Визначення групи крові у системі аво
Визначення групи крові по системі АВО проводять різними способами, у тому числі по стандартним ізогемаглютинуючим сироватках I, II, Ш груп, використовуються два ряди стандартних сироваток. У краплю сироватки вносяться еритроцити досліджуваного в співвідношенні 10:1. Реакція проводиться при кімнатній температурі. Існує сучасний спосіб, заснований на використанні моноклональних антитіл — цоликлон анти-а і цоликлон анти-в. Цей метод дозволяє уникнути помилок, можливих через наявність слабких антигенів типу Ai. Для надійного визначення групової приналежності в сумнівних випадках, наприклад, при підозрі на наявність А;, використовується перехресний метод — до стандартних еритроцитів I, II і Ш груп додається досліджувана сироватка. В усіх методиках критерієм оцінки є поява у відповідних випадках аглютинації еритроцитів.
Переливання крові з урахуванням групової приналежності здійснюється тільки за принципом однойменної групи: кров донора I групи можна переливати реципієнту I групи, кров донора II групи — реципієнту П групи і т.д. В екстрених ситуаціях можливе застосування правила Оттенберга, що широко використовувалося в 60—80-х. роках (людина з I групою —універсальний донор, його кров можна переливати всім, а людина з IV групою — універсальний реципієнт), але в цих випадках порція крові, що вводиться, обмежується 200 мол
Для визначення групи крові в будь-якій системі використовують один і той самий принцип: забезпечують умови для здійснення реакції аглютинації еритроцитів у середовищі стандартних ізогемоаглютинувальних сироваток або цоліклонів(-соляний розчин моноклональних антитіл до антигенів), що мають високий титр антитіл до досліджуваних антигенів еритроцитів.
Стандартна сироватка – це очищена у фабричних умовах плазма крові донорів різних груп, що не містить фібриногену та має високу концентрацію антитіл до одного або кількох антигенів однієї групи.
У системі АВО 4 групи сироваток. Сироватка І групи містить аглютиніни ? і ? (безкольорова); ІІ групи – аглютиніни ? (блакитного кольору); ІІІ групи - аглютиніни ? (рожевого кольору); IV групи - не містить аглютинінів (жовтого кольору).
Цоліклони являють собою порошок, що містить специфічні імуноглобуліни (антитіла), які діють проти групових антигенів. Ці антитіла утворюються одноклональними В–лімфоцитами у мишей при введенні в їх організм антигенів у вигляді злоякісних специфічних клітин.
У цоліклонах є антитіла тільки однієї специфічності. Це означає, що вони дають реакцію лише на один антиген, тобто не зумовлюють неспецифічної поліаглютинації еритроцитів. Ця їх властивість забезпечує перевагу перед стандартними сироватками, які важко очистити від інших антитіл і тому можливі неспецифічні реакції з антигенами досліджувваної крові.
У системі АВО 2 цоліклони : анти-А і анти-В.
Сироватки (або цоліклони) змішують на планшеті з кров'ю у співвідношенні 10:1. Спостерігають за перебігом реакції, похитуючи тарілку протягом 2,5 хвилини. Краплі сироваток, де відбулася аглютинація, стають прозорими, а еритроцити скупчуються (рис.9).
^ Відсутність гемолізу Наявність гемолізу
еритроцитів у несумісній плазмі
Рисунок 10
За наявністю аглютинації роблять висновок про групу крові.
Сироватка
Кров
І
(??)
ІІ
(?)
ІІІ
(?)
ІV
(-)
І (0)
–
–
–
–
ІІ ( А)
+
–
+
–
ІІІ ( В)
+
+
–
–
ІV( АВ)
+
+
+
–
Система резус
У 1940 році К.Ландштейнер та І.Віннер винайшли на еритроцитах макак резус - ще один антиген, який назвали резус-фактором. Пізніше з'ясувалося, що він також міститься у 85% людей, кров яких називається резус-позитивною. 15% його не мають, і їх кров називається резус-негативною.
Система резус має 6 різновидів антигенів: С, Д, Е, с, d, e. Найсильніші антигенні властивості має антиген Д, антитіла до якого утворюються найбільш активно.
У системі резус виділяють 2 групи крові:
Rh+ - кров, яка містить Д-антиген;
Rh- - кров, яка не містить Д-антигену.
Відмінність системи резус від системи АВО:
Аглютиніни системи АВО з'являються на перших місяцях життя і знаходяться в крові протягом усього життя. Тоді як антирезус-антитіла з'являються тільки після сенсибілізації (контакту Rh- індивіда з Rh+-антигенами). Це має місце при переливанні крові і при вагітності.
Rh- аглютиніни є неповними антитілами класу IgG, що мають невеликі розміри і можуть проникати через плацентарний бар'єр. Тоді як аглютиніни ? і ? є повними антитілами переважно класу IgM, що мають великі розміри і через плаценту не проникають.
Резус-конфлікт
Резус-конфлікт може виникати у двох випадках:
При переливанні крові (якщо Rh- реципієнту ввести Rh+ кров). Перше переливання крові не є небезпечним. Максимальний титр антитіл спостерігається через 2-4 місяці. За цей час перелиті еритроцити вилучаються з кровоносного русла. Але антирезус-антитіла тепер уже є в крові пацієнта. І при повторному переливанні Rh+ крові відбуваються аглютинація, гемоліз еритроцитів, що можуть призвести до гемолітичного шоку і смерті (рис.10);
Перше переливання Повторне переливання
Аглютинація еритроцитів при повторному переливанні
Утворення в крові реципієнта антирезус-антитіл
Переливання
Rh+еритроцитів Rh- реципієнту
Рисунок 11
При вагітності (якщо Rh- жінка вагітна Rh+ плодом). При нормальному перебігу першої вагітності, як правило, ніяких ускладнень не виникає. Під час пологів порушується плацентарний бар'єр і еритроцити дитини потрапляють у кров жінки. Починається утворення антирезусних антитіл (ІgG). При повторній знову Rh- конфліктній вагітності антирезус-антитіла проникають через плаценту в організм плода і викликають руйнування еритроцитів, що призводить до загибелі плода і викидня. Якщо ж при першій вагітності спостерігається фетоплацентарна недостатність, невелика кількість еритроцитів може потрапляти в організм жінки і провокувати утворення імуноглобулінів. Як правило, титр антитіл зростає повільно протягом кількох місяців, тому серйозних ускладнень не виникає. У такому випадку може спостерігатися гемолітична анемія новонароджених (рис.11).
Перша вагітність Повторна вагітність
Надходження Rh+ еритроцитів в організм жінки при пологах
Утворення в крові жінки антирезус-антитіл
Надходження анти -резус-антитіл в організм плода,гемоліз Rh+еритроцитів плода
Рисунок 12
Утворення антитіл в організмі Rh- жінки можна обмежити або пригнітити повністю за рахунок так званої антиD-профілактики. Одразу після пологів жінці вводять антиD-глобулін. Rh+ еритроцити, які потрапили до неї в кров під час пологів, будуть руйнуватися. Таким чином, буде ліквідовуватися фактор, який викликав би синтез антитіл.
До речі, реакція антиген-антитіло може виникати і при несумісності за АВО-системою. Але ці реакції, як правило, виражені слабо. Цікавим є те, що несумісність матері і плода за системою АВО може запобігти сенсибілізації, що виникає при несумісності за системою Rh. Еритроцити плода видаляються ?- і ?-аглютинінами, і Rh-фактор не встигає активувати імунну систему матері. Тому часті випадки, коли Rh- жінки нормально виношують декілька вагітностей.