
- •2.1 Материал и методика исследований
- •2.2.1. Результаты селекции местных штаммов молочнокислых бактерий
- •2.2.2. Идентификация молочнокислых бактерий
- •2.2.2.1. Культуральные свойства изучаемых штаммов
- •Морфологические свойства изучаемых штаммов
- •2.2.2.3. Физиолого-биохимические свойства изучаемых штаммов микроорганизмов
- •2.2.3. Результаты исследования исходного молока и молока, сквашенного культурами местных штаммов лактобактерий
- •2.2.4. Микробиологические показатели образцов молока, сквашенных разными культурами местных штаммов лактобактерий
2.2.2.3. Физиолого-биохимические свойства изучаемых штаммов микроорганизмов
Изучение физиологических свойств микроорганизмов необходимо не только для того, чтобы наращивать биомассу. По условиям культивирования и составу среды можно определить отличительные признаки микроорганизма, используемые в таксономии, экологическую нишу, выяснить возможность его использования для решения практических задач. Наконец, управление ростом культур лежит в основе биотехнологических процессов. Все это подчеркивает важность изучения характера роста и питательных потребностей бактериальных культур.
Результаты исследования физиолого-биохимических свойств культур изучаемых штаммов бактерий приведены в таблице 7.
Показатели |
Штамм
|
|||||||||
|
ГМЗ-1 |
ГМЗ-2 |
ГМЗ-3 |
МБЕ-4 |
МБЕ-5 |
МБЕ-6 |
МД-7 |
МД-8 |
МД-9 |
МД-10 |
Окраска по Граму |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
Рост в молоке при температуре: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
40ºC |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
45ºC |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
Рост в мясопептонном бульоне, при рН |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
9,2 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
9,6 |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
Рост в гидролизованном молоке, содержащем NaCI, % |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
4 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
6,5 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
Рост в гидролизованном молоке, содержащем желчь, % |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
20 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
30 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
40 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
Рост в молоке, содержащем метиленовый голубой, % |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,01 |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
0,1 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
Образование NH3 из аргинина |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
Нагревание в течение 30 мин при температуре, ºC |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
55 |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
60 |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
Активность кислотообразования, ч |
6 |
9 |
8 |
8 |
6 |
6 |
8 |
6 |
7 |
8 |
Предел кислотообразования, ºТ |
218 |
115 |
167 |
178 |
256 |
189 |
230 |
128 |
145 |
200 |
Сбраживание углеводов и спиртов |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
глюкоза |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
галактоза |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
лактоза |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
сахароза |
+ |
- |
± |
± |
± |
+ |
+ |
± |
± |
- |
мальтоза |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
маннит |
- |
± |
- |
+ |
+ |
± |
- |
+ |
+ |
- |
арабиноза |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
ксилоза |
+ |
- |
- |
- |
- |
± |
- |
- |
- |
- |
раффиноза |
- |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
сорбит |
± |
- |
- |
± |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
глицерин |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
декстрин |
+ |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
- |
крахмал |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
Таблица 7. Идентификация форм изучаемых бактерий по физиолого-биохимическим свойствам.
Обозначения: + положительный результат;
- отрицательный результат.
Данные таблицы 7 свидетельствуют о том, что исследуемые штаммы микроорганизмов по Граму окрашиваются положительно (то есть относятся к группе Г+ бактерий). Кроме того, отмечен их рост в молоке как при температуре 400С, так и при 450С. Все штаммы растут в мясопептонном бульоне при рН 9,2,кроме МД-9 и при рН 9,6, в отличие от штаммов ГМЗ-3, МД-7, МД-9 и МД-10. Также наблюдается рост всех штаммов в гидролизованном молоке, содержащем 2%, 4%, 6,5% NaCI, в то время как штаммы ГМЗ-2, ГМЗ-3, МД-7 и МД-8 не растут при концентрации в среде NaCl 6,5%. Отсутствует рост штамма МБЕ-4 в молоке, содержащем метиленовый голубой 0,01%. Образование NH3 из аргинина выявлено у всех штаммов, кроме ГМЗ-2,МД-8 и МД-10. Штамм МБЕ-4 не выдерживает нагревание в течение 30 мин при температуре 550С и 600С, а штамм МД-9 при температуре 600С. Активность кислотообразования варьирует от 6 до 9 часов. Предельная максимальная кислотность отмечена у штамма МБЕ-5 2560Т, а минимальная у штамма ГМЗ-2 1150Т.
Изучая, сахаролитические свойства выделенных микроорганизмов было установлено, что все штаммы сбраживают глюкозу, галактозу, лактозу. Сахарозу сбраживают все штаммы, кроме ГМЗ-2 И МД-10. Штаммы МБЕ-1 и МД-7 также сбраживают ксилозу, а штаммы ГМЗ-1 и МБЕ-5 – сорбит и декстрин.
Изучение морфологических, культуральных и физиолого-биохимических свойств позволило установить видовую принадлежность изучаемых штаммов лактобактерий. Штаммы ГМЗ-1, МБЕ-5 и МБЕ-6 идентифицированы как Streptococcus lactis; штаммы ГМЗ-2, МД-8 и МД-9 идентифицированы как Streptococcus cremoris; штаммы ГМЗ-3,МБЕ-7 и МД-10 отнесены к виду Streptococcus acetonicus, а штамм МБЕ-4 –к виду Streptococcus paracitrovorus.
Следующим этапом диссертационного исследования явилось определение технологических свойств изучаемых штаммов микроорганизмов.