Вариант 9

1. α-кетоглутарат является конкурентным ингибитором реакции окисления N-метил-L-глутамата, катализируемого N-метилглутамат-дегидрогеназой. Определить константу диссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы всеми известными методами.

[α-кетоглутарат]·103, М	[S]0·10 4, М	V0·106, М/мин
0	1,00	1,67
	0,625	1,43
	0,500	1,33
	0,417	1,25
	0,264	1,00
0,6	1,67	1,67
	1,00	1,43
	0,625	1,18
	0,500	1,04
	0,330	0,83
3,0	5,00	1,56
	1,67	1,00
	1,00	0,77
	0,667	0,57
	0,500	0,45

Условия опыта: рН 7,4; 30^оС, [E]₀=6·10^-2 мг/мл.

2. Выведите уравнение, которое показывает отношение скорости ферментативной реакции v в отсутствие ингибитора к скорости v₁ той же реакции в присутствии конкурентного ингибитора. Чем отличается это уравнение от соответствующего уравнения для конкурентного ингибирования?

В опыте по определению влияния мочевины на гидролиз амида пропионовой кислоты ферментов амидазой из экстракта Pseudomonas aeruginosa были получены приведенные ниже данные:

Концентрация амида пропионовой кислоты,М	Начальная скорость гидролиза амида пропионовой кислоты
	В отсутствие мочевины	В присутствии мочевины
		1 мМ	2 мМ
0.25	1.00	0.59	0.31
0.02	0.50	0.27	0.15
0.007	0.30	0.17	0.092

Определите тип ингибирования данной реакции и рассчитайте K₁- константу диссоциации комплекса фермент-мочевина всеми известными методами.

Вариант 10

1. Бензоат 1,2,5-триметилпиперидол-4 (β-изомер) является ингибитором гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Определить тип ингибирования всеми известными методами и найти константу диссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы:

[I] ∙ 105, М	[S]0 ∙ 104, М	V, усл. ед.
0	10,00	5,55
	2,50	4,45
	0,91	2,94
	0,50	2,09
1,0	10,00	4,00
	2,50	3,18
	0,91	2,16
	0,50	1,49
3,0	10,00	2,38
	2,50	1,85
	0,91	1,24
	0,50	0,87

2. В некоторых работах за показатель ингибирующей способности эффектора принимают такую концентрацию последнего, которая вызывает уменьшение скорости ферментативной реакции в два раза (I₅₀). Найти связь между I₅₀ и K_I для случаев конкурентного и неконкурентного ингибирования.