Забор, хранение и транспортирование инфекционного материала

Достоверность результатов бактериологических анализов, проводимых микробиологической лабораторией, в огромной степени зависит от качества забора и транспортировки клинического материала перед постановкой тестов.

При оценке диагностической значимости бактериологического исследования необходимо прежде всего помнить о неравнозначности положительного и отрицательного результатов. Если обнаружение патогенных микроорганизмов в исследуемом материале однозначно говорит о его присутствии в организме больного в момент исследования (если, конечно, исключить случайную контаминацию пробы персоналом), то отрицательный результат ещё не свидетельствует об их отсутствии. Причины, по которым возбудитель не удается выделить от больного тем или иным инфекционным заболеванием многообразны. Среди них следует отметить неравномерность распределения микроорганизмов в общей массе исследуемого материала; неравномерность выделения возбудителей из организма больного по времени. В связи с этим вероятность обнаружения патогенных микроорганизмов резко возрастает по мере увеличения кратности обследования и увеличения числа исследованных видов материала. Например, по данным И.И.Ильина [1991] для выявления возбудителя у больных со свежим трихомониазом было необходимо трехкратное исследование нативных и окрашенных препаратов, а в хронических случаях - пятикратное.

Таким образом отрицательный результат бактериологического исследования, особенно однократного, ещё не является достаточным основанием для исключения данного вида инфекционного заболевания. С другой стороны и факт обнаружения патогенного микроорганизма, вне связи с конкретными обстоятельствами, не всегда является достаточным основанием для постановки конкретного диагноза. Это связано с широким распространением при ряде нозологических форм бактерионосительства. Значимость факта обнаружения патогенного микроорганизма во многом определяется видом исследуемого материала. Например, обнаружение возбудителей брюшного тифа в крови, в соскобе из розеол, в моче, имеет значительно большую диагностическую ценность, чем их выделение из испражнений или желчи. В последних двух случаях это может быть на фоне брюшнотифозного носительства.

Возможной причиной диагностической ошибки является и неверная оценка локализации выделенного микроорганизма в организме больного, обусловленная особенностями получения отдельных видов исследуемого материала. По данным О.В.Пружняк и Л.В. Колоталовой [1989], Streptococcus pneumoniae , являющийся одним из наиболее значимых этиологических факторов при пневмониях, удается обнаружить на слизистой верхних дыхательных путей у 60 - 100 % практически здоровых детей в возрасте 3 месяцев и 1 - 7 % - детей более старшего возраста и взрослых. В то же время избежать контаминации мокроты, во время её прохождения через верхние дыхательные пути практически невозможно. Случайная контаминация мокроты пневмококком может явиться причиной ошибки при определении этиологии пневмонии.

Материал для микробиологического исследования

Качество и значимость микробиологического исследования зависит в первую очередь от правильного выбора вида исследуемого материала, соблюдения правил его забора и транспортировки.

Выбор вида материала для бактериологического исследования зависит от локализации и этапа патогенеза инфекционного процесса.

Для результативности исследования, при заболеваниях, вызванных микроорганизмами, необходимо соблюдать основные правила:

1. Материал собирают в достаточном количестве для полноценного исследования;

2. Материал должен соответствовать этапу патогенеза заболевания;

3. Материал забирают с соблюдением правил асептики; стерильным инструментом и в стерильную емкость (инструменты и емкости не должны содержать на своих поверхностях, даже в остаточных количествах, дезинфицирующие вещества);

4. Материал необходимо забирать до начала антибиотикотерапии, или через 12-24 часа после последнего введения препарата;

5. Материал необходимо транспортировать в сроки, обеспечивающие сохранение жизнедеятельности микроорганизмов, соблюдая температурный режим поддерживающий их активность.

Таблица.1.1.

Правила забора и транспортировки клинического материала

[Keroack M.A., Rosen-Kotilainen H,1996]

Вид материла	Забор материала	Транспортировка
Абсцесс	перед взятием материала удалить омертвевшие ткани, промыв 70% раствором изопрапанола или стерильным физиологическим раствором; предпочтительное аспирировать материал стенки абсцесса иглой со шприцем; при необходимости использовании тампона, вводить как можно глубже; рекомендуется брать 2 образца: для окраски по Граму и для посева	Анаэробная емкость
Кровь	взрослые: 2-3 забора (по 20-30 мл каждый забор) в течение 10 минут; новорожденные: 2-3 забора (по 1-2 мл каждый забор) в течение 10 минут.	В течение 2 часов при комнатной температуре в специальном флаконе для забора крови на посев.
Стул	непосредственно в чистый сухой контейнер.	В течение 1 часа при комнатной температуре
Дыхательный секрет	бронхооальвеолярный лаваж или трахеальный аспират: поместить в специальную емкость для мокроты; мокрота (откашлянная): прополоскать горло водой; глубоко откашляться непосредственно в стерильный контейнер. индуцированная мокрота: после чистки десен и языка вдохнуть 25 мл 3-10% физиологического раствора (через распылитель); откашляться в стерильный контейнер.	В течение 2 часов при комнатной температуре или т течение 24 часов при температуре 40С.
Моча	промыть промежность водой с мылом: раздвинув половые губы или оттянув крайнюю плоть, начать мочеиспускание, пропустив несколько мл, собрать мочу в стерильный контейнер; прямой катетер: забор мочи для посева не рекомендуется. постоянный катетер: дезинфицировать место взятия мочи, асептически забрать 5-10 мл мочи, используя иглу и шприц, отсоединять дренажную сумку не следует.	В течение 24 часов при температуре 40С (если не используется консервант) или в течение 24 часов при комнатной температуре (при использовании консерванта)

Кровь

Забор крови проводят во время лихорадки, до начала антибиотикотерапии или через 12-24 часа после последнего введения препарата. При сепсисе необходим 2-3 кратный забор крови в течение 5-10 часов.

Кровь берут с соблюдением правил асептики, персонал в масках. Для этого используют стерильные шприцы или одноразовые системы для взятия крови. Кровь берут у постели больного( или в перевязочной), лучше непосредственно в питательные среды. Для устранения бактерицидного действия сыворотки крови, соотношение кровь - среда должно быть 1:10 - 1:60. Доставка материала немедленная.

Ликвор

Спиномозговая пункция проводится врачом с соблюдением всех правил асептики, персонал в масках. Для микробиологического исследования используется вторая проба, забранная в центрифужную или агглютинирующую пробирки (первая проба - для общего исследования). Ликвор наливают в пробирку шприцем без иглы.

Материал доставляется в лабораторию немедленно. Если это затруднено, материал в течение 2 часов сохраняют при температуре +37⁰С .