Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Эксклюзионная хроматография.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
3.07 Mб
Скачать

Витамин в12

Витамин В12 это витамин, необходимый людям и другим позвоночным. Витамин В12 это необходимый кофактор многих жизненно важных биохимических реакций, п роисходящих в нашем организме. Одна из функций витамина В12 связана с разрушением жиров. Витамин В12 в большом количестве встречается в яйцах, мясных и молочных продуктах. Растения и овощи не содержат витамина В12. Поэтому люди, придерживающиеся строгой вегетарианской диеты, обычно испытывают недостаток витамина В12, если только они не принимают его дополнительно.

Наш кишечник не способен всасывать чистый витамин В12. Для всасывания витамин должен связаться в желудочно-кишечном тракте со специальным белком-переносчиком. В составе такого комплекса витамин В12 может попасть через стенки кишечника в кровяное русло, и затем в печень.

Поскольку витамин В12 нужен в микроколичествах (людям в день нужно около 3 микрограмм), недостаточность этого витамина встречается крайне редко. К сожалению, у некоторых людей встречается генетическое заболевание, при котором ген, кодирующий белок-переносчик витамина поврежден. Эти люди не могут синтезировать белок, нужный для всасывания витамина в кровяное русло. Несмотря на то, что они потребляют с пищей нужное количество витамина В12, из-за отсутствия белка-переносчика они все равно не получают его в достаточном количестве.

Контрольный список () для подготовки рабочих мест

Рабочие места учеников

Ниже приведены приборы и расходные материалы, которые должны быть на каждом рабочем месте перед началом работы. Компонентов в составе этого набора достаточно для снабжения 8 рабочих мест.

Рабочее место учителя (общее)

Список расходных материалов и оборудования, которые должны лежать в общем месте, доступном всем ученикам, также приведен ниже. На усмотрение учителя решать, будут ли ученики иметь доступ к общим буферным растворам и оборудованию, или он сам будет отливать требуемые количества растворов и работать с оборудованием.

Рабочие места учеников

Необходимое количество

()

Пробирки для сбора фракций

12

Колонка для эксклюзионной хроматографии

1

Крышка для колонки

1

Пипетка

1

Фломастер

1

Штатив для микроцентрифужных пробирок

1

Рабочее место учителя

Смесь белков

1 флакон

Буфер для хроматографии

1 бутылка

Подготовка преподавателей к лабораторной работе

В этом разделе описана подготовка преподавателей к лабораторной работе.

Предварительная подготовка

Задачи

Растворить сухую смесь белков

Подготовить рабочие места учеников и учителя

Размножить краткие схемы эксперимента для учеников

Требуемое время

От 20 минут до часа

Процедура

Примерно за 15 минут до начала работы, возьмите одну из пипеток в составе набора и добавьте 0.5 мл дистиллированной воды во флакон со смесью белков. В течение 15 минут еще несколько раз аккуратно перемешайте . До начала эксперимента держите белки на льду или в холодильнике.

Урок 2. Руководство по лабораторной работе для учителей.

Этот раздел содержит подробное описание работы и полезные советы по ее подготовке и проведению.

Использование пипетки

П еред началом эксперимента, покажите ученикам градуировку на пипетке. Для измерений в этой работе будут использоваться отметки 250 мкл и 1 мл. Пусть ученики потренируются пользоваться пипеткой, набирая воду, чтобы научиться точно отмерять объем.

Хроматография

Т акже подчеркните, что очень важно не взмучивать слой сорбента. При нанесении на колонку образца или буфера, пипетку нужно поместить над слоем сорбента у стенки колонки. Буфер надо наносить медленно по стенке колонки. Образец медленно и аккуратно наносится прямо на поверхность сорбента (см. рис.).

Важные моменты для успешного проведения хроматографии:

  1. Одним движением отломите нижнюю часть (пробку) от колонки. Не откручивайте ее

  2. Не пытайтесь засунуть колонку очень глубоко в пробирки для сбора фракций. Это приведет к возникновению воздушной пробки, и жидкость перестанет течь. Можно поместить маленький кусочек бумаги (свернув его как спичку) между колонкой и пробиркой, что гарантирует отсутствие пережима.

  3. Колонки рассчитаны на то, чтобы течь медленно. Вся процедура хроматографии должна занимать от 20 до 30 минут. Не нужно чаще, чем это необходимо, перемещать колонку из одной пробирки в другую, так как резкое движение может повредить слой сорбента.