1. Последовательность работы на аппарате Laboscale

при подсчете эритроцитов и лейкоцитов

1.1. Установка параметров для подсчета эритроцитов и лейкоцитов.

Диаметр измерительного капилляра – 100 мкм

Измерительный ток – 200 мкА (кнопка I₃)

Дифференциальный дискриминатор

Нижний порог – 0,5-1,5 в

Верхний порог – 10 в

1.2. Определение чистоты (т.е. величины фона) разводящего раствора. Для этого в измерительный бюкс наливают 5 мл разводящего раствора. Бюкс устанавливают на магнитную подставку и медленно поднимают так, чтобы измерительная трубка и электрод были полностью погружены в раствор. Нажатием кнопки 7 (START) запускают измерение. На основе среднего арифметического, полученного в результате нескольких измерений, получают величину фона разводящего раствора.

1.3. Приготовление разведений крови для подсчета эритроцитов и лейкоцитов. В 2 пробирки наливают по 5 мл разводящего раствора. В пробирку № 1 автоматическим дозатором вносят 8 мкл крови, перемешивают и используют для подсчета лейкоцитов (разведение крови 1:630).

В пробирку № 2 вносят 50 мкл полученного разведения, перемешивают и используют для подсчета эритроцитов (разведение крови 1:6300).

1.4. Подсчет лейкоцитов. Для подсчета лейкоцитов необходимо лизировать эритроциты. В пробирку № 1 (разведение крови 1:630) добавляют 2 капли 2 % раствора сапонина и по истечении 3 мин полученный гемолизат переливают в измерительный бюкс. Проводят подсчет по методике, описанной в пункте 1.2. Из полученного результата вычитают величину фона разводящего раствора и умножают на 100 (получают число лейкоцитов в 1 мкл крови).

Пример: величина фона – 2, на цифровом индикаторе – 62.

Число лейкоцитов = (62-2)  100 = 6000 / 1 мкл,

или 6,0  10⁹ /л.

После подсчета лейкоцитов измерительную трубку необходимо промыть от остатков сапонина, что достигается многократным пропусканием разводящего раствора.

1.5. Подсчет эритроцитов. Для подсчета эритроцитов используют разведение крови 1:6300 (пробирка № 2). Содержимое пробирки переливают в измерительный бюкс и проводят измерение аналогично методике, изложенной в пункте 1.2. Из полученного результата вычитают величину фона разводящего раствора и умножают на 10000 (получают число эритроцитов в 1 мкл крови).

Пример: величина фона – 2, на цифровом индикаторе – 445

Число эритроцитов = (445-2)  10000 = 4430000 / 1 мкл,

или 4,43  10¹² /л.

По окончании измерений промывают измерительную трубку разводящим раствором.

2. Последовательность работы на аппарате Laboscale

при подсчете тромбоцитов

2.1. Установка параметров для подсчета тромбоцитов.

Диаметр измерительного капилляра – 70 мкм

Измерительный ток – 400 мкА (кнопка I₄)

Дифференциальный дискриминатор

Нижний порог – 0,4-0,8 в

Верхний порог – 8-10 в

2.2. Определение величины фона разводящего раствора – аналогично пункту 1.2.

2.3. Приготовление разведения крови для подсчета тромбоцитов. Для предупреждения агрегации тромбоцитов используется полиэтиленовая посуда. В пробирку с 0,9 мл разводящего раствора автоматическим дозатором вносят 100 мкл крови, перемешивают и подвергают центрифугированию при 1000 об/мин в течение 3-5 минут. Из средней части супернатанта отбирают 8 мкл полученной тромбоцитарной взвеси и вносят в пробирку с 5 мл разводящего раствора. Перемешивают и проводят измерение в соответствии с вышеизложенной методикой (пункт 1.2.). Из полученного на цифровом индикаторе значения необходимо вычесть величину фона и умножить на 1000 (получают число тромбоцитов в 1 мкл крови).

Пример: величина фона – 3, на цифровом индикаторе – 325.

Число тромбоцитов (325-3)  1000 = 322000 / 1 мкл,

или 322  10⁹ /л.