Методические рекомендации к лабораторной работе № 16

Тема 4.5 Белки

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Исследование свойств белков.

ОПЫТ № 1 Цветные реакции на белки

Реактивы:

1. Белки водный раствор

2. Едкий натр, концентрированный раствор

3. Азотная кислота (p = 1,4 г/см³)

4. Сернокислая медь,

0,2 н. раствор

5. Уксуснокислый свинец,

0,1 н. раствор

6. Азотнокислый реактив

Оборудование:

1. Пробирки

2. Спиртовка

3. Белая шерсть

Ход опыта

1. Биуретовая реакция. В пробирку помещают исследуемый раствор белка, раствор щелочи, раствор сернокислой меди. Жидкость окрашивается в фиолетовый цвет. Фиолетовая окраска заметна даже в окрашенной водной среде вытяжка мяса.

Биуретовая реакция связана с наличием в белках пептидных группировок, которые обслуживают появление окраски при взаимодействии с солями меди.

2. Ксантопротеиновая реакция. В пробирку вносят раствор белка и раствор азотной кислоты. Появляется белый осадок. При нагревании реакционной смеси раствор и осадок окрашиваются в ярко-желтый цвет. Смесь охлаждают и добавляют раствор едкого натра. При этом желтое окрашивание переходит в ярко-оранжевое. Ксантопротеиновая реакция связана с наличием в белках ароматических аминокислот. Желтое окрашивание появляется в результате нитрования ароматических ядер. Появление оранжевой окраски определяется образованием более интенсивно окрашенных анионов.

3. Реакция на серу. В пробирку вносят комочек белой шерсти и раствор едкого натра и раствор уксусного свинца, нагревают содержимое пробирки на пламени спиртовки. Появляется коричнево-черный осадок сульфида свинца эта реакция на содержание серы в белках, ее дают белки содержащие цистин, цистеин, метионин.

4. Азотнортутная реакция. В пробирку помещают раствор белка, ртутный реактив, встряхивают содержимое пробирки и нагревают. Появляется характерное окрашивание - красное. Эту реакцию дают белки, в состав которых входят аминокислоты, содержащие свободный фенольный гидроксил (тирозин, триптофан).

Меры предосторожности

Азотная кислота - вызывает сильный химический ожог вследствие обезвоживания тканей: сильный химический ожог глаз, слизистой желудка. Обмыть пораженное место водой не менее 5 минут: глаза промыть чистой водой не менее 10 минут: желудок промыть чистой водой не менее 3 – х раз. После промывания кожи примочить ее 2 % раствором гидрокарбоната натрия. Обратиться в медпункт.

Едкий натр - вызывает сильный глубоко проникающий химический ожог кожи, сильный ожог глаз, возможно полная потери зрения. Сильный химический ожог слизистой желудка. Стряхнуть вещество, снять тампоном, смоченным растительным или минеральным маслом, интенсивно промыть пораженную кожу водой в течение 5 минут, промочить 2 % раствором уксусной кислоты и снова промыть чистой водой.

ОПЫТ № 2 Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами

Реактивы:

1. Белки, водные растворы

2. Азотная кислота (p = 1,4 г/см³)

3. Соляная кислота (p =1,19г/см³)

Оборудование:

1. Пробирка

ХОД ОПЫТА

В пробирку наливают концентрированный раствор азотной кислоты и осторожно, наклонив пробирку, по стенке добавляют раствор белка. Через несколько секунд (на границе раздела белка и кислоты образуется кольцо свернувшегося белка). При встряхивании количество свернувшегося белка увеличивается. Такой же опыт повторяют и с соляной кислотой. Осадок, выпавший при действии соляной кислоты, при встряхивании растворяется.

Концентрированные минеральные кислоты образуют с белками солеобразные соединения и одновременно вызывают свертывание белков. В большинстве случаев выпавший осадок растворим в избытке концентрированной кислоты (кроме азотной).