Практична навичка

Оснащення

Світловий мікроскоп, імерсійне масло, набір пофарбованих препаратів промислового виготовлення

Послідовність дій при «Визначенні морфології основних груп мікроорганізмів»

1. Роглянути препарати і визначити форми бактерій:кулясті ( кокки), паличкоподібні (бацили), звивисті (спірили), нитчасті (актиноміцети)

2. Розглянути препарати пофарбовані за Грамом; визначити грампозитивні (набувають синього забарвлення) і грамнегатимні (набувають червоного забарвлення).

3. Для виявлення капсул препарат фарбують за Буррі—Гінсом.( збудники пневмонії – Stafilococcus pneumonia, сибірки, чуми) .

4. Для виявлення мікобактерій туберкульозу, лепри, а також деяких актиноміцетів застосовують фарбування препарату за Цілем—Нільсеном.

3. Для виявлення спор ( ботулізм, правець, сибірка) препарат фарбують за Ожешко.

5. Для виявлення включень (зерна волютину у коринебактерій дифтерії) препарат фарбують за Нейссером.

Оснащення

Агарова культура, бактеріологічна петля,шпатель, пробірки з тампонами,спиртівка, сірники

Послідовність дій при "Посіві на щільне поживне середовище бактері­ологічною петлею":

1. Поставте чашку Петрі донизу дном зліва від спиртівки;

2. Зафламбуйте бактеріологічну петлю, візьміть матеріал для посіву із пробірки;

Увага!

Матеріал для посіву в кільці бактеріологічної петлі утворює плівку "дзеркальце".

3. Підніміть правою рукою кришку чашки Петрі так, щоб в щілину між кришкою та її дном пройшла бактеріологіч­на петля;

4. Втирайте патологічний матеріал бактеріологічною пет­лею в поверхню поживного середовища біля краю чаш­ки;

5. Зафламбуйте бактеріологічну петлю;

6. Охолодіть бактеріологічну петлю, доторкнувшись її кін­цем до внутрішньої сторони стінки чашки Петрі;

7. Покладіть бактеріологічну петлю на те місце на поверхні середовища, де нанесли патологічний матеріал;

8. Продовжіть робити посів штрихами по всій поверхні чаш­ки, не відриваючи петлі від середовища;

Увага!

Штрихи наносять через всю поверхню середовища від однієї стінки чашки до іншої (протилежної) і розташовують їх якомога ближче один від одного. Завдяки цьому лінія посіву стає якнайдовшою, що дає змогу отримати ізольовані колонії.

9. Закрийте чашку Петрі;

10.Зафламбуйте бактеріологічну петлю, поставте її в банку; —- закрийте спиртівку;

11.Підпишіть на кришці чашки назву поживного середовища і дату його виготовлення;

12. Переверніть чашку дном догори, підпишіть номер, дату посіву, назву культури за бінарною номенклатурою.

Увага!

Увага! Підпис посуду здійснюється відповідно до Держав­них санітарних правил (ДСП 9.9.5.-080-02).

Послідовність дій при "Посіві у рідке поживне середовище бактері­ологічною петлею":

1. Візьміть бактеріологічну петлю в праву руку, зафламбуйте її.

2.Візьміть чашку Петрі з культурою у ліву руку.

3.Охолодіть петлю, доторкнувшись до внутрішньої стінки чашки.

4.Заберіть матеріал з однієї колонії.

5.Поставте чашку Петрі, візьміть пробірку з МПБ.

6.Візьміть мізинцем правої руки пробку пробірки і притис­ніть її до долоні, пробку постійно тримайте в руці.

7.Зафламбуйте отвір пробірки.

8.Тримайте пробірку біля полум'я так, щоб отвір її був не далі як на 10 см від полум'я.

9.Уведіть петлю в пробірку, розітріть на її стінці матеріал.

10.Опустіть петлю в поживне середовище, змийте матеріал зі стінки пробірки.

11.Вийміть петлю з пробірки, не торкаючись її стінок.

12.Зафламбуйте отвір пробірки, закрийте її пробкою.

13.Поставте пробірку у штатив.

14.Зафламбуйте петлю, поставте її в склянку з інструмен­том.

Послідовність дій при проведення посіву шпателем

Алгоритм "Проведення посіву шпателем":

1. підпишіть чашку Петрі з ЕМС;

2. нанесіть на поверхню середовища піпеткою чи бактері­ологічною петлею одну краплю посівного матеріалу або тампоном на сегмент 1x2;

3. візьміть у праву руку шпатель (тримайте його як олівець), зніміть з нього папірець, швидко зафламбуйте шпатель;

4. покладіть його на нанесену краплю посівного матеріалу на поверхні поживного середовища;

5. зробіть посів шпателем (робіть шпателем колові рухи правою рукою, прокручуйте чашку лівою рукою);

Увага!

