Нормативы объемов выборок для контроля растворов малого объема на мв и параметры их оценки

Объем серии, шт.	Ступень визуального контроля	Объем выборки для ви- зуальн. контр., шт.	Количество с растворами имеющими шт.	емкостей малого объема, включения,
			приемочное	браковочное
1	2	3	4	5
1201 – 3200	первая суммарно (по 2 ступеням)	80 160	2 6	5 7
3201- 10000	-«-	200 400	6 15	10 16
свыше 10000	-«-	315 630	9 23	14 24

В случае брака Центр контроля качества лекарственных средств составляет акт и сообщает одновременно в установленном порядке предприятию-изготовителю и Росздравнадзору Минздравсоцразвития России.

Порядок проведения контроля на предприятиях отличается от лабораторного контроля. Внутризаводской контроль инъекционных препаратов на МВ осуществляется в три этапа. Первичный – внутрицеховой сплошной, вторичный – внутрицеховой выборочный и третий – выборочный контроль, осуществляемый отделом контроля качества (ОКК) предприятия. Первичному контролю подлежат 100% ампул. Для вторичного контроля от каждой партии, прошедшей первичный контроль, отбирают среднюю пробу в зависимости от количества ампул в партии. При обнаружении более 2% ампул с МВ всю партию возвращают на повторный первичный контроль.

Третий выборочный контроль осуществляется контролерами ОКК предприятия. Для контроля отбирают среднюю пробу от каждой серии изготовленной продукции. Нормативы объемов выборок и параметры их оценки такие же, как и для лабораторного контроля (таблица 1). В случае брака ОКК возвращает всю продукцию в цех.

Необходимо отметить, что отечественный Руководящий документ 42-501-98 по сравнению с ведущими зарубежными фармакопеями допускает браковочный уровень не более 2% ампул от выборки. Требования зарубежных фармакопей более жесткие: инъекционные препараты должны быть практически свободны от МВ, видимых невооруженным глазом.

По современным представлениям, более объективно оценить качество продукции позволяет уровень содержания МВ довидимого диапазона, чем результаты визуального контроля. Вначале довидимые частицы стали определять в инфузионных, а затем в ампулированных растворах. В 1985 г в фармакопею США ХХI издания впервые был введен инструментальный метод определения содержания МВ довидимого диапазона в инъекционных растворах, основанный на принципе светоблокировки.

Отечественный Руководящий документ 42-501-98 для определения содержания довидимых частиц рекомендует два метода: счетно-фотометрический и микроскопический. Счетно-фотометрический метод основан на принципе светоблокировки и позволяет автоматически определять размер и число частиц. Результаты анализа счетно-фотометрическим методом интерпретируются следующим образом: для растворов в ампулах, если нет указаний в ФСП, в среднем в одной емкости количество частиц размером 5 мкм и более не должно превышать 6000, в том числе размером 25 мкм и более – 600 частиц.

При проведении анализа микроскопическим методом допустимые нормы более строгие: количество частиц размером 5-25 мкм не должно превышать 5000, размером более 25 мкм – 500 частиц. Микроскопический метод позволяет выяснить природу МВ в инъекционных растворах, что особенно важно для производителей лекарственных средств, так как способствует выявлению, а затем и устранению в ряде случаев источников загрязнения. Являясь более объективным, он может быть использован как арбитражный.

Обязательными показателями качества инъекционных растворов являются стерильность и пирогенность. Стерильность инъекционных растворов обеспечивается производством лекарственных препаратов в условиях асептики и последующей стерилизацией. В стерильных растворах не должно быть жизнеспособных микроорганизмов. Нарушение санитарно-гигиенических условий производства и режима стерилизации инъекционных растворов приводит к загрязнению лекарственных препаратов микрофлорой.

Использование нестерильных инъекционных лекарственных препаратов может привести к инфицированию больных, возникновению тяжелых заболеваний или даже к смерти. Поэтому каждая серия готовой продукции подлежит контролю на стерильность в соответствии с требованиями ОФС «Испытание на стерильность» ГФ ХII. Испытание инъекционных растворов в ампулах на стерильность проводят микробиологическим методом прямого посева на питательные среды или методом мембранной фильтрации. Испытуемые лекарственные препараты удовлетворяют требованиям стерильности при отсутствии роста микроорганизмов.

