Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

__________________________

Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии Фармакопейный анализ лекарственных веществ

Часть II

Методическое руководство к проведению лабораторно-практических работ по фармацевтической химии для студентов V курса заочного отделения фармацевтического факультета

Нижний Новгород

2012

Фармакопейный анализ лекарственных веществ Методическое руководство к проведению лабораторно-практических работ по фармацевтической химии разработано в соответствии с Федеральным государственным образовательным стандартом высшего профессионального образования по специальности «Фармация», утвержденном приказом №38 от 17 января 2011 г Министерством образования и науки Российской Федерации.

Руководство включает планы проведения и методики анализа фармацевтических субстанций и лекарственных форм на их основе, вопросы и задания для самостоятельной работы студента.

Составители:

ЗАНЯТИЕ 1

Анализ антибиотиков β-лактамного ряда.

Цель работы. Освоить способы анализа лекарственных средств β-лактамных антибиотиков (пенициллины и цефалоспорины).

Самостоятельная подготовка. Написать формулы и химические названия бензилпенициллина, его натриевой и новокаиновой солей, бензатинбензилпенициллина, феноксиметилпенициллина, полусинтетических пенициллинов: оксациллина натриевой соли, ампициллина, карбенициллина динатриевой соли, цефалексина, цефалотина натриевой соли. Изучить физические и химические свойства указанных веществ, методы качественного и количественного анализа. Изучить особенности получения лекарственных веществ-антибиотиков, особенности применения в медицинской практике, условия хранения.

Задачи:

- ответить на вопросы входного контроля;

- выполнить реакции идентификации в соответствии с требованиями соответствующей нормативной документации;

В процессе самоподготовки и на занятии студент должен приобрести следующие знания и умения:

Знать:

- формулы, международные, русские и химические названия, внешний вид, свойства и растворимость предложенных веществ;

- реакции идентификации перечисленных выше веществ;

- условия хранения, применение в медицинской практике лекарственных веществ.

Задание на занятие:

- провести анализ препаратов из группы β-лактамидов в соответствии с НД

Самостоятельная работа студентов

Задание I. Выполнить качественные реакции на лекарственные вещества природных и полусинтетических пенициллинов.

1. Гидроксамовая реакция. Данная реакция является общегрупповой реакцией на β-лактамиды. При ее выполнении следует тщательно выполнять условия методики (количество щелочи и кислоты), так как гидроксаматы тяжелых металлов образуются только в определенных интервалах значений рН.

Методика выполнения:

а) В фарфоровую чашку помещают 0,01 г препарата, прибавляют 1 каплю раствора, состоящего из 1 мл 1 М раствора гидроксиламина гидрохлорида и 0,3 мл 1 М раствора гидроксида натрия. Через 2—3 мин к смеси добавляют 1 каплю раствора кислоты уксусной, тщательно перемешивают, затем добавляют 1 каплю раствора нитрата меди. Выпадает осадок зеленого цвета.

б) В фарфоровой чашке растворяют 0,005 г препарата в 3 мл воды, прибавляют 0,1 г гидроксиламина гидрохлорида. Через 5 минут к полученному раствору прибавляют 1,1 мл 1н. раствора кислоты хлористоводородной и 3 капли раствора железа (III) хлорида. Появляется грязное красно-фиолетовое окрашивание.

2. Реакция с хлористоводородной кислотой. При взаимодействии растворимых солей пенициллина с 25% кислотой хлористоводородной выделяется белый осадок кислотной формы пенициллина, растворимый в избытке реактива.

Методика выполнения:

К 0,02 г препарата, растворенного в пробирке в 1 мл воды, по каплям прибавляют 25% раствор кислоты хлористоводородной. Выпадает белый осадок, растворимый в избытке кислоты.

3. Реакция обнаружения серы.

К 0,01 г препарата в пробирке прибавляют 2-3 мл кислоты азотной концентрированной и кипятят в течение 2-3 минут. После охлаждения добавляют 0,5 мл раствора хлорида бария. Выпадает белый осадок.

