Вариант 21

1. В таблице приведена зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации ингибитора и субстрата. Концентрация субстрата 0,005 и 0,01 моль/л . Используя данные таблицы определить тип ингибирования и рассчитать Km, Vmax, Ki. Всеми известными методами.

Концентрация ингибитора, мкмоль/мл	1	2	5	10	20
Начальная скорость реакции ([S]=0.005) моль/л, усл.единицы	0,145	0,141	0,129	0,113	0,09
Начальная скорость реакции ([S]=0.01) моль/л, усл.единицы	0,315	0,286	0,24	0,189	0,133

2. Измеряли кинетику ферментативной реакции в зависимости от концентрации субстрата в присутствии или в отсутствие ингибитора (I). Получены следующие данные:

[S]104, М	Скорость реакции, мкмоль/мин
	Без ингибитора	С ингибитором
0,3	10,37	4,05
0,5	14,5	6,4
1,0	22,5	11,3
3,0	33,8	22,6
9,0	40,5	33,8

а) Чему равны V_MAX и K_M в отсутствие ингибитора? В присутствии его?

б) К какому типу ингибирования относится данный случай?

в) Чему равна константа связывания ингибитора? Определить константу ингибирования всеми известными методами.

г) Если [S] = 110^-5 М и [I] = 210^-3 M, то какова доля молекул фермента, связавших субстрат? Связавших ингибитор?

д) Если [S] = 310^-5 М, то какова доля молекул фермента, связавших субстрат в присутствии 210^-3 M ингибитора и в отсутствие его? Сравните соотношение полученных величин с соотношением скоростей реакции при тех же условиях.

Вариант 22

1. Измеряли кинетику ферментативной реакции в зависимости от концентрации субстрата в присутствии или в отсутствие ингибитора. Были получены следующие данные:

[S]104, M	Скорость реакции, мкмоль/мин
	без ингибитора	с ингибитором
0,3	10,37	4,05
0,5	14,5	6,4
1,0	22,5	11,3
3,0	33,8	22,6
9,0	40,5	33,8

а) Чему равны Vmax и Kм в отсутствие ингибитора и в присутствии его?

б) Каков тип ингибирования?

в) Чему равна константа связывания ингибитора?

г) Если [S]=1 10^-5 M и [I]=2 10^-5 M, то какова доля молекул фермента, связавших субстрат; связавших ингибитор?

2. Декарбоксилирование глиоксилата митохондриями ингибируется малонатом. При кинетическом исследовании были получены следующие результаты:

Концентрация глиоксилата, мМ	Скорость выделения СО2 (условные единицы)
	в отсутствие малоната	при концентрации малоната 1,26 мМ	при концентрации малоната 1,96 мМ
1,00	2,85	2,17	1,76
0,75	2,45	1,84	1,47
0,60	2,1	1,44	1,25
0,50	1,84	1,32	1,07
0,40	1,60	1,10	-
0,33	1,40	-	-
0,25	1,11	-	0,56

Определить тип ингибирования и параметры процесса ингибирования всеми известными методами.