Продукты жизнедеятельности и распада микроорганизмов, а также погибшие микробные клетки, содержащиеся в инъекционных лекарственных препаратах, могут вызывать пирогенный эффект (повышение температуры тела, лихорадочное состояние), снижение кровяного давления, тахикардию, цианоз, рвоту, понос. Пирогенные вещества по химической природе представляют собой липополисахариды, являющиеся компонентами клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Освобождение от пирогенных веществ в инъекционных растворах термической стерилизацией практически невозможно, так как они термостабильны. Поэтому исключительное значение имеют профилактические мероприятия, предотвращающие образование пирогенных веществ. Это, прежде всего, строжайшее соблюдение асептики на всех этапах производства инъекционных растворов, независимо от последующей стерилизации. Значение имеют также использование свежеперегнанной воды, апирогенных лекарственных веществ и соблюдение времени выдерживания растворов перед стерилизацией (не более 1-1,5 часов).

Однако практически невозможно добиться полного освобождения инъекционных растворов от микроорганизмов. В связи с данным обстоятельством, а также опасностью пирогенного эффекта инъекционные растворы при объеме одноразовой дозы 10 мл и более подвергаются испытанию на пирогенность. Испытанию могут подвергаться инъекционные растворы при меньшей дозе, если есть указание в ФСП.

Определение пирогенных веществ унифицировано и изложено в ОФС «Испытание на пирогенность» ГФ ХII. Согласно ОФС, испытание пирогенности проводят биологическим методом на кроликах. Допускается использование альтернативного метода на основе ЛАЛ-теста вместо определения пирогенности на кроликах. Испытание с использованием ЛАЛ-теста изложено в ОФС «Бактериальные эндотоксины» ГФ ХII. В основе испытания лежит реакция гелирования лизата амебоцитов краба Limulus polyphemus и других морских животных – мечехвостов, омаров. Амебоциты (клетки крови морских животных) содержат белок коагулоген и проэнзимную систему. В присутствии бактериальных эндотоксинов проэнзимная система активируется и вызывает свертывание белка коагулогена. В результате образуется гель в виде твердого сгустка. ЛАЛ-тест отличается от биологического метода на кроликах тем, что не требует подопытных животных, является высокочувствительным, отличается простотой и быстротой выполнения. В настоящее время ЛАЛ-тест является основным методом для оценки пирогенных свойств различных объектов, в том числе и инъекционных растворов в ампулах.

Инъекционные растворы, наряду с другими требованиями, должны быть стабильными. В процессе изготовления инъекционных растворов, особенно при термической стерилизации, и последующем хранении возможно разложение некоторых лекарственных веществ. Они могут подвергаться изомеризации и химическим превращениям: окислению, гидролизу, декарбоксилированию и т.д.

В водных растворах протекают, например, реакции гидролиза лекарственных веществ, представляющих собой соли, образованные сильной кислотой и сильным основанием, и наоборот. Нагревание раствора во время стерилизации, повышение рН раствора за счет выщелачивания стекла или кислая среда, создаваемая присутствующей в воде углекислотой, приводят к усилению гидролиза солей. Вследствие этого в инъекционных растворах накапливаются свободные органические основания или кислоты, трудно растворимые в воде. Например, раствор папаверина гидрохлорида без стабилизатора мутнеет при стерилизации в ампулах даже из нейтрального стекла. Это объясняется незначительным сдвигом рН раствора за счет выщелачивания стекла, что приводит к осаждению слабых органических оснований, в том числе и основания папаверина.

Если растворы стерилизовать в ампулах из щелочного стекла, то будут осаждаться не только слабые, но и сильные органические основания из-за более активного выщелачивания стекла. Примером могут служить растворы новокаина, которые вызывают замасливание стенок ампул вследствие осаждения основания новокаина в виде маслянистой жидкости.

