Работа 2. Определения вязкости крови.

ВЯЗКОСТЬ - показатель, характеризующий внутреннее сцепление составных частей крови. Вязкость- это способность оказывать сопротивление течению жидкости при перемещении одних частиц относительно других за счет внутреннего трения. Вязкость имеет большое значение для дви­жения крови по сосудистой системе, т.к. она во много определяет гидродинамические свойства крови. На величину вязкости влияет содержание форменных элементов, гемоглобина и белков плазмы.

Наиболее простым методом определения вязкости крови является наблюдение времени протекания ее через капиллярные трубочки (вискозиметры). Насосать воду в вискозиметр до верхней метки и зажать пальцем выходное отверстие. Определить с помощью секундомера вре­мя вытекания воды (до нижней метки). Проверить трижды. Точно таким же методом определить время вытекания стабилизи­рованной крови из вискозиметра.

Время вытекания крови разделить на время вытекания воды. По­лученная величина характеризует вязкость крови. Вязкость крови в 3-6 раз больше вязкости воды. После определения капилляры промыть водой и просушить.

Работа 3. Гемолиз. Осмотическая резистентность (устойчивость эритроцитов).

ГЕМОЛИЗ - это выход гемоглобина в плазму (раствор), вызван­ный повреждением (разрывом или растворением) оболочки эритроцита. Гемолиз может быть вызван воздействием разных повреждающих факто­ров - механических, термических, химических, осмотических, биологи­ческих (гемолизинов).

Осмотический гемолиз происходит при помещении эритроцитов в гипотонический раствор (т.е. раствор с меньшим осмотическим давлением) или в изотонический раствор веществ, способных диффундировать через оболочку эритроцита (мочевина, глюкоза).

Под РЕЗИСТЕНТНОСТЬЮ (устойчивостью) эритроцитов понимают их способность противостоять различным, разрушительным воздействиям. Обычно исследуют резистентность эритроцитов по отношению к гипото­ническим растворам хлористого натрия, т.е. их осмотическую устой­чивость. В нормальных условиях эритроциты выдерживают концентра­цию хлористого натрия в пределах 0.60…0.40%, не гемолизируясь. У сельскохозяйственных животных наименьшую резистентность имеют эри­троциты овец, коз, свиней, наибольшую - птиц и рыб. В летний пери­од времени резистентноеть эритроцитов животных повышается.

1. Гемолиз под влиянием физических и химических факторов.

Берут три пронумерованные пробирки. В первую пробирку наливают 5 мл дистиллированной воды и 5 капель крови. Во вторую- 5 мл 1% раствора хлорида натрия, 1 мл нашатырного спирта и 5 капель крови. В третью - 5 мл 1% р-ра хлорида натрия и 5 капель крови. Все пробирки встряхивают и ставят на 5 минут в штатив (рис. 54.).

1- физический гемолиз; 2- химический гемолиз;

3-плазмолиз эритроцитов.

Рис. 54. Гемолиз и плазмолиз эритроцитов.

ПЛАЗМОЛИЗ - сморщивание, сжатие эритроцитов, в гипертонических растворах (в пробирке раствор мутный, появляется взвесь эритроцитов).

Физический гемолиз – разрыв, разрушение оболочки эритроцитов и выход гемоглобина в плазму (раствор) (в пробирке раствор прозрачный, ярко красного цвета).

Химический гемолиз – растворение оболочки эритроцитов и выход гемоглобина в плазму (раствор) (в пробирке раствор прозрачный темно красного цвета).

Записывают результаты, обращая внимание на степень окраски жидкости и на ее прозрачность.

2. Определение осмотической резистентности эритроцитов.

Приготавливают растворы хлорида натрия различной концентрации из 1% раствора хлорида натрия по следующей схеме (табл. 14.):

Таблица 14

№ пробирки	1% раствор хлорида натрия (исходный раствор), мл	Дистиллированная вода, мл	Концентрация (рабочего раствора) хлорида натрия, %	Окраска раствора после центрифугирования	Осадок эритроцитов	Границы резистентности
1	0.9	0.1	0.9
2	0.8	0.2	0.8
3	0.7	0.3	0.7
4	0.6	0.4	0.6
5	0.5	0.5	0.5
6	0.4	0.6	0.4
7	0.3	0.7	0.3
8	0.2	0.8	0.2

В каждую пробирку пипеткой вносят по 2 капли стабилизированной крови, хорошо смешивают и дают постоять 3…5 минут. Затем все пробирки центрифугируют при 2000 об/мин.

По результатам опыта опре­деляют минимальную, максимальную резистентность и ширину резистентности. Занести в таблицу результаты "+" - полный гемолиз, "" - частичный гемолиз, "-" - отсутствие гемолиза.

Минимальная резистентность эритроцитов соответствует концен­трации хлорида натрия (0.7…0.5%), обуславливающей частичный гемолиз эритроцитов, в пробирках жидкость слабо окрашена, на дне пробирок имеется осадок эритроцитов.

Максимальная резистентность эритроцитов соответствует концентрации хлорида натрия (0.4…0.2%), обуславливающей полный гемолиз, в пробирках жидкость прозрачна, окрашивается в ярко красный цвет, осадок эри­троцитов отсутствует.

ВОПРОСЫ:

1. Что показывает гематокритный показатель.

2. Что такое вязкость крови, как ее определить.

3. Объясните явления гемолиза и укажите его причины.

4. Что называется осмотической резистентностью эритроцитов.

5. Дайте понятие минимальной и максималь­ной резистентнооти эритроцитов.

6. Что называется изо-, гипо-, гипертоническими растворами хлорида натрия и каково их действие на эритроциты.

ЗАНЯТИЕ 22. СКОРОСТЬ ОСЕДАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ). ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ ПО САЛИ И С ПОМОЩЬЮ ЭРИТРОГЕМОМЕТРА.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Овладеть методикой определения скорости оседания эритроцитов, выяснить механизм реакции оседания эритроцитов и его значение для клиники, овладеть методикой определения количества гемоглобина по Сали и с помощью эритрогемометра, определить его количество, изучить основные свойства и значение гемоглобина.