Капиллярный метод перфильева (педоскопы)

Б. В. Перфильев и Д. Р. Габе (1961) сконструировали специальный капиллярный прибор-педоскоп, который служит для изучения почвенных микроорганизмов и их ассоциаций. При использовании этого прибора удается наблюдать ряд микробов, которые другими методами не выявляются. Это вызвано тем, что условия развития микроорганизмов в педоскопе, вставленном в почву, близки к условиям развития микробов в самой почве: и в том и в другом случае развитие идет в капиллярах, микробы растут, прикрепляясь к их стенкам. Педоскоп (рис. 3) состоит из набора 5-ходовых капиллярных ячеек с тонкой кровлей, вставленных в стеклянную обойму. Каналы капилляров имеют ширину 0,65—- 1,0 мм и высоту 0,2—0,3 мм. В них и происходит развитие микробов.

Для работы используются педоскопы, простерилизованные сухим жаром. В рыхлую почву педоскопы вставляются без каких-либо дополнительных приспособлений под небольшим нажимом, в уплотненную почву — при помощи специального пробойника (рис. 4). Помещать педоскопы в почву следует так, чтобы каналы ячеек приняли вертикальное положение, т. е. положение по преобладающему направлению движения почвенного раствора.

После экспозиции в течение месяца или более длительного срока педоскопы извлекаются из почвы. Их поверхность тщательно протирается, и затем микроорганизмы, развившиеся в каналах капилляров, рассматриваются или в живом состоянии, или после фиксации и окрашивания.

Для просмотра содержимого капилляров в живом состоянии педоскопы, извлеченные из почвы, помещают на специальный столик (см. рис. 4), который предохраняет каналы капилляров от высыхания. Можно ходы каналов просто замазать парафином или пластилином.

Для рассмотрения фиксированных препаратов микроорганизмы в извлеченных из почвы педоскопах фиксируют в парах осмиевой кислоты, для чего педоскопические ячейки на 10 мин помещают в чашку Петри, содержащую несколько капель 2%-ной осмиевой кислоты. Препараты после фиксации выдерживают 30 мин на воздухе и затем окрашивают эритрозином. Канадским бальзамом ячейки укрепляют на специальной тонкой пластине (толщина 0,3—0,2 мм), заменяющей предметное стекло, и пластину вставляют в специальный держатель (рис. 4), который помещают на столик микроскопа. Во время микроскопирования необходимо ввести иммерсионное масло в каналы капилляров.

МОДИФИКАЦИЯ КАПИЛЛЯРНОГО МЕТОДА ПО АРИСТОВСКОЙ

Т. В. Аристовская (1965) рекомендует использовать метод Перфильева в следующей модификации. Стенки капилляров перед закладкой педоскопов в почву покрываются определенными фракциями гуминовых веществ. Это дает возможность приблизить условия развития микробов в педоскопах к почвенным условиям, при этом выявляются новые специфические для почвы микроорганизмы.

Гумусовые вещества с 0,1%-ным раствором агара выливают в стерильную чашку Петри и педоскопы боковой стороной погружают в них. Среда должна заполнить все капилляры. Затем педоскопы вынимают, обтирают их поверхность и помещают в стерильные чашки Петри, где среда подсыхает и равномерно покрывает стенки каналов капилляров. В каналах не должно образовываться перемычек. Часть среды можно оттянуть из каналов при помощи стерильной фильтровальной бумаги. Подсушенные капилляры вставляют в почву.