Из вышеизложенного следует, что стабильность инъекционных растворов в первую очередь зависит от физико-химических свойств лекарственных веществ, величины рН раствора, температуры, а также марки медицинского стекла, из которого изготовлены ампулы.

Более глубокое разрушение структуры происходит для лекарственных веществ, содержащих сложноэфирную и лактонную группировки. Они могут подвергаться гидролизу при нагревании слабощелочных, а иногда и нейтральных растворов. Изменение структуры вещества приводит к потере фармакологической активности, а в некоторых случаях и к увеличению токсичности. Так, стерилизация растворов новокаина без стабилизатора приводит к появлению свободной п-аминобензойной кислоты, которая может подвергаться далее декарбоксилированию с образованием примеси анилина, обладающего высокой токсичностью.

К легкоокисляющимся веществам относятся глюкоза, аскорбиновая кислота, новокаин, производные фенотиазина и другие лекарственные вещества, содержащие альдегидную, фенольную, аминную группы. Окисление лекарственных веществ вызывает кислород, содержащийся в воде и над раствором. Термическая стерилизация, сдвиг рН раствора за счет выщелачивания стекла, а также каталитическое действие примесей тяжелых металлов усугубляют процесс окисления лекарственных веществ в инъекционных растворах.

Во избежание разложения лекарственных веществ в инъекционных растворах научно обоснованная технология предполагает использование ряда приемов. Одним из них является применение лекарственных веществ квалификации «для инъекций», характеризующихся повышенной степенью чистоты. К таким лекарственным веществам относятся глюкоза, гексаметилентетрамин, кальция глюконат, кофеин-бензоат натрия, магния сульфат, натрия гидрокарбонат, натрия цитрат и др. Чем выше чистота лекарственных веществ, тем более стабильны приготовленные из них инъекционные растворы.

Принципиальное значение имеет выбор марки стекла для изготовления ампул. Как правило, используют нейтральное стекло НС-1 и НС-3, в меньшей степени подверженных выщелачиванию при контакте с водными растворами во время хранения и особенно при тепловой стерилизации. Ключевую роль в обеспечении стабильности инъекционных растворов играет соблюдение режима стерилизации (температура и продолжительность).

Стабильность инъекционных растворов при стерилизации и хранении обеспечивается также введением стабилизаторов, создающих оптимальные интервалы рН. Для лекарственных веществ, подверженных гидролизу, используют в качестве стабилизаторов 0,1 М раствор хлороводородной кислоты (для солей сильных кислот и слабых оснований, сложных эфиров) или 0,1 М раствор натрия гидроксида и раствор натрия гидрокарбоната (для солей сильных оснований и слабых кислот).

Для стабилизации легкоокисляющихся веществ в растворы добавляют антиоксиданты. Катионы тяжелых металлов, являющиеся катализаторами окислительных процессов, связывают в комплексные соединения с трилоном Б. Количество кислорода в растворителе и воздухе над раствором снижают посредством насыщения диоксидом углерода или заполнения ампул в токе инертного газа.

Для контроля стабильности инъекционных растворов вводят такие показатели качества, как значение рН, внешний вид, прозрачность и цветность раствора. По величине рН, определяемой потенциометрическим методом, можно косвенно судить о качестве медицинского стекла, используемого для изготовления ампул, а также о соблюдении режима стерилизации или стерилизации без стабилизатора. Данный показатель является также показателем стабильности инъекционных растворов при хранении. Изменение рН раствора в процессе хранения ампул может быть вызвано постепенным гидролизом лекарственных веществ и накоплением продуктов кислотного или основного характера.

Кроме изменения рН раствора, показателем стабильности лекарственных веществ может служить внешний вид ампульного раствора, оцениваемый визуально. Как правило, инъекционные растворы неокрашенных лекарственных веществ представляют собой прозрачные, бесцветные или слабо окрашенные жидкости. Для объективной оценки дополнительно определяют такие показатели качества, как прозрачность и цветность растворов в соответствии с требованиями ОФС «Определение прозрачности и мутности жидкостей» и «Определение окраски жидкостей».

