Инструкция к практическому занятию тема: «Микробиологическая диагностика вирусных гепатитов, вич»

Задачи:

• Сформировать понятие о принципах диагностики вирусных гепатитов, ВИЧ, специфической профилактике вирусных гепатитов, ВИЧ.

• Научить подбирать препараты для специфической профилактики вирусных инфекций, проводить мероприятия в случае аварии при работе с биологически активными жидкостями.

ЗАДАНИЕ № 1

1. Изучить микробиологическую диагностику вирусных гепатитов.

Подготовительный этап:

1. Подготовить рабочее место согласно правил работы в вирусологической лаборатории.

2. Подготовить емкости с дез. растворами для обеззараживания предметов, используемых в процессе работы, согласно инструкции.

Основной этап:

Поскольку выделить вирусы гепатита из патологических материалов больных крайне трудно, их дифференциация основана на использовании серологических способов выявления специфических антигенов, антител и вирусных РНК. В частности, диагностика вирусного гепатита В построена на определении в сыворотке крови больных НВsАg и антител к нему. Обнаруживается НВsАg в острой стадии заболевания, но не у всех больных, а только у большей их половины (55-70%); исчезает при выздоровлении, у частности переболевших может сохраняться в крови многие месяцы. Антитела к НВsАg обнаруживаются в ней только через несколько месяцев от начала болезни. НВsАg и специфические антитела к нему определяют в РПГ и реакции встречного иммуноэлектрофореза, ИФА и РНГА. При отрицательных результатах прибегают к выявлению антител к НВsАg. Наличие LgM к нему свидетельствует об активной репликации вируса В в печени, но, как правило, антитела к НВsАg удается обнаружить лишь на стадиях завершения инфекционного процесса и выздоровления больных. Диагностика всех других вирусных гепатитов основана на выявлении вирусоспецифических LgM методом ИФА и РИА. Продуцируются они, однако, медленно и в крайне низких титрах. Ранние LgM к вирусам Е и G обнаруживаются с 1-15-х сут после инфицирования, к дельта-вирусу – спустя 10-15 сут после заболевания, а к С-вирусу – через 3 мес. От его начала. Вирусные РНК и ДНК идентифицируются с помощью полимеразной цепной реакции и методом молекулярной гибридизации.

ЗАДАНИЕ № 2

2.1.Изучите профилактику и лечение вирусных гепатитов

Профилактика и лечение. В комплексе мер общей профилактики вирусного гепатита А предусматриваются соблюдение личной и общественной гигиены, своевременная изоляция больных, текущая и заключительная дезинфекция, направленные на прерывание многочисленных путей фекально-орального механизма передачи инфекции. Проводившаяся ранее пассивная профилактика иммуноглобулинов вирусного гепатита А у детей оказалась безуспешной. В настоящее время с целью его профилактики применяют вакцины Геп-А-ин-Вак (Россия), Вакта (США), Хаврикс (Бельгия), Аваксим (Франция), содержащие разные шатаммы вируса гепатита А, инактивированные формалином и адсорбированные на гидроксиде алюминия. При этом российская и американская вакцины выпускаются во флаконах, а бельгийская и французская, кроме того, в шприцах. Все они используются по эпидемиологическим показаниям и взрослым вводятся внутримышечно в дельтовидную мышцу по 0,5 – 1 мл, а детям – в переднебоковую область бедра по 0,25-0,5 мл, применяя для годовалых вакцину Хаврикс, для двухлетних – Вакта или Аваксим, а для трехлетних детей – Геп-А-ин-Вак. Создание прочного иммунитета достигается повторными прививками. Например, ревакцинация Геп-А-ин-Вак у взрослых проводится спустя 1 и 6 мес., а у детей – через 1 мес.

Для специфической профилактики вирусного гепатита В широко используется несколько рекомбинантных вакцин, в частности жидкие вакцины для парентерального введения Н-В-VAX II Engerix-A, на гидроксиде алюминия НВsАg, извлеченные из культуры рекомбинантного штамма Saccharomyces cerevisiae, в геном которого встроен кодирующий его ген гепаднавируса. По защитному эффекту они идентичны вакцинам из плазменного НВsАg, но в отличие от них не вызывают аллергических реакций. Обладают высокой иммуногенностью и хорошо переносятся даже новорожденными. Вводятся эти вакцины внутримышечно, но не в ягодичную область, как обычно, а в дельтовидную мышцу, где они лучше рассасываются.

Детей по календарю профилактических прививок иммунизируют в первые сутки с момента рождения, через 1 мес., и в 5-месячном возрасте, каждый раз вводя им по 0,5 мл вакцины, содержащей 2,5 мкг НВsАg (Н-В-VAX II) или 10 мкг НВsАg (Engerix-A). Ревакцинацию проводят в 13 лет одной инъекцией вакцины, содержащей вдвое больше НВsАg.

Взрослым иммунизируют 10 мкг НВsАg (Н-В- VAX II) и 20 мкг НВsАg (Engerix) тоже трижды с интервалом 1 мес. После первой инъекции, а после второй – 2 мес. Общая профилактика обеспечивается использованием шприцев одноразового пользования, тщательным отбором доноров и систематическим контролем крови на наличие НВsАg.

Специфическая профилактика вирусных гепатитов С, D, E, G не разработана. Полагают, что вакцина против гепатита В создает иммунитет также против гепатита D.

В качестве этиотропных препаратов для лечения вирусных гепатитов используют рекомбинантные интерфероны, в частности реаферон, фоскарнет, рибавирин и ламивудин, ингибирующий ДНК-полимеразу вируса гепатита В. Патогенетическая терапия строится с учетом клинических форм и стадий заболевания. Так, больным легкими формами вирусного гепатита назначают щадящую, полноценную и калорийную диету, рекомендуют витамины и обильное питье. При среднетяжелой формах болезни внутривенно вводят большие количества дезинтоксикационных средств. При тяжелой интоксикации показаны инфузии плазмы, цельной одногруппной резус-совместимой крови, преднизолон и другие гормоны, а в случае гепатодистрофии – антибиотики для подавления гнилостной микрофлоры кишечника и защиты печени от их эндотоксинов.

ЗАДАНИЕ № 3