- •Министерство образования и науки республики казахстан
- •Утверждаю
- •Методическое указание
- •Методические указания обсуждены на заседании кафедры
- •Содержание
- •Правила по технике безопасности при работе в микробиологической лаборатории
- •Практическая работа №2 Приготовление питательных сред для культивирования микроорганизмов
- •Практическая работа №3
- •Литература
- •Практическая работа №4 Микроскопирование клеток дрожжей
- •Литература
- •Практическая работа №5 Тема: Клонирование дрожжей (1 пассаж)
- •Литература
- •Практическая работа №6
- •Литература
- •Практическая работа № 7. Клонирование дрожжей (3 пассаж)
- •Лабораторная работа № 5. Итоговая работа по клонированию дрожжей
- •Практическая работа № 9 Получение спирта
- •Физиология дрожжей и химизм спиртового брожения.
- •Характеристика дрожжей, применяемых в промышленности.
- •Практическая работа №13. Органолептическая оценка качества и определение подъемной силы прессованных дрожжей
- •Практическая работа № 14 Получение кормового микробного белка
- •Практическая работа № 15 Тема: Методы санитарно-гигиенического контроля в пищевой промышленности.
- •Список рекомендуемой литературы
Характеристика дрожжей, применяемых в промышленности.
Дрожжи, используемые для получения спирта, относятся к роду Saccharomyces. К этому роду отнесено семь видов, размножающихся вегетативно преимущественно в диплоидной фазе. Наибольшее значение имеет S. cerevisiae. К этому виду относятся дрожжи, используемые в хлебопечении, спиртовом производстве, пивоварении, производстве кваса.
На солодовом сусле в трёхсуточной
культуре при
клетки имеют сферическую, эллипсоидальную
или несколько удлинённую формы,
располагающиеся единично или парами,
иногда образуют короткие цепочки или
мелкие грозди.
В зависимости от размера разделяются на три морфологические группы:
штаммы, имеющие самые крупные клетки
;с наименьшими клетками
;промежуточные
.
Некоторые штаммы образуют длинные
клетки, достигающие
и более.
Огромное значение уделяется штаммам
S. cerevisiae.
Их подразделяют на расы низового и
верхового брожения. К расам низового
брожения относятся большинство винных
и пивных дрожжей, к расам верхнего
брожения – спиртовые, хлебопекарные и
некоторые пивные дрожжи. Дрожжи низового
брожения функционируют в производстве
при температуре
и ниже
,
а верхового – обычно при
.
В конце брожения низовые дрожжи оседают на дно, формируя плотный осадок, верховые – всплывают на поверхность и образуют «шапку». Способность последних подниматься на поверхность обусловлена тем, что клетки после почкования остаются соединёнными в небольшие цепочки, пузырьки углекислого газа поднимают их на поверхность.
По поведению в бродящей среде дрожжи разделяют на хлопьевидные и пылевидные. В основе этого разделения лежит различие в их флокуляционных свойствах. Хлопьевидные дрожжи оседают на дно, либо на поверхность. Пылевидные дрожи в течение всего процесса брожения находятся во взвешенном состоянии. Флокулируют дрожжи как низового, так и верхового брожения. Применение чистых культур специально селекционированных микроорганизмов – важный этап борьбы за качество и чистоту процесса брожения.
Чистые культуры дрожжей размножаются в производственных лабораториях на оптимальных для их роста средах, пересевая во всё возрастающие ёмкости. В цехах создают условия, необходимые для жизнедеятельности дрожжей в заданном направлении и позволяющие подавить рост вредных микроорганизмов.
На заводах в процессе длительного культивирования, особенно при непрерывных способах брожения, в результате спонтанного мутагенеза в дрожжевой популяции могут накапливаться мутанты, более приспособленные к условиям производства по сравнению с исходной расой.
Отбор новых рас дрожжей, как правило, проводят из ферментёров, в которых процесс брожения происходит в лабораторных условиях. Расы, дающие наилучшие показатели брожения, становятся производственными и широко применяются в практике.
В последние коды при селекции дрожжей для роста ряда отраслей промышленности (производство спирта из мелассы, хлебопечение) с успехом применяют метод гибридизации.
Материалы и оборудование. Колбы на 250 мл, сахароза, пекарские дрожжи, мерные цилиндры, пробки и изогнутые стеклянные трубки, водяные бани, электрические плитки, баритовая вода, пробирки, спиртовка, H2SO4 (конц.), пробирки с прямыми стеклянными трубками, K2Cr2O7.
Ход работы. В колбу ёмкостью 250 мл наливают 50 мл 20% водного раствора сахарозы и около 1 г пекарских дрожжей, разведённых в 10 мл 20% раствора сахарозы. (Дрожжи следует развести за час до занятия и поставить в тёплое место, чтобы повысить их активность). Параллельно, для получения этилового спирта путём прямой перегонки бражки ставят такой же опыт, но в расчёте на 2 л жидкости. Колбу закрывают пробкой с изогнутой стеклянной трубкой. Нижний конец трубки погружают в пробирку с баритом. Колбу с бродящей жидкостью помещают на водяную баню с температурой 35-40 0С. Через несколько минут после установки прибора в пробирку с баритом начинают поступать пузырьки газа, через 10-15 минут образуя равномерную цепочку. Можно считать, что к этому времени весь воздух из колбы вытеснен и выходит один из продуктов брожения – углекислый газ. В результате баритовая вода интенсивно мутнеет вследствие образования нерастворимого осадка ВаСО3. Доказать образование спирта пока невозможно из-за его малого количества. Поэтому колбы с бродящей жидкостью закрывают ватными пробками и оставляют до следующего занятия в комнате. На следующем занятие в жидкости обнаруживается спирт. В пробирку к 1-3 мл исследуемой жидкости добавляют кристаллик K2Cr2O7 и несколько капель H2SO4 и нагревают смесь на спиртовке. Цвет жидкости при этом изменится до зелёного вследствие восстановления хрома из шести до трёхвалентного состояния.
Выделяющийся уксусный альдегид ощутим по запаху.
Обнаружение спирта отгонкой.
Колбу с бродильной жидкостью закрывают пробкой, в которую вставлена идущая вверх прямая стеклянная трубка длиной 40-50 см. Колбу нагревают до равномерного кипения жидкости и к концу стеклянной трубки подносят горящую лучину.
Провести отгонку спирта из двухлитрового объёма бражки с прямым холодильником и повторить реакцию с бихроматом калия. Определить процентное содержание спирта в отогнанной фракции спиртометром и рассчитать выход по веществу в расчёте на растворённую сахарозу.
Контрольные вопросы:
Классификация дрожжей используемых для спиртового брожения.
Химизм спиртового брожения.
Характеристика дрожжей, применяемых в промышленности.
Получение этилового спирта в промышленности.