Не всегда аналитическими признаками разложения лекарственного вещества в растворе выступает появление мути или окраски, наблюдаемые визуально. Иногда разложение лекарственного вещества протекает без видимых изменений. Объективную оценку разложения лекарственного вещества в инъекционном растворе дает такой показатель качества, как «посторонние примеси», определяемые высокочувствительными хроматографическими методами (ТСХ или ВЭЖХ). Посторонние примеси в инъекционных лекарственных препаратах не допускаются. Если появление таких примесей неизбежно, особенно для термолабильных веществ, то они подлежат нормированию.

Ампульные растворы относятся к дозированным лекарственным формам. Дозирование осуществляется с помощью калиброванного шприца непосредственно перед введением раствора больному. Однако при отборе раствора в шприц часть его остается в ампуле, другая часть расходуется на вытеснение воздуха из иглы. Данное обстоятельство учитывается в технологии ампулированных растворов. Объем раствора, заключенный в ампулу, должен быть несколько больше номинального. В противном случае не будет обеспечиваться требуемая дозировка лекарственного вещества. Поэтому одним из показателей качества инъекционных растворов в ампулах является определение номинального объема.

Это испытание унифицировано и изложено в ОФС «Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения» ГФ Х11. Для определения номинального объема раствора в ампулах вместимостью от 1 до 20 мл отбирают пять ампул. Извлекают содержимое каждой ампулы сухим шприцем, вместимость которого не более чем в три раза превышает измеряемый объем. Из шприца и иглы удаляют пузырьки воздуха и помещают содержимое, не выдавливая содержимое из иглы, в сухой мерный цилиндр, калиброванный на заполнение. Вместимость мерного цилиндра должна быть такой, чтобы измеряемый объем занимал не менее 40% от номинального объема цилиндра.

Для ампул с номинальным объемом 2 мл и менее содержимое нескольких ампул может быть объединено, чтобы получился объем, подходящий для измерения. Причем, для каждой ампулы используют отдельный сухой шприц. Содержимое ампул с номинальным объемом 10 мл и более может быть определено непосредственным выливанием в мерный цилиндр.

Объем раствора должен быть не меньше номинального, если ампулы исследуются индивидуально. Для ампул с номинальным объемом 1–2 мл объем раствора должен быть не менее суммы номинальных объемов исследованных ампул.

Обязательными показателями качества инъекционных растворов, как и других лекарственных средств, являются испытание на подлинность и количественное определение. Особенностью испытания инъекционных растворов является установление подлинности не только действующего вещества, но и стабилизаторов или консервантов. Указание о необходимости установления подлинности таких вспомогательных веществ в инъекционном растворе приводится в нормативном документе частного характера (ФСП).

В целях обеспечения правильной дозировки проводится количественное определение действующего вещества методом, указанным в ФСП. Независимо от выбранного метода результаты количественного анализа всегда выражаются в г на 1 мл раствора. При выполнении анализа титриметрическим методом расчетная формула имеет вид:

Х = , где

Х – содержание действующего вещества в г в пересчете на 1 мл;

Т – титр титрованного раствора по определяемому веществу;

V – объем титрованного раствора, израсходованный на титрование;

К – поправочный коэффициент;

Q – навеска лекарственного препарата в мл.

Инъекционные растворы в ампулах имеют длительный срок хранения благодаря стабилизации, высокой степени чистоты лекарственных веществ, стерилизации и специальной упаковке. В качестве первичной упаковки используют стеклянные сосуды – ампулы. Ампулы изолируют находящиеся в них растворы от внешнего воздействия, обеспечивая тем самым сохранность лекарственного вещества в растворе.

Вместе с тем материал первичной упаковки может влиять на стабильность лекарственного вещества. При контакте водного раствора со стеклом во время хранения и особенно при тепловой стерилизации происходит выщелачивание стекла, т.е. растворение компонентов стекла, преимущественно оксидов щелочных и щелочноземельных металлов. Переход ионов натрия и калия в раствор вызывает сдвиг рН раствора в щелочную сторону. Это, в свою очередь, влияет на стабильность лекарственного вещества, вызывая появление в растворах мути, окраски и другие изменения. Об этом уже говорилось выше. Поэтому стекло ампул должно быть химически устойчивым. Таким требованиям удовлетворяет медицинское стекло нейтральных марок НС-1, НС-3 и светозащитное нейтральное стекло СНС-1.

