель палец поворачивают проколом вниз. К выступающим каплям крови прикасаются предметным стеклом, на которое берут 2- 3 капли крови и затем иглой или углом другого предметного стекла кровь размазывают, чтобы получить на стекле овал диаметром около 1 см или полосу длиной 2 - 3 см. Слой крови не должен быть слишком толстым, так как в последнем случае при высыхании он превращается в корочку и легко отстает от стекла. После изготовления толстых капель их высушивают, положив стекла на горизонтальную поверхность.

Мазки крови высушивают на воздухе, фиксируют и окрашивают. Для фиксации применяют метиловый спирт (экспозиция 3 - 5 мин), этиловый 96o спирт (15 мин)

Фиксированные мазки высушивают на воздухе и окрашивают по методу Романовского - Гимза. Продолжительность окрашивания - 30 - 45 мин. После окраски препарат промывают слабой струей воды и высушивают на воздухе. На стекле поверх окрашенного мазка можно написать простым карандашом фамилию больного, номер и дату. Эта надпись хорошо сохраняется.

Толстые капли после высушивания на воздухе окрашиваются краской Романовского - Гимза без предварительной фиксации. Техника окрашивания такая же, как при окраске мазка. При этом происходит выщелачивание (гемолиз)гемоглобина из эритроцитов, и окрашиваются лейкоциты, кровяные пластинки и плазмодии. Если толстые капли сохраняли неокрашенными более недели, то их следует предварительно обработать дистиллированной водой в течение 10 - 15 мин, наливая воду непосредственно на препарат. Удалив со стекол дистиллированную воду вместе с выщелоченным гемоглобином, на них наливают красящий раствор. После окраски толстой капли препараты ополаскивают водой. Лучше всего промывать препарат, погружая его в баночку с водой, соблюдая осторожность, чтобы не смыть со стекла окрашенную каплю.

13. Осуществить забор материала от больного для проведения бактериологического, вирусологического, биохимического и других исследований (забор и посев крови, рвотных масс, промывных вод желудка, испражнений, забор и посев слизи из носа и зева, забор и посев испражнений для диагностики холеры- при возможности)

Взятие крови для бактериологического исследования.

1. Приготовить всё необходимое для взятия крови из вены:

- шприц, ёмкостью 20 мл

- иглу

- стерильные ватные шарики

- 70% спирт

- жгут

- подушечку

- лотки

- полученный из бактериологической лаборатории флакон с питательной средой, закрытый стерильной пробкой (среда Рапопорт)

- спиртовка

2. Объясните пациенту в доступной форме цель и ход процедуры.

3. Уложить или удобно усадить пациента.

4. Вымойте руки и наденьте перчатки.

5. Выполните венепункцию по общепринятым правилам стерильной иглой со шприцом и наберите в шприц 5-10 мл крови для посева.

6. Положите ватный шарик со спиртом на место венепункции и попросите пациента согнуть руку в локтевом суставе.

7. Обожгите над пламенем спиртовки извлечённую из вены иглу, горлышко бутылки или флакона с питательной средой.

8. Вылейте через обожжённую иглу из шприца кровь в питательную среду.

9. Обожгите над спиртовкой ватную пробку от флакона, удалённую во время посева, и закупорьте флакон.

10. Погрузите шприц, иглу, ватный шарик пациента, перчатки в ёмкость с дез р-ром.

11. Заполните сопроводительный документ и тотчас отправьте флакон с засеянной питательной средой в бак. лабораторию.

12. Если нельзя сделать этого немедленно, следует поместить флакон в термостат или тёплое место.

13. Кровь для вирусологического исследования берут в стерильную пробирку и помещают не в термостат, а в холодильник.

14. Вымойте руки с мылом и проведите гигиеническую дезинф

Алгоритм забора рвотных масс и промывных вод желудка для бактериологического исследования

При посеве рвотных масс и промывных вод используют селенитовый бульон двойной концентрации и обеспечивают соотношение посевного материала к среде 1:1. Засеяны у постели больного питательные среды непосредственно помещают в термостат. Все посевы выращивают при 37 ° С в течение 18-20 час.

Подготовить:

- установить с пациентом доверительное отношение, объяснить механизм проведении процедуры и получить согласие;

- перчатки, очки и маску;

- стерильную банку с плотно закрывающуюся крышкой;

- транспортный контейнер;

- клеёнку;

- бланки направлений;

- карандаш;

- ручку;

- стеклограф;

- контейнер для отходов;

- ёмкость с дез. раствором и ширму.

Действие:

- поставить ширму;

- вымыть и осушить руки (гигиенический уровень);

- надеть перчатки, маску и очки;

- наложить клеёнку на грудь пациента;

- во время рвоты поднести ко рту пациента банку и собрать 50-100 миллилитров рвотных масс;

- тщательно закрыть банку крышкой;

- пронумеровать банку и поставить в транспортный;

- убрать ширму и провести дезинфекцию помещения и оборудования;

- снять перчатки и опустить их в контейнер;

- вымыть (гигиенический уровень) и осушить руки;

- заполнить направление и отправить материал в лабораторию;

- заполнить медицинскую документацию.

Внимание!

- Банка должна быть без следов дезинфицирующих средства и консервантов.

- При промывании желудка нельзя применять растворы соды и марганца.

