
- •2.1 Материал и методика исследований
- •2.2.1. Результаты селекции местных штаммов молочнокислых бактерий
- •2.2.2. Идентификация молочнокислых бактерий
- •2.2.2.1. Культуральные свойства изучаемых штаммов
- •Морфологические свойства изучаемых штаммов
- •2.2.2.3. Физиолого-биохимические свойства изучаемых штаммов микроорганизмов
- •2.2.3. Результаты исследования исходного молока и молока, сквашенного культурами местных штаммов лактобактерий
- •2.2.4. Микробиологические показатели образцов молока, сквашенных разными культурами местных штаммов лактобактерий
2.2.4. Микробиологические показатели образцов молока, сквашенных разными культурами местных штаммов лактобактерий
При проведении микробиологического анализа образцов молока, сквашенного культурами местных штаммов лактобактерий мы определяли количество микроорганизмов в 1 мл готового продукта и антибиотическую активность по отношению к Staphylococcus aureus и Escherichia coli.
Количество микроорганизмов в 1 мл продукта определяли методом серийных разведений.
Результаты микробиологических исследований представлены в таблицах 16 и 17.
Таблица 16. Количество микроорганизмов в 1 мл сквашенного молока
n =10
Номер штамма |
|||||||||
ГМЗ-1 |
ГМЗ-2 |
ГМЗ-3 |
МБЕ-4 |
МБЕ-5 |
МБЕ-6 |
МД-7 |
МД-8 |
МД-9 |
МД-10 |
Показатели микробного числа |
|||||||||
1010 |
1010 |
1010 |
1010 |
1010 |
1010 |
1010 |
1019 |
1010 |
1010 |
Из анализа данных, приведенных в таблице 16 следует, что во всех образцах молока, сквашенного культурами местных штаммов лактобактерий, микробное число является достаточно высоким - 1010 КОЕ, что позволяет считать молоко, взятое нами в качестве питательной среды, благоприятной средой для роста культур лактобактерий.
Ученые разных стран мира выделяют штаммы молочнокислых бактерий из различных источников. Одним из параметров селекции является их антимикробная активность. В связи с этим представлялось интересным выделить штаммы молочнокислых бактерий в условиях климатической зоны РСО-Алания и изучить их антагонистические свойства по отношению к патогенной и условно-патогенной микрофлоре, с целью дальнейшего применения изученных штаммов в составе заквасок для производства кисломолочных продуктов.
Чувствительность микроба к антибиотикам выражается задержкой его роста, или гибелью от минимальной концентрации препарата в течение 16-18 часов.
Наличие роста бактерий свидетельствует об их резистентности к данному препарату, а отсутствие роста является показателем высокой чувствительности бактерий к данному антибиотику.
Для изучения антибактериальной активности выделенных штаммов лактобактерий в качестве тест-культур использовали полевые штаммы Staphylococcus aureus и Escherichia coli.
Антагонистическвую активность местных штаммов лактобактерий изучали методом диффузии в агар. С этой целью на поверхности агаризованной питательной среды в чашках Петри сплошным газоном производили посев тест-культуры, затем в агар вдавливались стерильные бумажные цилиндрики, в которые вносили молоко, сквашенное культурой изучаемого штамма.
Результаты исследования антагонистической активности испытуемых культур местных штаммом лактобактерий приведены в таблице 17 и диаграмме 2.
Таблица 17. Антагонистическая активность местных штаммов
молочнокислых бактерий
n = 10
Номер штамма |
Тест – микроб |
|
Staphylococcus aureus |
Escherichia coli |
|
Зона стерильности, мм |
||
ГМЗ-1 |
200,76 |
240,68 |
ГМЗ-2 |
190,56 |
230,66 |
ГМЗ-3 |
180,57 |
190,56 |
МБЕ-4 |
150,62 |
170,45 |
МБЕ-5 |
200,75 |
260,58 |
МБЕ-6 |
240,64 |
250,55 |
МД-7 |
190,51 |
220,60 |
МД-8 |
190,60 |
200,75 |
МД-9 |
220,53 |
240,53 |
МД-10 |
160,65 |
190,52 |
По анализу данных таблицы 18 и диаграммы 2 можно сделать заключение о том, что антагонистическая активность местных штаммов молочнокислых бактерий по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам достаточно высокая. Зона стерильности колеблется от 15 до 24 мм по отношению к Stаph. aureus и от 17 до 26 мм – к E. coli.
Одним из основных микробиологических показателей, по данным которого можно судить о лечебно-профилактических свойствах пробиотических препаратов, является изучение чувствительности микроба к ним.
В связи с этим, целесообразным явилось изучение антагонистической активности молочнокислых бактерий местной селекции по отношению к представителям патогенной и условно-патогенной микрофлоры:
- Moraxella catarrhalis;
- Pseudomonas aeruginosa ;
- Proteus vulgaris;
- Staphylococcus saprophiticus;
- Staphylococcus еpidermidis.
Таблица 19. Антагонистическая активность штаммов лактобактерий по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам
Штамм |
Зона стерильности, мм |
||||
Тест-микроб |
|||||
Moraxella catarrhalis |
Pseudomonas aeruginosa |
Proteus vulgaris |
Staphylococcus saprophiticus |
Staphylococcus еpidermidis |
|
ГМЗ-1 |
14 |
21 |
18 |
15 |
18 |
ГМЗ-2 |
25 |
28 |
23 |
16 |
17 |
ГМЗ-3 |
17 |
13 |
16 |
13 |
12 |
МБЕ-4 |
23 |
19 |
27 |
25 |
26 |
МБЕ-5 |
19 |
30 |
14 |
20 |
23 |
МБЕ-6 |
20 |
16 |
16 |
15 |
27 |
МД-7 |
28 |
13 |
21 |
17 |
19 |
МД-8 |
15 |
24 |
19 |
15 |
16 |
МД-9 |
22 |
27 |
24 |
24 |
25 |
МД-10 |
20 |
18 |
14 |
27 |
23 |
Данные таблицы 19 свидетельствуют о том, что отобранные штаммы молочнокислых микроорганизмов проявляют существенную антагонистическую активность. Чувствительность тест-микробов к исследуемым штаммам лактобактерий варьирует в широких пределах. Наибольшей антагонистической активностью по отношению к Moraxella catarrhalis обладает штамм МД-7 с зоной стерильности - 28 мм. Более низкая чувствительность наблюдалась у данного представителя патогенной микрофлоры к ГМЗ-1и МД-8 (зона угнетения роста 14 мм и 15 мм).
Наиболее активными антагонистами Pseudomonas aeruginosa оказались штаммы ГМЗ-2, МБЕ-5 и МД-9(зона стерильности 27-30 мм). Штаммы лактобактерий ГМЗ-3 и МД-7 проявляли меньшую антагонистическую активность с зоной подавления роста 13мм.
Высокой степенью антагонизма по отношению к Proteus vulgaris, Staphylococcus saprophiticus и Staphylococcus еpidermidis обладает штамм МБЕ-4, образующий зоны подавления роста 27 мм, 25 мм 26 мм соответственно.
Таким образом, по результатам извучения микробного числа в 1 мл молока, сквашенном местными штаммами лактобактерий и на основании антагонистической активности исследуемых штаммов можно сделать заключение о высокой биологической и технологической активности местных штаммов лактобактерий.
Таким образом, исследуемые штаммы молочнокислых микроорганизмов могут широко использоваться при составлении заквасок из молочнокислых микроорганизмов прямого внесения при производстве кисломолочной продукции.