Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лекции по дисциплине Биомедицинские нанотехноло...doc
Скачиваний:
5
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
9.4 Mб
Скачать

2.6.2. Биосенсоры с аммиак-чувствительными электродами

С помощью аммиак-чувствительного электрода можно следить за лю- быми превращениями, в ходе которых образуется аммиак.

Определение мочевины. Как видно из приведенного выше уравнения реакции, при гидролизе мочевины образуется аммиак. За его содержанием можно следить с помощью электродов, чувствительных либо к ионам аммония, либо к газообразному аммиаку. В последнем случае раствор должен быть щелочным. В одном из наиболее удачных биосенсоров на мочевину используется аммиак-чувствительный электрод, на полипропиленовой мембране которого иммобилизована уреаза. Он характеризуется низким пределом обнаружения (10-6 М), быстрым временем регенерации,позволяющим делать 20 проб в час со стандартным отклонением ± 2,5 %, и довольно широким линейным диапазоном (от 5-10-5 до 10-2М).

Определение креатинина. При деаминировании креатинина под действием креатиназы также образуется аммиак:

креатинин -» NH3 + креатин

Аммиак-чувствительный электрод, на полипропиленовой мембра- не которого иммобилизовали креатиназу, сохраняет стабильность на протяжении 8 месяцев и позволяет провести 200 измерений. Его предел обнаружения составляет 8-10-6 М.

Определение фенилаланина. Под действием фенилаланинаммиаклиазы из фенилаланина образуется аммиак и транскоричная кислота:

L-фенилаланин -» NH3 + транскоричная кислота

Разработан сенсор на фенилаланин, который характеризуется очень высокой селективностью, но медленно регенерирует и имеет узкий линейный диапазон.

Определение аденозина. При деаминировании аденозина под действием адениндезаминазы образуются инозин и аммиак:

аденозин -» NH3 + инозин

В биосенсоре на аденозин адениндезаминазу адсорбировали на поверхности аммиак-чувствительного электрода, а затем сшивали глутаровым альдегидом.

Определение аспартама. Аспартам под действием L-аспартазы также претерпевает превращения с образованием аммиака:

Аспартам -» NH3 + С6Н5СН2СН (C02H) NHCOCHCHC02H

2.6.3. Биосенсоры с со2-чувствительными электродами

Известно несколько примеров использования в биосенсорах ИСЭ, чувствительных к углекислому газу.

Определение мочевины. Мочевина гидролизуется с образованием аммиака и углекислого газа. В кислом растворе за выделяющимся углекислым газом можно следить с помощью соответствующего газового электрода.

Определение оксалата. Определение оксалата в моче имеет клиническое значение при диагностике оксалурии. Под действием оксалатадекарбоксилазы оксалт распадается на С02 и формиат:

Оксалат → 2С02 + формиат

Однако оксалатадекарбоксилаза ингибируется фосфатом и сульфатом, которые обычно присутствуют в моче. Вместо нее можно использовать оксалатоксидазу, в присутствии которой из оксалата образуются С02 и перекись водорода:

Оксалат → 2С02 + Н202

Впрочем, оксалатоксидаза также ингибируется некоторыми анионами.

Определение дигоксина. Онределение концентрации дигоксина проводят с помощью конкурентного иммуноферментативного анализа. В анализе используют полистирольные шарики с иммобилизованным на них дигоксином, которые легко отделить от испытуемого раствора. В зависимости от содержания диоксина в растворе с шариками связывается разное количество антител против дигоксина, меченных пероксидазой. Количество связанной пероксидазы можно определить после добавления к суспензии шариков перекиси водорода и пирогаллола по количеству образующегося С02:

Н202 + пирогаллол С02