4. Реакция с раствором нитрата серебра.

0,002 г препарата растворяют в 20 мл дистиллированной воды в пробирке емкостью 50 мл, добавляют 1 мл разведенной азотной кислоты и перемешивают. Затем прибавляют 1 мл раствора нитрата серебра. Через 2 мин выпадает белый творожистый осадок, легко растворимый в 1 мл раствора аммиака.

5. Реакция с аммиачным раствором нитрата серебра.

0,01 г препарата растворяют в 20 мл дистиллированной воды в термостойкой пробирке и добавляют раствор, состоящий из 10 мл раствора нитрата серебра и 10 мл аммиака. Затем раствор нагревают почти до кипения. Появляется светло-коричневое окрашивание, переходящее в темно-коричневое, а через 5 мин выделяется темный осадок (металлическое серебро).

6. Реакция с резорцином в серной кислоте.

Растворяют 0,002 г препарата в 2 мл воды в термостойкой пробирке, осторожно прибавляют 2,5 мл раствора серной кислоты, перемешивают, добавляют 0,1 г резорцина и снова перемешивают. При нагревании на кипящей водяной бане в течение 5 мин появляется желто-зеленоватое окрашивание.

7. Реакция с аммиачным раствором соли меди.

Растворяют 0,003 г препарата в 4 мл воды в термостойкой пробирке, осторожно прибавляют раствор, состоящий из 5 мл раствора нитрата меди и 0,5 мл раствора аммиака, перемешивают. При нагревании на кипящей водяной бане в течение 2 мин появляется темно-желтое окрашивание.

8. Реакция с реактивом Марки. Реакция наиболее характерна для феноксиметилпенициллина (красное окрашивание при комнатной температуре и усиление окраски при нагревании). Остальные пенициллины образуют неокрашенные, а при нагревании желтые или желто-бурые продукты.

Методика выполнения:

По 0,005 г препарата помещают в две пробирки и прибавляют по 1 капле воды. В первую пробирку добавляют 2 мл серной кислоты, а во вторую добавляют 2 мл свежеприготовленного реактива Марки, содержимое пробирок перемешивают и отмечают окраску. Затем содержимое пробирок нагревают на водяной бане в течение 1 мин и отмечают окраску.

9. Реакция с хромотроповой кислотой. Реакция наиболее характерна для феноксиметилпенициллина. Остальные пенициллины образуют продукты реакции желто-зеленого или желтого цвета.

Методика выполнения:

К 0,002 г препарата прибавляют 0,002 г динатриевой соли хромотроповой кислоты, 2 мл концентрированной серной кислоты и нагревают на масляной или глицериновой бане при температуре 150⁰С и отмечают секундомером время погружения. Пробирку встряхивают каждые 30 с и отмечают окраску. Реакцию поводят в течение 5 минут.

Полученные результаты представить в виде таблицы.

Препарат	Время, мин
	0	0,5	1,0	1,5	2,0	2,5	3,0	3,5	4,0	4,5	5,0

10. Реакция на остаток аминокислоты в ампициллине. За счет остатка фениламиноуксусной кислоты ампициллин реагирует с нингидрином и вступает в реакцию комплексообразования с меди (II) сульфатом.

а) 0,02 г ампициллина растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 мин. Появляется вишневое окрашивание.

б) 0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 2-3 капли реактива Фелинга. Появляется фиолетовое окрашивание.

Задание II. Выполнить качественные реакции на лекарственные вещества цефалоспоринов (цефалексин, цефалотина натриевая соль).

1. Гидроксамовая реакция. Данная реакция выполняется по методике для препаратов группы пенициллинов.

2. Реакция окисления. Обуслолена наличием отома серы в дигидротиазиновом кольце.

К 0,02 г препарата в пробирке прибавляют несколько капель 80% раствора кислоты серной, содержащей 1% кислоты азотной. Цефалотин дает желтое окрашивание, цефалексин - оливково-зеленое.