3. Обнаружение возбудителей туберкулеза и бруцеллеза в молоке и молочнокислых продуктах.

Исследование молока на наличие возбудителя туберкулеза.

Метод седиментации (осаждения):

1) 150 мл молока центрифугируют 20-30 мин (при 2000 об/мин), надосадочную жидкость сливают;

2) осадок обрабатываю равным объемом 6-10% раствором H₂SO₄ на 20-30 мин (для уничтожения некислотоустойчивой микрофлоры);

3) перемешивают и снова центрифугируют 10-15 мин;

4) надосадочную жидкость сливают, осадок дважды отмывают в физ. растворе (путем центрифугирования);

5) полученный осадок используют для посева на питательные среды не менее чем в 3 пробирки и готовят мазки;

6) мазки фиксируют в спирт-эфире 20 мин (для обезвреживания) и окрашивают по Циль-Нильсену (микобактерии – красные, остальные - синие).

Исследование масла на наличие возбудителя туберкулеза (по Роту).

Метод седиментации (осаждения):

1) 3-5 г сливочного масла вносят в пробирку с 5 мл физ. раствора;

2) пробирку нагревают на водяной бане (при 50°С) до тех пор, пока масло не растает;

3) пробирку закрывают резиновой пробкой и сильно встряхивают в течение 5 мин;

4) пробирку ставят вверх дном в холодную воду (для того, чтобы всплывающее масло застыло);

5) жидкость, находящуюся ниже масла сливают и центрифугируют 20-30 мин (при 2000 об/мин) до получения осадка;

6) осадок обрабатывают равным объемом 6-10% раствором H₂SO₄;

7) перемешивают и снова центрифугируют 10-15 мин;

8) надосадочную жидкость сливают, осадок дважды отмывают в физ. растворе (путем центрифугирования);

9) из полученного осадка готовят мазки;

10) мазки фиксируют в спирт-эфире 20 мин (для обезвреживания) и окрашивают по Циль-Нильсену (микобактерии – красные, остальные - синие).

Кольцевая реакция с молоком для диагностики бруцеллеза:

Сущность: эта реакция позволяет определить наличие антител в молоке. Если животное больное бруцеллезом, то антитела будут присутствовать в молоке.

Компоненты реакции:

1) Молоко от коровы свежее или консервированное формалином (исследуемое).

2) Антиген бруцеллезный темно-фиолетового или темно-синего цвета (стандартный).

Постановка реакции. В пробирку наливают молоко 1 мл, добавляют 0,05 мл антигена (окрашенного), встряхивают, ставят в водяную баню t = +37˚С на 45 минут.

Учет реакции:

Положительная реакция (животное больное): четко выраженное темно-фиолетовое кольцо в слое сливок (нижняя часть – остальной столбик молока не прокрашен).

Сомнительная реакция: слабо выраженное темно-фиолетовое кольцо в слое сливок (нижняя часть столбика молока немного прокрашена в фиолетовый цвет).

Отрицательная реакция: нет кольца, сливки белого или чуть желтоватого цвета (столбик молока равномерно окрашен начальным темно-фиолетовым цветом).

Занятие № 8. Тема: микробиология кормов.

1. Микрофлора кормов.

2. Санитарно-бактериологическое исследование кормов.

3. Обнаружение возбудителей ботулизма в кормах. Микотоксикозы.

4. Консервирование кормов.

1. Микрофлора кормов.

Качество растительных кормов, их питательность связаны с действием микроорганизмов, находящихся на поверхности растений.

Микроорганизмы, которые живут и размножаются на наземных частях растений (листья, стебли и т. д.) называют эпифитами. А микрофлору – эпифитной (поверхностной).

Эпифитная (поверхностная) микрофлора – это микрофлора, находящаяся на поверхности растений.

Эпифиты – это микроорганизмы, которые живут и размножаются на поверхности растений (листья, стебли).

Поверхность растений для эпифитов является средой обитания. Там они питаются веществами, выделяемыми растениями. Эпифиты не повреждают и не проникают в ткани здорового растения. Эпифиты чаще всего попадают на поверхность растений из почвы, вместе с семенами растений при посеве. Эпифитную микрофлору изучают для того, чтобы знать ее видовой состав, свойства и процессы, которые она может вызывать при заготовке и хранении кормов.

В отличие от других микробов, для эпифитов характерно то, что они, находясь на поверхности растений, хорошо переносят действие солнечного излучения.

Эпифиты не обладают специфичностью к определенным видам растений (определенные виды на разных растениях).

Количество и видовой состав эпифитов на поверхности растении зависти от многих факторов:

1) Агротехнических факторов: приемы агротехники, способы уборки и заготовки кормов, хранение кормов.

2) От факторов окружающей среды: климатические условия (температура и влажность – чем выше влажность, тем больше микробов), состав почвы,

3) От особенностей растений: фазы развития и возраста растения (чем старше растение, тем больше микробов).

К эпифитной микрофлоре относится: травяная палочка (занимает около 40% всей эпифитной микрофлоры), молочнокислые стрептококки и палочки, сенная и картофельная бациллы, флюоресцирующие бактерии, протей, сарцины, актиномицеты, плесени, дрожжи и др.

Также на поверхности растений могут быть факультативные паразиты.

Факультативные паразиты – это паразиты, которые ведут свободный образ жизни и лишь при особых условиях переходят к паразитированию.

В процессе хранения эпифиты и факультативные паразиты постепенно вытесняются плесневыми грибами.

Плесневые грибы – это группа сапрофитных грибов, которые образуют налеты плесени на портящихся кормах.

К плесневым грибам относят: аспергиллы, пенициллы, мукоровые и др.

Грибы, встречающиеся на кормах, делят условно на 3 основные группы:

1) полевые грибы – это виды грибов, способные проникать и развиваться на растениях в период вегетации (роста). К ним относят грибы рода: Alternaria, Helminthosporium, Cladosponum, Fusarium.

2) плесени хранения – это виды грибов, которые редко присутствуют на растениях в период вегетации, они характерны для хранящейся массы. К ним относят грибы рода: Aspergillus и Pénicillium.

3) грибы, вызывающие вторичную порчу растений – это виды грибов, которые редко поражают растения до их уборки. К ним относят грибы рода: F. graminearum, Chaetomium, Sordaria, Раруlaspora.