За такого методу посіву отримують рясний ріст мі­кроорганізмів по всій поверхні поживного середовища. Такий посів називається суцільним, або посів газоном.

6. закрийте чашку, поставте її догори дном;

7. опустіть шпатель у дезінфекційний розчин.

Послідовність дій при "Посіві тампоном на пластинчасті середовища"

1. Підпишіть чашку Петрі з середовищем ЖСА (на кришці — назву середовища і дату виготовлення, на дні — номер аналізу, назву культури, дату посіву).

2. Запаліть спиртівку, поставте ліворуч від неї підписану чашку Петрі із середовищем ЖСА дном догори.

3. Візьміть тампон у праву руку.

4. Візьміть чашку із середовищем ЖСА у ліву руку, підне­сіть її до полум'я не далі ніж на 10 см.

5. Зробіть посів тампоном зигзагоподібними штрихами.

6. Закрийте чашку.

7. Закрийте спиртівку.

8. Опустіть тампон у пробірку.

Оснащення

Агарова культура, фізіологічний розчин, предметні скельця, бактеріологічна петля, спиртівка, мікроскоп

Послідовність дій "Визначені культуральних властивостей мікроорганізмів на пластинчастих середовищах».

1. Візьміть чашку Петрі у ліву руку, тримайте її проти дже­рела світла на рівні очей дном до себе;

2. Відмітьте маркером ізольовану колонію;

3. Опишіть ознаки цієї колонії;

4. Визначте у проникаючому світлі розмір, форму колонії, контур краю, прозорість;

5. Покладіть чашку Петрі на ліву руку дном донизу;

6. Розгляньте колонію у відбитому світлі, визначте рельєф, характер поверхні, колір;

7. Покладіть чашку на предметний столик мікроскопа до­гори дном, встановіть об'єктив х8, опустіть конденсор, визна­чте структуру колонії;

8. Визначте консистенцію колонії, торкнувшись до неї бак­теріологічною петлею.

Увага!

Консистенцію колонії найчастіше визначають під час виготовлення мазка або пересіванні культури.

Оснащення

Агарова культура,стандартне поживне середовище,фізіологічний розчин, набір паперових дисків з антибіотиками промислового виробництва,пінцет,

Послідовність дій

1. Поставте чашку Петрі з поживним середовищем із злегка відкритоою кришкою для підсушування (на 30-40 хв), потім закрийте чашку кришкою.

2. Підготуйте культуру мікроорганізмів (інокулянт) до посіву.

3. Підпишіть чашку Петрі (вкажіть назву середовища, номер аналізу, назвуу культури, дату посіву).

4.Розведений інокулянт (суспензія чи бульйонна культура мікроорганізмів) в об’ємі 1-2 мл наносять піпеткою на поверхню середовища і похитуючи чашку рівномірно розподіляють по всій поверхні середовища.

5.Поставте чашку зі злегка відкритою кришкою для підсушування поверхні середовища за кімнатною температурою протягом 10-15 хв., потім закрийте чашку кришкою.

6. Поставте чашку донизу дном біля спиртівки.

7.Візьміть у праву руку пінцет, зафламбуйте його.

8. Візьміть у ліву руку флакон з дисками, зніміть з нього пробку мізинцем правої руки, зафламбуйте отвір флакона.

9. Візьміть пінцетом один диск, зафламбуйте отвір флакона, закрийте його пробкою, поставте на стіл.

10.Лівою рукою злегка підніміть кришку чашки й покладіть диск на поверхню середовища на відстаніі 2 см від краю чашки, придавіть його злегка бланшами пінцета.

11. Накладіть рівномірно інші диски.

Увага!

На одну чашку кладуть не більше 6 дисків!

Увага!

Чашки тримайте біля полум’я на відстані не далі ніж 10 см. Пінцет фламбуйте кожного разу перед тим, як узяти новий диск; при накладанні наступних дисків чашку обертайте так, щоб зручно було накладати диски; дотримуйтеся вимог асептики.

12.Поставте чашки в термостат догори дном

13. Культивують мікроорганізми за температури 35-37 С протягом 18-20 годин.

Оснащення

Агарова культура мікроорганізмів з паперовими дискаи, лінійка, таблиці

Послідовність дій

Ч ашки Чашки ставлять догори дном на темну матову поверхню або тримати чашку проти джерела світла.

Лінійкою вимірюють діаметр зони затримки росту мікроорганізмів з точністю до1 мм, включаючи діаметр дисків.

Результати оцінюють за таблицею,