Вариант 13

1. Салицилат ингибирует каталитическое действие глутаматдегидрогеназы. Определите путем графического анализа приведенных ниже данных тип ингибирования. Предполагается, что концентрация салицилата составляет 40мМ и поддерживается на постоянном уровне. Вычислите ниже величину Km для фермента и величину константы диссоциации фермент-ингибиторго комплекса K_i всеми известными методами.

Концентрация субстрата, мМ	1,5	2,0	3,0	4,0	8,0	16
Скорость образования продукта в отсутствие салицилата, мг*мин-1	0,195	0,25	0,28	0,33	0,425	0,405
Скорость образования продукта в присутствие салицилата, мг*мин-1	0,08	0,10	0,12	0,13	0,16	0,17

2. Имея достаточно чистый фермент (в растворе), какие кинетические исследования следует провести, чтобы охарактеризовать фермент?

Фермент Х расщепляет субстрат А с образованием продукта В. Соединения С и D ингибируют реакцию. В рассматриваемом ниже эксперименте под действием определенного (постоянного) количества Х происходит превращение А в В в присутствии С или D. Концентрации выражены в мкмоль/мл, начальные скорости реакций—в мкмолях А, превращенного за 1 мин в 1 мл раствора. На основании этой информации сделайте мотивированное заключение о типе ингибирования, вызываемом С и D.

[C], мМ	Скорость		[D],мМ	Скорость
	[A]=8мМ	[A]=24мМ		[A]=8мМ	[A]=24мМ
0	5,0	10,0	0	5,0	10,0
1,0	3,4	—	1,0	2,3	—
2,5	2,3	4,5	2,5	1,3	5,4
4,0	—	3,6	4,0	—	4,2
5,0	1,6	3,1	5,0	0,7	3,5
7,0	1,2	2,4	7,0	0,6	2,7

Вариант 14

1. Бензоат 1,2,5-триметилпиперидол-4(-изомер) является ингибитором гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Определить тип ингибирования и найти константудиссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы.

Влияние -изомера бензоата 1,2,5-триметилперидола-4 на кинетику гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Условия опыта: рН 7,4; 25С; фосфатный буфер (0,001М)

[I]105, M	[S]0104, M	v, усл. ед.
0	10,00 2,50 0,91 0,50	5,55 4,45 2,94 2,09
0,5	10,00 2,50 0,91 0,50	4,77 3,78 2,56 1,79
2,0	10,00 2,50 0,91 0,50	2,86 2,28 1,52 1,06

2. Установить тип ингибирования и параметры ингибирования исходя из данных таблицы. Концентрация ингибитора в эксперименте составила 0,006 моль/л.

Концентрация субстрата, ммоль/л	Начальная скорость реакции в отсутствие ингибитора	Начальная скорость реакции в присутствие ингибитора
0,23	0,29	0,12
0,38	0,41	0,18
0,76	0,63	0,32
1,53	0,84	0,50
2,35	0,95	0,63
4,9	1,1	0,87
6,86	1,14	0,95