- •Методичні вказівки
- •Протокол №
- •Лабораторна робота №1 Прилади та устаткування для мікробіологічних досліджень
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •1. Вивчити будову мікроскопа, правила користування ним у мікробіологічній практиці при роботі з імерсійним об'єктивом.
- •2. Відпрацювати техніку мікроскопії бактеріальних препаратів у наступній послідовності:
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Яке устаткування є обов'язковим для мікробіологічної лабораторії ?
- •Лабораторна робота №2 Будова мікроскопа
- •Теоретична частина
- •Питання для самоперевірки
- •Лабораторна робота № 3 Методи виділення і культивування мікроорганізмів
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Лабораторна робота № 4 Вивчення колоній і техніка виділення чистих культур мікроорганізмів
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Лабораторна робота № 5 Вивчення вільноживучих азотфіксаторів
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Лабораторна робота №6 Вивчення амоніфікуючих бактерій
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Лабораторна робота №7 Вивчення денітрифікуючих бактерій
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Лабораторна робота № 8 Вивчення нітрифікуючих бактерій
- •Теоретична частина
- •Хід роботи
- •Хід роботи
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •Що називається ризосферою?
- •Що називається мікоризою?
- •Рекомендована література
Хід роботи
1. Простерилізувати бактеріологічну петлю в полум'ї.
2. Загорнути чашки Петрі, піпетки і пробірки в папір, помістити їх у піч Пастера для стерилізації.
Питання для самоперевірки
Яке устаткування є обов'язковим для мікробіологічної лабораторії ?
Що таке стерилізація ?
Які існують методи стерилізації ?
В чому полягає суть хімічної стерилізації і які речовини при цьому застосовуються?
В чому полягає суть фізичної стерилізації і яке устаткування при цьому використовується?
Який спосіб стерилізації є найефективніший у бактеріологічній практиці ?
Лабораторна робота №2 Будова мікроскопа
Мета роботи: ознайомитися з будовою мікроскопа і технікою мікроскопіювання.
Теоретична частина
Світловий мікроскоп - складний оптичний прилад, призначений для вивчення в сильно збільшеному зображенні дрібних предметів, організмів і структур тканин, невидимих неозброєним оком. Мікроскоп називається світловим, тому що він забезпечує можливість вивчати об'єкт у проходячому світлі у світлому і темному полі зору, проводити фазово-контрасну, люмінесцентну й інші види мікроскопії. Основні елементи конструкції сучасних світлових мікроскопів - механічна й оптична частини.
Механічна частина мікроскопа складається з підковоподібної підставки, коробки з мікромеханізмом, предметного столика, револьвера на салазках, кронштейна конденсора.
Оптична частина мікроскопа складається з освітлювальної і спостережної систем.
Освітлювальна система знаходиться під предметним столиком. Вона складається з дзеркала і конденсора з ірисовою апертурною діафрагмою.
Спостережна система складається з об'єктивів, призми й окуляра, з'єднаних у тубусі мікроскопа.
Всі об'єктиви поділяються на сухі та імерсійні. Сухим називається такий об'єктив, між фронтальною лінзою якого і розглядуваним препаратом знаходиться повітря. При цьому через неспівпадання показника заломлення скла (1,52) і повітря (1,0) частина світлових променів відхиляється і не потрапляє в око спостерігача. Об'єктив сухої системи має зазвичай значну фокусну відстань і дає мале (х8) або середнє (х40) збільшення.
Імерсійними називають такі об'єктиви, між фронтальною лінзою яких і препаратом міститься рідке середовище з показником заломлення, близьким до показника заломлення скла. Як імерсійне середовище використовується, як правило, кедрова олія. Можна використовувати також воду, гліцерин, прозорі олії, монобромнафталін і ін. При цьому між фронтальною лінзою об'єктива і препаратом встановлюється однорідне (гомогенне) середовище (скло препарату — олія — скло об'єктива) з однаковим показником заломлення. Завдяки цьому всі промені, не заломлюючись і не змінюючи напрямку, попадають в об'єктив, створюючи умови найкращого освітлення препарату. Величина (n) показника заломлення дорівнює для води 1,33, для кедрової олії 1,515, для монобромнафталіну 1,6.
Устаткування і матеріали: мікроскоп, освітлювач, імерсійна олія, пастійні пофарбовані мікропрепарати (мазки) з різними формами бактерій.
Хід роботи
1. Вивчити будову мікроскопа, правила користування ним у мікробіологічній практиці при роботі з імерсійним об'єктивом.
2. Відпрацювати техніку мікроскопії бактеріальних препаратів у наступній послідовності:
- установити мікроскоп у найбільш зручному для роботи положенні на своєму робочому місці та навести освітлення;
- помістити на предметний столик мікроскопа готовий пофарбований мазок, закріпити його затискачами;
- розглянути препарат за допомогою сухого об'єктива і відшукати краще місце для детального дослідження;
- підняти тубус мікроскопа і за допомогою револьвера установити імерсійний об'єктив;
- нанести паличкою краплю кедрової олії на препарат;
- занурити в кедрову олію фронтальну лінзу імерсійного об'єктива, спостерігаючи збоку за тим, щоб не роздавити об'єктивом, предметне скло і не ушкодити лінзи об'єктива;
- дивлячись в окуляр, повільно підняти тубус макрометричним гвинтом до появи в полі зору мікроскопа досліджуваного об'єкта;
- уточнити фокус мікрометричним гвинтом та вивчити отриманий мікропрепарат;
- замалювати мікроскопічну картину в альбом.
3. Розглянути пофарбовані мазки за допомогою сухого та імерсійного об'єктивів. Мікрокартину замалювати.
