Презентация / РыскинаЕА_Лекция по энзимологии
.pdfТЕСТЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ В КЛИНИЧЕСКОЙ
ПРАКТИКЕ
Автор – д.б.н. Рыскина Е.А.
▪Изменения в специфических ферментативных процессах могут быть причиной или следствием различных патологических состояний организма. Большинство ферментативных процессов локализованы внутри клеток, но определение активности ферментов вне клеточной среды (сыворотка, плазма, слюна, моча) может иметь диагностическое значение.
ПРИ ВЫБОРЕ МАТЕРИАЛА ИССЛЕДОВАНИЙ НЕОБХОДИМО УЧИТЫВАТЬ, ЧТО
▪ Для большинства ферментов не имеет значения, определяется их
активность в плазме или в сыворотке крови, но при свертывании крови некоторые ферменты будут освобождаться из тромбоцитов и их ферментативная активность в сыворотке крови будет выше, чем в плазме (кислая фосфатаза, лактатдегидрогеназа).
▪ При разведении биологической
жидкости активность фермента изменяется не всегда пропорционально, вследствие нарушения естественной среды фермента (белково-липидное окружение) и соотношения активаторов и ингибиторов.
▪ Определять активность фермента
следует в свежем биологическом материале.
▪ Антикоагулянты — группа лекарственных
препаратов, подавляющих активность свертывающей системы крови и препятствующих тромбообразованию за счет
пониженного образования фибрина.
Ферменты |
|
|
Температура хранения |
||
|
|
|
|
||
|
|
20-25°С |
2-8°С |
||
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
Аланинаминотрансфераза |
3 |
дня — 17% |
3 дня — 10% |
||
|
|
|
|
||
Аспартатаминотрансфераза |
3 |
дня — 10% |
3 дня — 8% |
||
|
|
|
|||
Альдолаза |
5 дней — 15% |
5 дней — 8% |
|||
|
|
|
|||
α-Амилаза |
5 дней — без снижения |
5 дней — без снижения |
|||
|
|
|
|||
Холинэстераза |
7 дней — без снижения |
7 дней — без снижения |
|||
|
|
|
|||
Креатинкиназа |
24 часа — 2% |
7 дней — 2% |
|||
|
|
|
|||
Креатинкиназа (МВ) |
1 час < 10%< |
24 часа < 10% |
|||
|
|
|
|
||
Глутаматдегидрогеназа |
3 |
дня — 15% |
3 дня — 5 % |
||
|
|
|
|
||
γ-Глутамилтранспептидаза |
|
до 7 дней |
7 дней — без снижения |
||
|
|
|
|
||
Лактатдегидрогеназа |
7 |
дней — 5% |
3 дня — 8% |
||
|
|
|
|
||
Лактатдегидрогеназа - 1 |
7 |
дней — 5% |
7 дней — 5% |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
7 дней без снижения |
7 дней без снижения |
||
Кислая фосфатаза |
стабилизация 0,5% |
||||
стабилизация 0,5% NaHSO4- |
|||||
|
|
NaHSO4 |
|||
|
|
|
|
||
Щелочная фосфатаза |
7 дней — 10% |
7 дней — без снижения |
|||
|
|
|
|
||
Лейцинаминопептидаза |
|
о 7 дней> |
7 дней — без снижения |
||
|
|
|
|
||
Липаза |
|
24 часа |
5 дней — без снижения |
||
|
|
|
|
|
|
УМЕНЬШЕНИЕ
АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ В СЫВОРОТКЕ ПРИ ХРАНЕНИИ
ДЛИТЕЛЬНОЕ
ХРАНЕНИЕ
ДОПУСКАЕТСЯ ТОЛЬКО ПРИ ОЧЕНЬ НИЗКОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ
(–10-20°С ), ПРИ ОДНОКРАТНОМ РАЗМОРАЖИВА НИИ.
МНОГИЕ ФЕРМЕНТЫ ПРИСУТСТВУЮТ ПОЧТИ ВО ВСЕХ КЛЕТКАХ ОРГАНИЗМА, ВМЕСТЕ С ТЕМ, КЛЕТКИ МИОКАРДА ИМЕЮТ СПЕЦИФИЧЕСКИЙ НАБОР ФЕРМЕНТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ПОЗВОЛЯЕТ УСТАНОВИТЬ ЛОКАЛИЗАЦИЮ ПАТАЛОГИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА, ЕГО ТЯЖЕСТЬ, СТАДИЮ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕЧЕНИЯ.
ДЛЯ ЭТОГО НАДО ЗНАТЬ:
▪Является данный фермент крови - секреторным (плазмоспецифичным), клеточным (органоспецифичным) или экскреторным
▪Внутриклеточную локализацию фермента (мембранный, цитоплазматический, митохондриальный и т.п.)
▪Наличие в биологическом материале активаторов и ингибиторов этого фермента (как правило есть в инструкции к набору для определения активности фермента)
▪Скорость синтеза фермента, скорость секреции из клеток, разрушения и экскреции
