- •Міністерство охорони здоров’я україни національний медичний університет імені о.О.Богомольця «Затверджено»
- •Методичні вказівки для викладачів
- •1.Конкретні цілі:
- •2. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція)
- •3. Організація змісту навчального матеріалу.
- •3.1. Зміст теми.
- •3.2. Теоретичні питання до заняття:
- •3.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:
- •3.4. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент на занятті:
- •3.5. Рекомендації для оформлення протоколу.
- •4. План і організаційна структура навчального заняття.
- •5. Методика організації навчального процесу на практичному занятті.
- •5.1. Підготовчий етап.
- •5.2. Основний етап.
- •5.3.Заключний етап.
- •6. Додатки:
- •"Мікробіологічна діагностика чуми, туляремії, бруцельозу, сибірки".
- •A. Людина.
- •Тестові завдання з теми "Мікробіологічна діагностика чуми, туляремії, бруцельозу, сибірки".
- •A. Мала рогата худоба.
- •Тестові завдання з теми "Мікробіологічна діагностика чуми, туляремії, бруцельозу, сибірки".
- •A. Гризуни.
- •Коди правильних відповідей на тестові завдання з теми "Мікробіологічна діагностика чуми, туляремії, бруцельозу, сибірки".
- •7. Рекомендована література Основна
- •Додаткова
3.5. Рекомендації для оформлення протоколу.
Методи діагностики чуми.
Експрес-діагностика (РІФ, РНГА).
Бактеріоскопічний метод (мікроскопія мазків, зафарбованих метиленовим синім і за Грамом).
Бактеріологічний метод (посів на МПА і в МПБ з стимулятором росту, інкубація при 28оС, виділення чистої культури і її ідентифікація). Перші випадки захворювання треба підтвердити бактеріологічно. Вказаний метод є найбільш доказовим.
Біологічний метод (введення матеріалу в очеревину, або втирання в шкіру морським свинкам, виділення чистої культури і її ідентифікація). Використовують для виділення чистої культури з матеріалу, який забруднений сторонньою мікрофлорою.
Серологічні реакції доречно використовувати для ретроспективної діагностики чуми, а також для оцінки ефективності проведеної вакцинації.
Методи діагностики туляремії.
Серодіагностика (РА,РНГА).
Алергодіагностика (постановка алергічної проби на шкірі з алергеном тулярином).
Перші два методи являються основними методами діагностики туляремії.
Бактеріоскопічний метод (мікроскопія мазків, зафарбованих за Грамом) використовують для виявлення збудника в органах лабораторних тварин.
Бактеріологічний метод (посів на спеціальні поживні середовища, виділення чистої культури і її ідентифікація). Метод малоефективний, оскільки виділити культуру важко і не завжди вдається. Причина – висока вибагливість та низька концентрація збудника в організмі хворого.
Біологічний метод (інфікування під шкіру білих мишей і морських свинок). Використовують для діагностики «бубонної форми» туляремії.
Методи діагностики бруцельозу.
Бактеріологічний метод (посів на спеціальні середовища, виділення чистої культури і її ідентифікація). Метод найбільш інформативний, порівняно з іншими, але тривалий (5-6 тижнів). Дає можливість визначити вид бруцел. Диференційні ознаки видів бруцел наведені в таблиці 1.
Таблиця 1.
Диференційні ознаки видів бруцел.
Вид |
Потреба в СО2 |
Утворення Н2S |
Ріст на середовищі, яке містить |
Чутливість до фагу Т6 |
|
Основний фуксин (1:25000) |
Тіонін (1:50000) |
||||
B.melitensis
|
- |
- |
+ |
+ |
- |
B.abartus
|
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
B.suis
|
- |
+ |
- |
+ |
- |
Серодіагностика (РА Райта в пробірках і РА Хаддлсона на склі).
Алергодіагностика (постановка внутрішньо шкірної алергічної проби з алергеном бруцеліном – проба Бюрне).
Перші два методи являються основними методами діагностики туляремії.
Біологічний метод (інфікування під шкіру морських свинок або білих мишей, виділення чистої культури і її ідентифікація). Використовують для виділення чистої культури з матеріалу, який забруднений сторонньою мікрофлорою, або містить низьку концентрацію бруцел.
Методи діагностики сибірки.
Бактеріоскопічний метод (мікроскопія мазків, зафарбованих за Грамом і за Ожешко).
Бактеріологічний метод (посів на МПА, КА і в МПБ, виділення чистої культури і її ідентифікація).
Алергодіагностика (постановка внутрішньо шкірної алергічної проби з алергеном антраксином).
Експрес-діагностика (Реакція термопреципітаціі за Асколі, РІФ).
Біологічний метод (інфікування під шкіру білих мишей, морських свинок або кролів з подальшим виявленням збудника в органах тварин).
Таблиця 2.
Схема постановки реакції Райта.
Інгредієнти, мл |
Пробірки |
||||||
Дослід |
Контроль сироватки |
Контроль діагнос-тикума |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
Ізотонічний розчин хлориду натрію |
- |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
Сироватка в розведенні 1:25 |
0,5 |
0,5→ |
0,5→ |
0,5→ |
0,5↑
|
0,5 |
- |
Діагностикум |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
- |
0,5 |
Розведення сироватки |
1:50 |
1:100 |
1:200 |
1:400 |
1:800 |
|
|
Термостат 37оС 18-24 години
Примітка: у першу і другу пробірки додають 0,5 мл сироватки, перемішують. З другої пробірки 0,5 мл суміші переносять до наступної (третьої) пробірки, продовжуючи розведення до п’ятої пробірки, з якої 0,5 мл суміші видаляють.
Таблиця 3.
Схема постановки пластинчастої реакції аглютинації Хаддлсона.
Інгредієнти, мл |
Квадрат |
|||||
Дослід |
Контроль сироватки |
Контроль діагнос-тикума |
||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|
Сироватка (нерозбавлена) |
0,08 |
0,04 |
0,02 |
0,01 |
0,02 |
- |
Діагностикум |
0,03 |
0,03 |
0,03 |
0,03 |
- |
0,03 |
Ізотонічний розчин хлориду натрію |
- |
- |
- |
- |
0,03 |
0,03 |
Відповідні розведення сироватки в реакції Райта |
1:50 |
1:100 |
1:200 |
1:400 |
|
|
1
|
2 |
3 |
4 |
5
|
6 |