Вариант 7

1. Аргиназа (К 3.5.3.1.) катализирует расщепление аргинина на мочевину и орнитин. Кроме участия в орнитиновом цикле, аргиназа, как известно, играет важную роль и во многих других процессах, происходящих в различных тканях живых организмов. Гидроксиламин инактивирует фермент, присоединяясь к карбоксильным и карбонильным группам, расположенным в области активного центра аргиназы. Используя данные, приведенные ниже, определите к какому типу ингибиторов относится гидроксиламин, а также константу ингибирования. Концентрация L-аргинина в экспериментах составила 5,0 и 1,0 мМоль. Расчет параметров ингибирования выполните всеми известными методами.

Концентрация гидроксиламина, мМоль/л	Начальная скорость реакции, усл. ед-цы
	[L-аргинина]1	[L-аргинина]2
2	0.91	0.53
5	0.85	0.47
7.5	0.83	0.43
12.5	0.62	0.36
19	0.49	0.28
25	0.41	0.23

2. Бензоат 1,2,5-триметилпиперидол-4(-изомер) является ингибитором гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Определить тип ингибирования и найти константудиссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы. Расчет параметров ингибирования выполните всеми известными методами.

Условия опыта: рН 7,4; 25С; фосфатный буфер (0,001М).

[I]105, M	[S]0104, M	v, усл. ед.
0	10,00 2,50 0,91 0,50	5,55 4,45 2,94 2,09
1,0	10,00 2,50 0,91 0,50	4,00 3,18 2,16 1,49
2,0	10,00 2,50 0,91 0,50	2,86 2,28 1,52 1,06
3,0	10,00 2,50 0,91 0,50	2,38 1,85 1,24 0,87

.

Вариант 8

1. Выведите выражение для зависимости начальной скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата. Ферментативное превращение субстрата А ингибируется соединениями В и С. В таблице приведены начальные скорости (в мкмольмл^-1мин^-1) превращения А в присутствии В или С (концентрации указаны в мкмоль/мл). Количество фермента во всех опытах одинаково.

а)

Концентрация А	10
Концентрация В	0	0,5	2,0	3,0	4,0	8,0
Скорость	10	8,0	5,3	4,2	3,6	2,2
Концентрация С	0	1,0	2,0	3,0	4,0	5,0
Скорость	10	4,5	2,9	2,1	1,68	1,39

б)

Концентрация А	30
Концентрация В	0	1,5	2,5	3,5	5,0	7,0
Скорость	20	11,8	9,0	7,8	6,2	4,8
Концентрация С	0	1,0	2,0	3,0	4,0	8,0
Скорость	20	15,4	11,8	10,0	8,4	5,3

Какие заключения можно сделать о действии ингибиторов. Изложите основания для заключений. Рассчитайте параметры ингибирования, используя все известные методы.

2. Метионин образуется при биосинтезе (Escherichia coli) в результате ферментативного моделирования гомоцистеина 5-метилтетрагидроптероилтриглута-матом. В эксперименте, в котором в качестве донора С1-фрагментов выступал серин, было изучено влияние добавления тетрагидроптероилтриглутамата на кофакторную активность триглутамата. Образование метионина регистрировали микробиологическим методом. Были получены следующие результаты:

Триглутамат, мкмоль/л	Количество образовавшегося метионина, нмоль
	В отсутствие моноглутамата	В присутствии 30 мкмоль/л моноглутамата
10	450	143
12,5	506	172
16,7	575	218
25,0	680	286
50,0	790	455

Установите тип ингибирования и рассчитайте параметры ингибирования, используя все известные методы