Стекло нейтральных марок содержит натрия и калия оксиды в меньших количествах, поэтому они менее всего подвержены выщелачиванию. Наиболее химически стойким является стекло марки НС-3. Если в таких ампулах стерилизовать воду очищенную, то сдвиг рН ее вследствие выщелачивания стекла не превышает 0,9, а в ампулах из стекла НС-1 – 1,3.

Поскольку нейтральное стекло НС-3 является наиболее химически устойчивым, оно используется для ампулирования растворов лекарственных веществ, подвергающихся гидролизу и окислению. Менее чувствительные к щелочам растворы лекарственных веществ помещают в ампулы из нейтрального стекла НС-1. Светозащитное стекло СНС-1 используется для ампулирования лекарственных веществ, разлагающихся на свету, например адреналина гидрохлорида.

Таким образом, выбор марки медицинского стекла для изготовления ампул имеет первостепенное значение в обеспечении стабильности инъекционных растворов. Поэтому в технологии получения ампул разработаны и используются показатели качества медицинского стекла, одним из которых является химическая стойкость ампул, определяемая по сдвигу рН воды очищенной после ее стерилизации в ампулах. Для готовой продукции химическая стойкость стекла не определяется. Однако в НД частного характера обязательно в разделе упаковка указывается марка используемого стекла.

Контроль марки стекла можно осуществить только косвенно по величине рН ампульного раствора, которая должна входить в интервалы рН, приведенные в ФСП. Такие интервалы являются научно обоснованными и устанавливаются с учетом исходного рН раствора лекарственного вещества, наличия стабилизатора, марки стекла, времени контакта раствора со стеклом.

Во избежание боя ампулы помещают в картонные пачки с гнездами или контурную ячейковую упаковку из полимерного материала. Особенностью ампулированных растворов является их двойная маркировка: на ампулах и пачках. На первичной упаковке (ампулах) печатаются название препарата, концентрация раствора, объем препарата в мл и номер серии. На вторичной упаковке (картонных пачках) указываются название предприятия-изготовителя, его товарный знак, адрес, штриховой код. Маркировка включает также название препарата, его состав и объем, количество ампул, регистрационный номер, номер серии, срок годности, условия хранения, дополнительные надписи. Маркировка гарантирует применение лекарственного препарата по назначению, исключает перепутывание ампул и их фальсификацию. Поэтому контроль упаковки и маркировки ампулированных растворов на соответствие требованиям нормативного документа частного характера является обязательным.

Таким образом, оценка качества ампулированных растворов включает:

1. Контроль упаковки и маркировки.

2. Оценку внешнего вида ампулированного раствора.

3. Определение механических включений.

4. Проверку номинального объема.

5. Определение рН раствора.

6. Определение прозрачности и цветности раствора.

7. Испытание на подлинность действующего вещества и стабилизаторов, если есть указание в ФСП.

8. Определение показателя «посторонние примеси».

9. Количественное определение действующего вещества.

10. Определение стерильности.

11. Определение пирогенности или бактериальных эндотоксинов.

Нормативными документами, регламентирующими качество инъекционных растворов в ампулах, являются ФСП для препаратов отечественного производства и НД для зарубежных. Некоторые испытания унифицированы и изложены в инструкциях и ОФС:

• ОФС «Инъекционные лекарственные формы» ГФ ХI;

• ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей» ГФ ХII;

• ОФС «Степень окраски жидкостей» ГФ ХII;

• ОФС «Стерильность» ГФ ХII;

• ОФС «Пирогенность» ГФ ХII;

• ОФС «Бактериальные эндотоксины» ГФ ХII;

• ОФС «Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения» ГФ Х11;

• РД 42-501-98 «Инструкция по контролю на механические включения инъекционных лекарственных средств».