Алгоритм забора промывных вод желудка для бакисследования

Подготовить:

- установить с пациентом доверительное отношение, объяснить механизм проведения процедуры и получить согласие на ее проведение;

- перчатки, очки и маску;

- стерильную банку с плотно закрывающуюся крышкой;

- клеёнку;

- бланки направлений;

- карандаш;

- ручку;

- стеклограф;

- ёмкость с дез. раствором;

- контейнер для отходов и ширму.

Действие:

- поставить ширму;

- вымыть и осушить руки (гигиенический уровень);

- надеть перчатки, маску и очки;

- наложить клеёнку на грудь пациента;

- открыть банку и во время промывания собрать 50-100 миллилитров промывных вод;

- тщательно закрыть банку крышкой и пронумеровать;

- убрать ширму;

- провести дезинфекцию помещения и оборудования;

- снять перчатки и опустить их в контейнер;

- вымыть (гигиенический уровень) и осушить руки;

- заполнить направление и отправить банку в лабораторию;

- заполнить медицинскую документацию.

Внимание!

- Банка должна быть без следов дезинфицирующих средства и консервантов.

- При промывании желудка нельзя применять растворы соды и марганца.

Забор испражнений (2—3 г) производится стерильным деревянным шпателем или стеклянной палочкой из судна, горшка, специального лотка, а также непосредственно из прямой кишки с помощью ватных тампонов, металлических петель или через трубку ректоскопа. В судне или горшке не должно оставаться следов дезинфицирующего средства, для чего их необходимо тщательно промыть горячей водой. Нужно стремиться взять слизь, гной, фибринные пленки, избегая примеси крови в связи с ее бактерицидным действием. Забор материала из прямой кишки не зависит от числа дефекации и может быть сделан в любой момент. Для забора материала петлей (тампоном) больного просят лечь на бок с приведенными к животу бедрами и ладонями развести ягодицы. Петля осторожным движением вводится в задний проход на глубину 5—6 см и также осторожно вынимается. Затем петля помещается в стерильную пробирку и направляется в лабораторию. Лучше всего сразу же сделать посев материала на питательную среду.

Необходимо помнить, что посев испражнений производят прямым способом на чашки Петри со средой Плоскирева, Левина, Эндо, висмут-сульфит агаром или на среды обогащения (селенитовая, среда Мюллера и др.) с последующим пересевом на перечисленные выше среды для выделения энтеробактерий, на щелочной агар (1% пептонную воду с последующим пересевом на щелочной агар) - для вибрионов, МПА - для бацилл, МПА с фурагином - для выделения псевдомонад, ЖСА - для выделения стафилококков, среду Китта-Тароцци - для клостридий.

Мазок из зева

1. Осматривают полость рта. Обращают внимание на язык, миндалины, зев. Определяют место взятия отделяемого на исследование.

2. Осторожно придерживая пробку, извлекают стержень из пробирки, не касаясь ее наружных стенок и окружающих предметов. Пробирку ставят в штатив.

3. Левой рукой I, II и III пальцами берут шпатель. Просят пациента открыть рот. Прижимают шпателем язык, вводят тампон в полость рта и снимают отделяемое с определенного места.

4. Осторожно и быстро извлекают тампон из полости рта и, не касаясь наружных стенок пробирки и окружающих предметов, опускают его в пробирку.

5. В направлении указывают время взятия отделяемого.

6. Пробирку с направлением доставляют в лабораторию не позднее 2 ч с момента забора.

7. Результат исследования подклеивают в историю болезни.

Техника взятия мазка из носа:

1. Усаживают (укладывают) пациента, просят слегка запрокинуть голову.

2. Левой рукой берут из штатива пробирку, а правой извлекают стержень с тампоном. Сделать это нужно аккуратно, не касаясь тампоном окружающих предметов.

3. Пробирку ставят в штатив.

4. Левой рукой приподнимают кончик носа пациента, а правой легкими вращательными движениями вводят тампон в нижний носовой ход с одной стороны, а затем с другой на глубину 1,5 - 2,0 см.

5. Извлекают тампон и быстро опускают в пробирку, не касаясь ее наружных стенок.

6. Отправляют пробирку в бактериологическую лабораторию, указав время взятия мазка.

Если есть подозрение на дифтерию, то посев делают на кровяно-теллуритовый агар комнатной температуры. При использовании консерванта выращивание посева продолжается 2-3-е суток (вместо 1-2-х суток). После выделения культуры возбудителя и выявления дифтерийных палочек определяют степень их токсичности.

Если баканализ слизи из зева и носа нацелен на выявление другой инфекции (не дифтерии), то биоматериал берут дважды и помещают в пробирку с сахарным бульоном и на предметное стекло. Мазки на предметном стекле микроскопируют, пробирку с биоматериалом и консервантом выдерживают 24 ч., после чего делают пересев биоматериала на другие питательные среды (кровяной и шоколадный агар, среды Сабуро, Эндо и др.). Это помогает более точно выявить возбудителя и определить его свойства.

Материал от больного с подозрением на холеру для бактериологического исследования берется до начала специфического (антибактериального) лечения! При подозрении на холеру материалом для исследования являются испражнения больного и рвотные массы, которые берутся в количестве не менее 20 г стерильной стеклянной трубкой с грушей и помещаются в отдельные стеклянные банки, стерильные, с притертой пробкой.

На банку наклеивают этикетку из лейкопластыря, простым карандашом на них надписывается название материала, фамилия больного. Среда: 1% пептонная вода