Вариант 25

1. Холевая кислота является ингибитором фермента 7–гидроксилазы, который катализирует реакцию превращения холестерола в 7–гидроксихолестерол. Определить тип ингибирования и константу ингибирования всеми способами. Концентрация ингибитора 0,001 М.

Концентрация субстрата, мМоль	0.91	0.85	0.72	0.54	0.37	0.28
Скорость образования продукта в отсутствие ингибитора, усл.ед.	205.3	204.5	195.4	175.9	152.3	132.6
Скорость образования продукта в присутствие ингибитора, усл.ед.	75.41	71.1	62.55	49.6	36.7	28.2

2. Бензоат 1,2,5-триметилпиперидол-4(-изомер) является ингибитором гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Определить тип ингибирования и найти константу диссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы.

Влияние -изомера бензоата 1,2,5-триметилперидола-4 на кинетику гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Условия опыта: рН 7,4; 25С; фосфатный буфер (0,001М)

[I]105, M	[S]0104, M	V, усл. ед.
0	10,00 2,50 0,91 0,50	5,55 4,45 2,94 2,09
0,5	10,00 2,50 0,91 0,50	4,77 3,78 2,56 1,79
1,0	10,00 2,50 0,91 0,50	4,00 3,18 2,16 1,49
2,0	10,00 2,50 0,91 0,50	2,86 2,28 1,52 1,06

Вариант 26

S, ммоль/л.	Скорость реакции, ммоль/лмин
	Без ингибитора	С ингибитором
1,17	1,48	0,59
1,95	2,07	0,91
3,9	3,21	1,63
7,8	4,26	2,57
12	4,82	3,23
25	5,60	4,43
35	5,79	4,83

1. На протекание ферментативной реакции оказывает ингибирующее действие соединение X. По данным зависимости скорости реакции от концентрации субстрата в отсутствие и в присутствие ингибитора найдите константу ингибирования и определите тип ингибирования. Концентрация ингибитора в эксперименте составила 0,0001 моль/л.

2. Выведите зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации [I] (конкурентного ингибитора). При определении ингибиторной константы для ацетата натрия, действующего на гидролитический фермент, были получены приведенные ниже данные. Определить тип ингибирования и константу ингибирования. Какие заключения качественного и количественного характера можно сделать на основании этих данных?

Концентрация ацетата натрия, М	Концентрация субстрата 3мМ	Концентрация субстрата 5мМ
	Скорость реакции при добавлении ацетата
0	1,64	2,1
0,03	1,33	1,79
0,06	1,15	1,60
0,09	1,00	1,45
0,12	0,89	1,30
0,15	0,81	1,18
0,18	0,735	1,09
0,21	0,675	1,01
0.24	0,625	0,94

Реакцию проводили при 25°С в 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4), скорость выражали числом микромолей субстрата, гидролизованного за 1 мин на 1 мг белка. (University of Manchester, Biological Chemistry Honours Course Finals, 1967).